一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油制造技术

本发明专利技术属于精油及杀菌抑菌养殖技术领域，具体地，涉及一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油。所述精油为如下任一的一种或多种：柠檬精油、茶树精油、快乐鼠尾草味道精油、丁香精油、有机玫瑰精油、百里香精油、野马郁兰精油、甜茴香精油、肉桂油精油、月桂叶精油。病原菌包括真菌和细菌；真菌为白色念珠菌；细菌为大肠杆菌、沙门氏菌、沙门氏菌。本发明专利技术提供了一类精油，利用精油的特性应用于真菌和细菌的抑菌和杀菌，精油的来源安全，有效，应用于养殖企业中极大地降低了由于滥用饲用抗生素所带来的细菌耐药性增强、环境污染严重、食品安全等问题，易于推广和应用。推广和应用。推广和应用。

【技术实现步骤摘要】
一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油


[0001]本专利技术属于精油及杀菌抑菌养殖
，具体地，涉及一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油。

技术介绍

[0002]随着养殖企业中饲用抗生素的频繁使用，抗生素所带来的细菌耐药性增强、环境污染严重等问题日益严峻，甚至引发食品安全问题。我国农业农村部已经颁发饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料，饲料禁抗时代的到来给畜禽养殖行业带来挑战和契机，寻求环保、绿色、有机、高效的抗生素替代品成为目前饲料养殖领域的热点话题，精油是复杂的挥发性化合物，属于不同化学家族的多种化学物质的混合物，包括萜烯、醛、醇、酯、酚、醚和酮等，在次生代谢过程中在植物的不同部位自然合成。精油由于其独特的风味和香味特性以及生物活性，在生物医学领域具有巨大的潜力，精油用于芳香疗法和治疗多种疾病，包括心血管疾病、糖尿病、阿尔茨海默氏症和癌症，同时也有很好的抗菌作用。深入研究精油等替抗产品作用机理以及相互之间的关系，尽可能研发出更加高效、稳定、专一的替抗产品，具有深远意义。

技术实现思路

[0003]为了解决上述所存在的技术问题，提供了一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油。
[0004]为实现上述技术目的，本专利技术所采用的技术方案如下：
[0005]一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油，所述精油为如下任一的一种或多种：柠檬精油、茶树精油、快乐鼠尾草味道精油、丁香精油、有机玫瑰精油、百里香精油、野马郁兰精油、甜茴香精油、肉桂油精油、月桂叶精油。
[0006]优选地，病原菌包括真菌和细菌。
[0007]优选地，真菌为白色念珠菌。
[0008]优选地，细菌为大肠杆菌、沙门氏菌、沙门氏菌。
[0009]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0010]本专利技术提供了一类精油，利用精油的特性应用于真菌和细菌的抑菌和杀菌，精油的来源安全，有效，应用于养殖企业中极大地降低了由于滥用饲用抗生素所带来的细菌耐药性增强、环境污染严重、食品安全等问题，易于推广和应用。
附图说明
[0011]图1为本申请实施例1的平板孔的结构示意图。
具体实施方式
[0012]以下结合具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不限制本专利技术的范围。应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变
换都应属于本专利技术所附权利要求的保护范围。
[0013]实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行制备。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品，以下实施例所述的份数均为质量份。
[0014]实施例一
[0015]一、研究目标
[0016]测定十种精油样品对标准菌株(大肠杆菌、沙门氏菌)和两株临床菌株(鸭源大肠杆菌、禽源沙门氏菌)的MIC。
[0017]二、研究内容
[0018]十种精油样品对大肠杆菌标准菌株ATCC 25922、沙门氏菌标准菌株ATCC 14028、鸭源大肠杆菌临床菌株SMS19
‑
1、禽源沙门氏菌临床菌株LY31的MIC测定。
[0019]三、实验方案
[0020]1、材料与设备
[0021]常规易耗品：2mLEP管、50mL离心管、96孔板、各种规格枪头、平皿等
[0022]所用肉汤及琼脂：LB肉汤、MH肉汤、麦康凯琼脂等
[0023]所用药品：柠檬精油、茶树精油、快乐鼠尾草味道精油、丁香精油、有机玫瑰精油、百里香精油、野马郁兰精油、甜茴香精油、肉桂油精油、月桂叶精油、阿米卡星(5120ug/mL)
[0024]设备：超净工作台、冰箱、恒温箱、摇床等。
[0025]2、待测细菌
[0026]①
大肠杆菌标准菌株：ATCC 25922；
[0027]②
沙门氏菌标准菌株：ATCC 14028；
[0028]③
鸭源大肠杆菌临床菌株：SMS19
‑1[0029]④
禽源沙门氏菌临床菌株：LY31
[0030]3、悬菌液制备
[0031]用接种环接种活化的单菌落于含有0.8ml LB肉汤的2mlEP管中，置于37℃培养箱中震荡培养4～5h至对数生长期(约108CFU/mL)。用MH肉汤将菌液稀释为2
×
105～2
×
106CFU/mL备用。
[0032]4、药物储备液制备和质控
[0033]十种精油分别分装到2mlEP管，纯度为100％。
[0034]5、评价方法
[0035]肉汤稀释法测定MIC
[0036]判定方法：
[0037](1)使用读板辅助装置(如镜台)，从微量肉汤稀释盘底部进行观察，以确定每种抗菌药物的MIC值。
[0038](2)如果对照孔生长不良或者未生长,则该试验结果无效；
[0039](3)细菌不生长或生长最显著减少时的药物浓度即为MIC。
[0040](3)精油的特殊性，读取结果时加入显色剂刃天青10uL(终浓度50ug/mL)，孵育1
‑
2小时，观察颜色区别，没有细菌生长的孔为蓝色，有细菌生长的孔为粉色。
[0041]6、实验方法
[0042]第一步：A1加入180uL的MH肉汤，A2
‑
A12孔各加100μL的MH肉汤。A1加入精油20uL。
[0043]第二步：A1孔吹打混匀后，从中吸取100μl加入A2，用枪吹打充分混匀后，吸取100μl至A3孔
……
以此类推梯度稀释到A10孔后，吸取100μl弃去。
[0044]第三步：在A1
‑
A11每孔中加入100μl稀释好的菌悬液。此时，A1
‑
A10精油纯度依次为5％，2.5％，1.25％，0.625％，0.3125％，0.15625％，0.078125％，0.0390625％，0.01953125％，0.009765625％。
[0045]三行一般为同一个药物的三次平行试验，即A、B、C行1个药物，F、G、H行为另一个药物。另外阿米卡星作为质控药，分别测4种标准菌的MIC，1菌1药做3个平行。
[0046]11列为阳性对照，每孔加入100μl的MH肉汤+100μl菌液。
[0047]12列为阴性对照，每孔加入200μl空白MH肉汤。
[0048]本实验设置为一板一菌两种药物。
[0049]第四步：将96孔板放置在37℃恒温培养箱培养16
‑
20h后，加入显色剂刃天青10uL(终浓度50ug/mL)，孵育1
‑
2小时记录结果。以在孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。阳性对照孔呈现粉色，阴性对照孔呈现蓝色。
[0050]7.实验结果
[0051]7.1MIC结果表
[0052][00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油，其特征在于，所述精油为如下任一的一种或多种：柠檬精油、茶树精油、快乐鼠尾草味道精油、丁香精油、有机玫瑰精油、百里香精油、野马郁兰精油、甜茴香精油、肉桂油精油、月桂叶精油。2.根据权利要求1所述用于抑制肉鸽常...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄婷，张峥悦，李林，丘智林，刘贤喜，王磊，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：