一种具有防治阿尔茨海默症的三七多糖制备工艺及其相关产品制造技术

本发明专利技术属于中药领域，涉及一种具有防治阿尔茨海默病的三七多糖提取物提取分离工艺及其相关产品。制备方法包括：三七药材粗颗粒，用去离子水加热回流重复提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入无水乙醇80％，置于4℃冷藏，放置，离心，取沉淀干燥。复溶后，与Sevage试剂2～4∶1体积混匀后振摇，离心，重复20～40次。将上述溶液加入纤维素层析柱中，静态吸附后用不同溶剂冲洗，取适宜部位，浓缩，干燥。本发明专利技术制备的均质多糖具有防治阿尔兹海默症的作用，可以明显改善转基因型AD果蝇的攀爬指数。果蝇的攀爬指数。

【技术实现步骤摘要】
一种具有防治阿尔茨海默症的三七多糖制备工艺及其相关产品


[0001]本专利技术属于中药领域，涉及一种具有防治阿尔茨海默病的三七多糖提取物提取分离工艺及其相关产品。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默症(Alzheimer disease，AD)，又叫老年性痴呆，是以认知、记忆和运动障碍为特征的神经退行性疾病，其病理学特征包括神经元丢失、Tau蛋白过度磷酸化缠结和淀粉样β(Aβ)斑块。迄今为止，AD的病因及发病机制尚未阐明。据流行病学调查显示，全球每3秒就会出现一例新发AD患者，AD逐渐成为一个日益严重的全球性公共卫生问题。目前临床上治疗AD的药物主要为拟胆碱药物、胆碱酯酶抑制剂等，但生物利用度均低且容易导致不良反应，如恶心、头晕、睡眠障碍等。因此，亟需开发有效治疗老年痴呆症的药物。
[0003]中医认为脏腑气血精微与脑之脉络不相顺接而发为痴呆，《灵枢.天年》有“六十岁，心气始衰，苦忧悲，血气懈惰，故好卧。
……
八十岁，肺气衰，魄离，故言善误。”的描述，从脏腑功能减退推论本病。汉代《华佗神医秘传》首次提出“痴呆”病名。其病位在脑，是与五脏相关的虚实夹杂之证，以五脏阴阳气血虚损，脑髓不足为本，血瘀、气滞、痰浊为标。三七始载于刘文泰的《本草品汇精要》一书，继而广泛流传。《本草纲目拾遗》记载“三七补血第一”。以三七、田七、山漆等名出现在16册方书中，多作为伤科金创药使用。近代以来，三七被广泛应用于各种心血管疾病的防治。目前对三七有效成分的利用仍集中在三七皂苷类成分上。据统计每年约有30吨三七多糖被废弃。本专利技术的三七多糖提取物具有良好的防治阿尔茨海默症活性，有利于三七资源的进一步开发利用。

技术实现思路

[0004]本专利技术经过大量的实验摸索，结合现代先进提取工艺，从中药材三七中提取分离出一种新的均质多糖，实验证明，该多糖具有明显的防治阿尔茨海默症的作用。
[0005]本专利技术的目的还在于提供一种制备上述均质多糖的方法。本专利技术的目的还在于提供上述均质多糖在防治阿尔茨海默症方面的用途。
[0006]本专利技术的上述化合物的提取分离纯化方法包括将三七粉碎切粗颗粒，以去离子水回流提取、不同浓度乙醇沉淀的分离、除蛋白、DEAE纤维素柱层析的纯化过程。
[0007]本专利技术所用三七可以是三七药材、三七片或三七粉。
[0008]在本专利技术的优选实施例中，制备方法包括：三七药材粗颗粒，用去离子水加热回流重复提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入无水乙醇80％，置于4℃冷藏，放置，离心，取沉淀干燥。复溶后，与Sevage试剂2～4∶1体积混匀后振摇，离心，重复20～40次。将上述溶液加入纤维素层析柱中，静态吸附后用不同溶剂冲洗，取适宜部位，浓缩，干燥。
[0009]进一步进行条件优化，三七药材切粗颗粒，用10～30倍量去离子水，加热回流3次，
每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加无水乙醇至其浓度为80％，置于4℃冷藏，放置12～24小时，离心，取沉淀干燥。复溶后，与Sevage试剂4∶1体积混匀后振摇，离心，重复20～40次。将0.3～2.0mg/ml上述溶液加入DEAE
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52纤维素层析柱中，流速为0.6
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0.9BV/h，静态吸附，之后用去离子水洗脱，洗1～2个柱体积弃去，冲洗7～10个柱体积，浓缩，冷冻干燥。
[0010]经试验验证了上述提取物具有防治阿尔茨海默症的功效。
具体实施方式
[0011]对比实施例1：
[0012]取三七药材切粗颗粒100g，用5倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为18.65％。
[0013]实施例1：
[0014]取三七药材切粗颗粒100g，用10倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为30.03％。
[0015]实施例2：
[0016]取三七药材切粗颗粒100g，用20倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为29.96％。
[0017]实施例3：
[0018]取三七药材切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为29.54％。
[0019]对比实施例2：
[0020]取三七粉末(过4号筛)100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为13.08％。
[0021]对比实施例3：
[0022]取三七片100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为23.32％。
[0023]实施例4：
[0024]取三七片切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置过夜，离心，取沉淀干燥，得率为28.71％。
[0025]对比实施例4：
[0026]取三七药材切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置4小时，离心，
取沉淀干燥，得率为21.03％。
[0027]实施例5：
[0028]取三七药材切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置12小时，离心，取沉淀干燥，得率为28.19％。
[0029]实施例6：
[0030]取三七药材切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置24小时，离心，取沉淀干燥，得率为29％。
[0031]对比实施例5：
[0032]取三七药材切粗颗粒100g，用30倍量去离子水加热回流提取3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加入四倍量无水乙醇，置于4℃冰箱中，放置24小时，离心，取沉淀干燥。多糖提取物热水复溶后，与Sevage试剂2∶1体积混匀后振摇，离心，重复40次。将上述溶液加入DEAE
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52纤维素层析柱中，流速为0.6BV/h，静态吸附后用7个柱体积去离子水冲洗，取2
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有防治阿尔茨海默症的三七多糖，其特征在于，用如下方法制得：取三七样品，加去离子水提取，加热回流3次，每次2小时，待降至常温后，离心，合并上清液浓缩，加无水乙醇至其浓度为80％，冷藏，放置一定时间，离心，取沉淀干燥。复溶后，与Sevage试剂混匀后振摇，离心，重复20～40次。将上述溶液加入DEAE纤维素层析柱中，静态吸附，之后用不同溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。2.如权利要求1所述三七样品，其特征在于，三七样品可以是三七粉、三七片或三七药材切粗颗粒。3.如权利要求1所述加去离子水提取工艺，其特征在于，去离子水用量为5～30倍。4.如权利要求1所述醇沉放置时间，其特征在于，放置时间为4～24小时。5.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：李向日，徐新房，张姝妍，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：