【技术实现步骤摘要】
具有增强的耐碱性的免疫球蛋白结合蛋白变体及其应用
[0001]本专利技术提供了具有增强的耐碱性的免疫球蛋白结合蛋白变体，更具体而言，其中免疫球蛋白结合蛋白的B3结构域中特定位置的氨基酸突变而导致相对于野生型具有增强的耐碱性的免疫球蛋白结合蛋白变体，以及其应用。
技术介绍
[0002]当培养基因工程化动物细胞时，单克隆抗体分泌到培养基中，并且由于培养基中的蛋白质与细胞本身分泌的其他蛋白质混合，使得单克隆抗体以非常低的浓度存在。因此，在抗体生产过程中，除去靶标单克隆抗体以外的杂质是一个重要的步骤。主要使用亲和色谱法，该亲和色谱法利用可以从培养基中仅选择性回收单克隆抗体的抗体亲和配体，并且蛋白A、蛋白G、蛋白L等可作为抗体亲和配体。
[0003]诸如蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L等免疫球蛋白结合细菌蛋白广泛用于纯化和检测免疫蛋白(抗体、抗体片段等)。这些免疫球蛋白结合蛋白在抗体上的识别位点和它们结合的抗体类型方面具有不同的抗体结合方式。
[0004]在这些蛋白质中，蛋白L首先从细菌大消化链球菌(Peptostr...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种包含SEQ ID NO:4的氨基酸突变的多肽，其中，所述氨基酸突变是选自由以下组成的组的至少一个氨基酸被与原氨基酸不同的氨基酸置换：从SEQ ID NO:4氨基酸序列中的第二个氨基酸脯氨酸(Pro，P)开始，SEQ ID NO:4氨基酸序列的第28位氨基酸(谷氨酸(Glu，E))，第43位氨基酸(赖氨酸(Lys，K))，第13位氨基酸(酪氨酸(Tyr，Y))，第51位氨基酸(天冬氨酸(Asp，D))，和第60位氨基酸(天冬酰胺(Asn，N))。2.如权利要求1所述的多肽，其中，所述多肽包含选自由以下组成的组的至少一种置换：第28位氨基酸(E)被甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)、亮氨酸(Leu，L)、脯氨酸(Pro，P)或色氨酸(Trp，W)置换；第43位氨基酸(K)被脯氨酸(Pro，P)或谷氨酸(Glu，E)置换；第13位氨基酸(Y)被苯丙氨酸(Phe，F)置换；第51位氨基酸(D)被缬氨酸(Val，V)或苏氨酸(Thr，T)置换；和第60位氨基酸(N)被苯丙氨酸(Phe，F)置换。3.如权利要求1所述的多肽，其中，第28位氨基酸(E)被甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)、亮氨酸(Leu，L)、脯氨酸(Pro，P)或色氨酸(Trp，W)置换。4.如权利要求3所述的多肽，其进一步包含选自由以下组成的组的至少一种置换：第43位氨基酸(K)被脯氨酸(Pro，P)或谷氨酸(Glu，E)置换；第13位氨基酸(Y)被苯丙氨酸(Phe，F)置换；第51位氨基酸(D)被缬氨酸(Val，V)或苏氨酸(Thr，T)置换；和第60位氨基酸(N)被苯丙氨酸(Phe，F)置换。5.如权利要求1所述的多肽，其包含SEQ ID NO:4氨基酸序列中的以下氨基酸突变：E28A、E28G、E28L、E28P、E28W、E28G+Y13F、E28G+K43P、E28G+D51V、E28G+N60E、E28L、E28P、E28W、E28G+K43E、E28G+D51T、E28G+N60F或Y13F+E28G+K43P。6.如权利要求1所述的多肽，其由SEQ ID NO:7、8、9、10、11、12、23、24、25、26、27、28或47的氨基酸序列表示。7.如权利要求1至6中任一项所述的多肽，其进一步包含选自由以下组成的组的至少一种：蛋白L的A、B1、B2、B4、C、W和M结构域。8.如权利要求1至6中任一项所述的多肽，其中，所述多肽相对于SEQ ID NO:4的多肽具有增强的耐碱性。9.一种多聚体，其包含权利要求1至6中任一项所述的多肽的至少两个重复单元。10.如权利要求9所述的多聚体，其由SEQ ID NO:...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔守林，朴昭英，朴率雅，沈馀援，
申请(专利权)人：艾美科健株式会社，
类型：发明
国别省市：
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