miRNA、其组合物和使用方法技术

本公开涉及一种用于将患者鉴定为具有与系统性红斑狼疮(SLE)相关的标志物的方法，所述方法包括从怀疑患有SLE的患者获得体液样品，分析所获得的体液样品中的miRNA表达，以及如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】miRNA、其组合物和使用方法


[0001]本公开提供了用于诊断系统性红斑狼疮(SLE)的方法和用于检测与SLE相关的miRNA的系统。

技术介绍

[0002]系统性红斑狼疮(SLE)是一种涉及多个器官、临床表现多样的慢性自身免疫性障碍。在风湿性疾病中，它是死亡率最高的疾病之一，也是狼疮的最常见形式。SLE的临床特征从轻度皮肤和关节受累到较晚阶段的严重衰弱性并发症例如感染和肾脏、心血管和中枢神经系统问题，它们造成了相当大的发病和死亡。作为自身免疫性疾病，SLE的特征在于存在针对自身抗原的抗体。自身抗体和免疫复合物在组织中的沉积导致身体各个器官系统的炎性损伤。CDC网站“Systemic lupus erythematosus(SLE)”(2020)。在本领域中对诊断SLE的快速且高效的方法存在着需求。

技术实现思路

[0003]一方面，本公开涉及一种用于将患者鉴定为具有与系统性红斑狼疮(SLE)相关的标志物的方法，所述方法包括：(a)从怀疑患有SLE的患者获得体液样品，(b)分析所获得的体液样品中的miRNA表达，以及(c)将所述患者鉴定为(i)具有所述与SLE相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，或者(ii)不具有所述与SLE相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话。
[0004]另一方面，所述分析可以包括从所述体液样品生成miRNA图谱，其包含：(a)将所获得的体液样品引入到包含纳米丝的流体装置中，(b)将所述体液样品中的细胞外囊泡捕获在所述纳米丝上，(c)破坏所捕获的细胞外囊泡，(d)从所破坏的细胞外囊泡提取miRNA，(e)将所提取的miRNA杂交到miRNA阵列；以及(f)确定miRNA与所述阵列的杂交。
[0005]另一方面，本公开的方法还可以包括将从怀疑患有SLE的患者获得的体液样品中的miRNA表达与从健康个体获得的体液样品中的miRNA表达进行比较。
[0006]另一方面，所述体液可以是血液、尿液、唾液、腹水、支气管肺泡灌洗液、血浆、脑脊液、或其组合。
[0007]另一方面，所述纳米丝可以是至少一个带正电荷的表面，所述表面选自ZnO、SiO2、Li2O、MgO、Al2O3、CaO、TiO2、Mn2O3、Fe2O3、CoO、NiO、CuO、Ga2O3、SrO、In2O3、SnO2、Sm2O3、EuO及其组合。
[0008]另一方面，所述纳米丝可以是多孔和/或磁性的。
[0009]另一方面，所捕获的细胞外囊泡可以使用细胞裂解缓冲液来破坏。所述细胞外囊泡可以通过碱/去污剂预处理、在约
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25℃下储存约1
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10天、任选地约7天、或其组合来破坏。
[0010]另一方面，提取miRNA可以在原位进行。
[0011]一方面，本公开涉及用于将患者鉴定为具有与SLE严重程度相关的标志物的方法，所述方法包括：a)从怀疑患有SLE的患者获得体液样品，b)分析所获得的体液样品中的miRNA表达，以及c)将所述患者鉴定为i)具有所述与中度SLE相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话；或者ii)不具有所述与中度SLE相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话。
[0012]一方面，本公开涉及用于将患者鉴定为具有与SLE的共病相关的标志物的方法，所述方法包括：a)从怀疑患有SLE的患者获得体液样品，b)分析所获得的体液样品中的miRNA表达，以及c)将所述患者鉴定为i)具有所述与SLE的共病相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话；或者ii)不具有所述与SLE的共病相关的标志物，如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话。
[0013]另一方面，如果选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低，在所述共病可以是A。
[0014]另一方面，如果选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低，则所述共病可以是B。
[0015]另一方面，如果选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低，则所述共病可以是C。
[0016]另一方面，如果选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低，则所述共病可以是D。
[0017]一方面，本公开涉及治疗SLE的方法，所述方法包括将患者鉴定为具有与SLE相关的标志物，并向所述患者给药有效量的选自非甾类消炎药(NSAID)、免疫抑制剂和抗BLyS抗体的化合物。
[0018]一方面，本公开涉及治疗S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于检测miRNA的方法，所述方法包括：(a)获得样品；(b)从所述样品捕获或分离细胞外囊泡；(c)破坏所述细胞外囊泡；和(d)检测所述样品中存在的miRNA。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述miRNA是选自SEQ ID NO：1
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484的核糖核苷酸序列或其组合。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述细胞外囊泡的分离包括将所述细胞外囊泡捕获在纳米丝上。4.一种用于将患者鉴定为具有与系统性红斑狼疮(SLE)相关的标志物的方法，所述方法包括：(a)从怀疑患有SLE的患者获得样品，(b)分析所获得的样品中的miRNA表达，以及(c)将所述患者鉴定为(i)如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则具有与SLE相关的标志物，或者(ii)如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则不具有所述与SLE相关的标志物。5.一种用于将患者鉴定为具有与SLE严重程度相关的标志物的方法，所述方法包括：(a)从怀疑患有SLE的患者获得样品，(b)分析所获得的体液样品中的miRNA表达，以及(c)将所述患者鉴定为(i)如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则具有与中度SLE相关的标志物，或者(ii)如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则不具有与中度SLE相关的标志物。6.一种用于将患者鉴定为具有与SLE的共病相关的标志物的方法，所述方法包括：(a)从怀疑患有SLE的患者获得样品，(b)分析所获得的样品中的miRNA表达，以及(c)将所述患者鉴定为(i)如果与从健康个体获得的体液样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则具有与SLE的共病相关的标志物，或者(ii)如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：1
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402的至少一种miRNA的表达提高和/或选自SEQ ID NO：161
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484的至少一种miRNA的表达降低的话，则不具有与SLE的共病相关的标志物。
7.根据权利要求4
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6中任一项所述的方法，其中所述分析包括从所述样品生成miRNA图谱，其包括：(a)将所述样品引入到包含纳米丝的流体装置中，(b)将所述样品中的细胞外囊泡捕获在所述纳米丝上，(c)破坏所捕获的细胞外囊泡，(d)从所破坏的细胞外囊泡提取至少一种miRNA，(e)检测所提取的miRNA；和(f)分析经检测的miRNA。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的方法，其中所述样品是体液。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述体液是血液、尿液、血浆、唾液、腹水、支气管肺泡灌洗液、脑脊液或其组合。10.根据权利要求4
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7中任一项所述的方法，其中所述方法还包括从所述样品分离所述细胞外囊泡。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述细胞外囊泡通过差速超速离心、密度梯度离心、免疫亲和、超滤、基于聚合物的沉淀、尺寸排阻色谱法、或其组合来分离。12.根据权利要求4
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11中任一项所述的方法，其中与从健康个体获得的样品相比，在患者样品中检测到选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低指示了所述患者患有系统性红斑狼疮(SLE)。13.根据权利要求4
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12中任一项所述的方法，其中如果与从健康个体获得的体液样品相比未检测到选自SEQ ID NO：1
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484的至少一种miRNA的表达降低，则将所述患者鉴定为不具有所述与SLE相关的标志物。14.根据权利要求4
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13中任一项所述的方法，其中所述纳米丝包含至少一个带正电荷的表面，所述表面选自ZnO、SiO2、Li2O、M...

【专利技术属性】
技术研发人员：山口裕树，
申请(专利权)人：科莱鹤株式会社，
类型：发明
国别省市：