一种预防和治疗小儿腹泻的短双歧杆菌FPHC4024及其应用制造技术

本发明专利技术提出了一种预防和治疗小儿腹泻的短双歧杆菌FPHC4024及其应用，属于益生菌技术领域。所述短双歧杆菌FPHC4024分类命名为短双歧杆菌Bifidobacterium breve，保藏编号为GDMCC NO.62945，保藏日期为2022年11月3日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，邮编：510070。本发明专利技术提供了一种短双歧杆菌FPHC4024能够引起结肠中过量水分的吸收，预防、缓解和治疗小儿腹泻有很好的作用，具有疗效好、见效快、安全无副作用、治疗周期短等优点。周期短等优点。周期短等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种预防和治疗小儿腹泻的短双歧杆菌FPHC4024及其应用


[0001]本专利技术涉及益生菌
，具体涉及一种预防和治疗小儿腹泻的短双歧杆菌FPHC4024及其应用。

技术介绍

[0002]腹泻为肠炎的主要症状，临床表现为排便次数明显超过平日习惯的频率，粪质稀薄，水分增加，每日排便量大，或含未消化食物或脓血、黏液。部分病人有发热及里急后重感觉，如未妥善治疗，甚至可能出现出血、穿孔、中毒性肠扩张、息肉增生或癌变等并发症，对人体健康危害较大。其中，小儿病毒性肠炎，又称秋季腹泻，是由轮状病毒(rotavirus，RV)侵袭小肠黏膜上皮细胞引起小肠微绒毛吸收功能障碍和双糖酶活性下降，从而导致细胞结构改变、肠道内水和电解质转运的失调，最终引起的渗透性腹泻。小儿病毒性肠炎好发于6个月至6岁的婴幼儿，每年腹泻病例中48.4％
‑
77.1％与RV有关，RV是导致婴幼儿秋冬季腹泻最常见的原因。临床症状常以急性腹泻、发热、上呼吸道感染为主，严重者可出现脱水和酸中毒等并发症，危及患儿生命。
[0003]目前，临床上治疗腹泻的方法主要是使用抗生素以及预防脱水、防止酸中毒等对症处理，治疗效果欠佳；尤其对于病毒性肠炎所致腹泻，尚无有效的治疗手段，益生菌是一种有效预防和治疗小儿腹泻的方法，且该方法效果好，无副作用，更加安全。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提出一种预防和治疗小儿腹泻的短双歧杆菌FPHC4024及其应用，通过超微粉、益生菌、益生元、Zn
‑
Ca酶解产物联合应用，在修复患儿胃肠黏膜，强化机体的有害菌抵抗能力的同时，还能改善患儿胃肠道菌群状态，最终增强患儿的机体免疫功能，促使患儿可以在短时间内康复，具有广阔的应用前景。
[0005]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0006]本专利技术提供一种预防和治疗腹泻的短双歧杆菌FPHC4024，所述短双歧杆菌FPHC4024分类命名为短双歧杆菌Bifidobacterium breve，保藏编号为GDMCC NO.62945，保藏日期为2022年11月3日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，邮编：510070。
[0007]作为本专利技术的进一步改进，所述短双歧杆菌FPHC4024的16S rRNA序列如SEQ ID No.1所示。
[0008]作为本专利技术的进一步改进，所述短双歧杆菌FPHC4024为革兰氏阳性菌的杆状细菌，在MRS培养基上菌落呈圆形，边缘整齐，乳白色，凸起，表面光滑，边缘整齐。
[0009]本专利技术进一步保护一种含有上述短双歧杆菌FPHC4024的微生物制剂，所述活菌制剂中，短双歧杆菌FPHC4024的活菌数为109‑
10
12
cfu/g。
[0010]本专利技术进一步保护一种如上述的短双歧杆菌FPHC4024在制备预防和治疗小儿腹泻的产品中的应用。
[0011]本专利技术进一步保护一种预防和治疗小儿腹泻的组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0012]S1.菌种活化：将益生菌接种至高氏培养基中，活化培养，制得菌种种子液；
[0013]S2.发酵：将黄芩、黄连和山药洗净，干燥，粉碎，加入水中，灭菌，接种步骤S1制得的益生菌菌种种子液，发酵培养，过滤，固体留用，滤液冷冻干燥，制得发酵产物；
[0014]S3.蛋白酶酶解：将步骤S2中的固体加入蛋白酶酶解，灭酶，过滤，固体留用，滤液冷冻干燥，制得酶解产物；
[0015]S4.Zn
‑
Ca的络合：将可溶性锌盐和可溶性钙盐溶于水中，加入步骤S3制得的酶解产物，搅拌混合反应，冷冻干燥，制得Zn
‑
Ca络合酶解产物；
[0016]S5.超微粉混合：将步骤S3中的固体干燥，粉碎过筛，得到固体细粉，与蒙脱石散混合均匀，制得超微粉；
[0017]S6.益生元的制备：将大豆低聚糖和低聚异麦芽糖混合均匀，制得益生元；
[0018]S7.预防和治疗小儿腹泻的组合物的制备：将步骤S2制得的发酵产物加入水中，加入海藻酸钠和羧甲基纤维素钠、乳化剂，搅拌混合均匀，加入鱼油中，快速膜乳化，滴加氯化钙溶液，常温固化，冷冻干燥，制得发酵产物微球，与步骤S4制得的Zn
‑
Ca络合酶解产物、步骤S5制得的超微粉和步骤S6制得的益生元混合均匀，制得预防和治疗小儿腹泻的组合物。
[0019]作为本专利技术的进一步改进，步骤S1中所述活化培养的温度为36
‑
38℃，时间为18
‑
24h，所述菌种种子液的含菌量为108‑
109cfu/mL；步骤S2中所述黄芩、黄连、山药和水的质量比为7
‑
10:5
‑
7:5
‑
7:120
‑
150，所述发酵培养的条件为36
‑
38℃，50
‑
70r/min，发酵培养48
‑
72h；步骤S3中所述蛋白酶选自胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种，优选地，为胰蛋白酶和碱性蛋白酶的混合物，质量比为5
‑
7:3，所述酶解的温度为35
‑
40℃，时间为2
‑
3h；步骤S4中所述可溶性锌盐选择氯化锌、硫酸锌、硝酸锌、乙酸锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌中的至少一种，所述可溶性钙选自氯化钙、葡萄糖酸钙、硝酸钙、碳酸氢钙中的至少一种，所述可溶性锌盐、可溶性钙盐、酶解产物的质量比为3
‑
5:1
‑
2:15
‑
20，所述搅拌混合反应的时间为20
‑
30min；步骤S5中所述过筛的筛网的目数为500
‑
1000目，所述固体细粉和蒙脱石散的质量比为10
‑
12:15
‑
20；步骤S6中所述大豆低聚糖和低聚异麦芽糖的质量比为3
‑
5：7；步骤S7中所述发酵产物、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠、乳化剂的质量比为12
‑
15:7
‑
10:3
‑
5:0.5
‑
1，所述乳化剂选自卵磷脂、硬脂酰乳酸钠、硬脂酰乳酸钙、双乙酰酒石酸单甘油酯、蔗糖脂肪酯、蒸馏单甘酯中的至少一种，所述快速膜的膜的孔径为1
‑
5微米，所述常温固化的时间为20
‑
30min，所述发酵产物微球、Zn
‑
Ca络合酶解产物、超微粉和益生元的质量比为15
‑
20:7
‑
12:12
‑
15:2
‑
3。
[0020]作为本专利技术的进一步改进，所述益生菌为短双歧杆菌FPHC4024，所述益生菌菌种种子液的接种量为2.5
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预防和治疗腹泻的短双歧杆菌FPHC4024，其特征在于，所述短双歧杆菌FPHC4024分类命名为短双歧杆菌Bifidobacterium breve，保藏编号为GDMCC NO.62945，保藏日期为2022年11月3日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，邮编：510070。2.根据权利要求1所述预防和治疗腹泻的短双歧杆菌FPHC4024，其特征在于，所述短双歧杆菌FPHC4024的16S rRNA序列如SEQ ID No.1所示。3.根据权利要求1所述预防和治疗腹泻的短双歧杆菌FPHC4024，其特征在于，所述短双歧杆菌FPHC4024为革兰氏阳性菌的杆状细菌，在MRS培养基上菌落呈圆形，边缘整齐，乳白色，凸起，表面光滑，边缘整齐。4.含有权利要求1
‑
3任一项所述短双歧杆菌FPHC4024的微生物制剂，所述活菌制剂中，短双歧杆菌FPHC4024的活菌数为109‑
10
12
cfu/g。5.如权利要求1
‑
3任一项所述的短双歧杆菌FPHC4024在制备预防和治疗小儿腹泻的产品中的应用。6.一种预防和治疗小儿腹泻的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.菌种活化：将益生菌接种至高氏培养基中，活化培养，制得菌种种子液；S2.发酵：将黄芩、黄连和山药洗净，干燥，粉碎，加入水中，灭菌，接种步骤S1制得的益生菌菌种种子液，发酵培养，过滤，固体留用，滤液冷冻干燥，制得发酵产物；S3.蛋白酶酶解：将步骤S2中的固体加入蛋白酶酶解，灭酶，过滤，固体留用，滤液冷冻干燥，制得酶解产物；S4.Zn
‑
Ca的络合：将可溶性锌盐和可溶性钙盐溶于水中，加入步骤S3制得的酶解产物，搅拌混合反应，冷冻干燥，制得Zn
‑
Ca络合酶解产物；S5.超微粉混合：将步骤S3中的固体干燥，粉碎过筛，得到固体细粉，与蒙脱石散混合均匀，制得超微粉；S6.益生元的制备：将大豆低聚糖和低聚异麦芽糖混合均匀，制得益生元；S7.预防和治疗小儿腹泻的组合物的制备：将步骤S2制得的发酵产物加入水中，加入海藻酸钠和羧甲基纤维素钠、乳化剂，搅拌混合均匀，加入鱼油中，快速膜乳化，滴加氯化钙溶液，常温固化，冷冻干燥，制得发酵产物微球，与步骤S4制得的Zn
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Ca络合酶解产物、步骤S5制得的超微粉和步骤S6制得的益生元混合均匀，制得预防和治疗小儿腹泻的组合物。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述活化培养的温度为36
‑
38℃，时间为18
‑
24h，所述菌种种子液的含菌量为108‑
109cfu/mL；步骤S2中所述黄芩、黄连、山药和水的质量比为7
‑
10:5
‑
7:5
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【专利技术属性】
技术研发人员：马凯，季锋，
申请(专利权)人：江苏新申奥生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：