一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明专利技术提供了一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，所述ThDREB2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ThDREB2基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术过表达ThDREB2基因提高了植物的耐旱性。本发明专利技术通过将中山杉118ThDREB2基因转入拟南芥中过量表达，自然环境干旱胁迫15天，转基因拟南芥依旧长势良好，而未转基因拟南芥叶片发黄，干枯，植株死亡。本发明专利技术ThDREB2基因的发现为基于遗传改良的强耐旱性落羽杉属树木分子育种奠定理论基础。育种奠定理论基础。育种奠定理论基础。

【技术实现步骤摘要】
一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因及其应用


[0001]本专利技术属于植物基因工程
，具体涉及一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因及其应用。

技术介绍

[0002]地球上有三分之一以上的地区位于干旱和半干旱的地区。据报道，由于缺水所造成的干旱胁迫导致植物生产力减产，已经超过其他生物和非生物胁迫所造成的减产的总和。干旱是一个使植物产生水分亏缺的环境因子，通常当植物消耗的水分大于自身吸收的水分时，会出现水分亏缺现象，严重时便会导致旱害。干旱对植物的最明显的伤害就是器官萎蔫、枯死和脱落。萎蔫的实质是因为缺水导致植株内部组织、细胞等结构发生了物理或化学变化，如膜的结构和透性改变。由于结构变化导致代谢过程受阻，如光合作用抑制，呼吸作用减慢，蛋白质分解，脯氨酸积累，核酸代谢受阻和激素代谢途径改变等。植物体内水分分配出现异常，抑制植物生长，更为严重的是引起植株不可逆的机械性损伤，导致植株死亡。已有研究证实植物对干旱的响应涉及光合、激素信号转导、植物抗氧化防御、诱导蛋白、渗透调节及诸多因素的协同作用等方面。
[0003]一直以来多数干旱研究集中在农作物方面，重点在提高产量和品质，而关于高大速生乔木的耐旱性研究较少。关于中山杉如何发挥耐旱能力的报道尚无相关报道。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中的缺陷，本专利技术的目的是提供一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，ThDREB2是影响中山杉118耐旱能力的重要基因，过表达ThDREB2提高了植株的耐干旱能力。r/>[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0006]本专利技术提供了一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，所述ThDREB2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ThDREB2基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0007]本专利技术提供了一种扩增上述技术方案所述ThDREB2基因的引物对，包括ThDREB2 ORF F和ThDREB2 ORF R；所述ThDREB2 ORF F的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；所述ThDREB2 ORF R的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。
[0008]本专利技术提供了一种含有上述技术方案所述ThDREB2基因的重组载体。
[0009]优选的，所述重组载体为过表达ThDREB2基因的载体。
[0010]本专利技术提供了一种上述技术方案所述重组载体的构建方法，包括以下步骤：
[0011]将ThDREB2基因转移到入门载体，得到重组入门载体；
[0012]将所述重组入门载体的ThDREB2基因克隆到目的载体，得到重组载体。
[0013]优选的，所述入门载体包括pCRTM8/GW/TOPOTM vector；所述目的载体包括pCAMBIA 1305
‑
eGFP。
[0014]本专利技术提供了一种含有上述技术方案所述ThDREB2基因的重组菌株或重组细胞。
[0015]本专利技术提供了上述技术方案所述ThDREB2基因在调控植物耐旱性中的应用。
[0016]优选的，过表达ThDREB2基因能够增强植物的耐旱性。
[0017]优选的，所述植物包括拟南芥。
[0018]本专利技术的有益效果：
[0019]本专利技术提供了一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，所述ThDREB2基因如SEQ ID NO.1所示，所述ThDREB2基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本专利技术通过基因克隆技术获得中山杉118ThDREB2的完整序列，通过研究发现中山杉118DREB转录因子基因ThDREB2响应干旱胁迫，在自然干旱环境下表现为持续性高表达。本专利技术进一步利用遗传转化等分子生物学手段解析ThDREB2在干旱胁迫过程中的具体功能，得出过表达ThDREB2提高了植株的耐干旱能力，ThDREB2是影响中山杉118耐旱能力的重要基因。本专利技术通过将中山杉118ThDREB2基因转入拟南芥中过量表达，自然环境干旱胁迫15天，转基因拟南芥依旧长势良好，而未转基因拟南芥叶片发黄，干枯，植株死亡。本专利技术影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因的发现为基于遗传改良的强耐旱性落羽杉属树木分子育种奠定理论基础。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0021]图1为植物过表达载体pCAMBIA 1305
‑
eGFP示意图；
[0022]图2为激光共聚焦显微镜下转基因植株叶片的荧光图片；
[0023]图3为1305
‑
eGFP
‑
ThDREB2转基因拟南芥干旱胁迫16天的过程中基因表达变化图；
[0024]图4为1305
‑
eGFP
‑
ThDREB2转基因拟南芥与未转基因拟南芥干旱15天后的表型变化图。
具体实施方式
[0025]本专利技术提供了一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，所述ThDREB2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，具体如下：
[0026]5’‑
ATGGTTGTCAGAGGGAGGAAGGGGAAGAGGAGGATTAGTGTAGCC CTGAAGCTTGCCAAATGGGCTCACAGTGATGCTGAAACGGTGAAGAAAGCTCCTGCTAAGGGGTCAAAGAAGGGGTGTATGAAGGGGAAAGGGGGTCCGGATAATGCCCATTGTAATTACAGGGGGGTTAGACAAAGAACTTGGGGGAAATGGGTTGCAGAGATCAGACAGCCCAATAGAGGAGACAGGCTATGGCTTGGTACCTTTGTTACAGCTGAAGAAGCTGCCCTTGCTTATGACTCTGCTGCTAGGATGATTTATGGCCCCTGTGCTAGGCTCAACCATCCTGAGATTAATAAGGTCTGTACTACTACTGATTCTCTTCTTATGGGAACTTTACCCGATTCTGCTGTTATGTGTTCTGAGTTCTCTGAAGTTCCACAAATTGATCTTTGTTCTGAAAATCATGAGGACAATCTGACGAGTTTTGTATCTGTGATTGAAAAAAACATTGCCATGATTCCCCTGTCTACCCCTCTTCAAGCAACCCTCCTTGAAGATCCCCCGAATGCCCAGTGCTCTAATTACTCTGAATTCTCTGTAATTGGAGTGGAGGACATTGCTAGACAAAGTGGACCCTGTTCTTCATCTGGGTCCA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种影响中山杉118耐旱能力的ThDREB2基因，其特征在于，所述ThDREB2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ThDREB2基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.一种扩增权利要求1所述ThDREB2基因的引物对，其特征在于，包括ThDREB2 ORF F和ThDREB2 ORF R；所述ThDREB2 ORF F的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；所述ThDREB2 ORF R的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。3.一种含有权利要求1所述ThDREB2基因的重组载体。4.根据权利要求3所述重组载体，其特征在于，所述重组载体为过表达ThDREB2基因的载体。5.一种权利要求4所述重...

【专利技术属性】
技术研发人员：宣磊，华建峰，芦治国，殷云龙，於朝广，
申请(专利权)人：江苏省中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：