一种溶血剂及使用该溶血剂的糖化血红蛋白试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及临床体外诊断检测领域，尤其涉及一种溶血剂及使用该溶血剂的糖化血红蛋白试剂盒。所述溶血剂包括：阳离子表面活性剂0.05mg/mL

【技术实现步骤摘要】
一种溶血剂及使用该溶血剂的糖化血红蛋白试剂盒


[0001]本专利技术涉及临床体外诊断检测领域，尤其涉及一种溶血剂及使用该溶血剂的糖化血红蛋白试剂盒。

技术介绍

[0002]正常成人血红蛋白主要由HbA，HbA2和HbF组成，组成比例分别为97％，2.5％和0.5％。在HbA中，约6％被糖基化修饰，修饰产物中主要成分为HbA1c(糖化血红蛋白)，常用HbA1c的测量值代替总糖化血红蛋白的浓度，且其结构较为稳定，是临床上常用作糖尿病控制的监测指标，其浓度为占成人血红蛋白的百分比表示，在本专利技术中主要阐述糖化血红蛋白(HbA1c)。HbA1c是人体血液中血红蛋白与血糖(主要为葡萄糖)结合的产物，它是通过缓慢、持续及不可逆的糖化反应形成。在人体内，血糖和血红蛋白结合会生成糖化血红蛋白，并与血糖浓度成正比，且在人体内可以保持120天左右，而不被代谢，所以监测糖化血红蛋白的含量变化可以反映病人8～12周血糖的变化情况。因此，糖化血红蛋白被作为糖尿病的诊断和治疗的重要指标。
[0003]与血液样品中的其它测定对象不同，血红蛋白类由于存在于红细胞中，因此要测定糖化血红蛋白就有必要使红细胞产生溶血。“溶血”是指红细胞膜被破坏、血红蛋白类物质被排出红细胞外的现象。添加溶血剂能使红细胞破裂，释放出血红蛋白和糖化血红蛋白，溶血剂中含有的磷酸盐可以和糖化血红蛋白结合，因此可以达到与其它血红蛋白分离的效果。
[0004]糖化血红蛋白检测方法根据其检测原理来分类可以分两大类：第一类是以糖化血红蛋白组分与其他组分所带电荷不同来区分，包括电泳法和HPLC法(高效液相色谱法)等；第二类是以HbA1c的化学结构不同来区分，包括亲和层析法和免疫层析法。高效液相色谱法作为医学上认定的检测HbA1c的金标准，无论从检测准确度精密度还是检测线性范围分析都是目前检测HbA1c最先进的方法。但因检测成本昂贵，并不适合基层检测机构推广使用。硼酸亲合法因性价比方面，最适合我国国情，但因需要特别注意待测标本采集和前处理过程中的标准化操作，排除溶血、脂血等干扰，而限制应用；免疫层析法可在全自动生化分析仪上进行检测，不需要额外添置仪器，所需检测成本较低，且自动化程度较高，是中、小医院的最佳选择，其中荧光免疫层析法具有精度高，重复性好的优点，被广泛应用于基层医疗中。
[0005]然而，在使用光学方法进行测量时，由于红细胞未破裂，释放出的血红蛋白不足，会对检测将引起很大的误差。当血红蛋白的量能够满足荧光微球吸附量时，检测结果不受影响，但当血红蛋白量过低的情况下，糖化血红蛋白抗体会被吸附在荧光微球上，不利于抗原抗体发生特异性反应，最终导致血红蛋白抗体形成的免疫复合物减少，导致荧光免疫复合物减少，仪器测试得出的糖化血红蛋白含量减少，该错误结果很可能会导致医院作出错误的判断，延误病情。
[0006]目前，市面上免疫层析法测量糖化血红蛋白的溶血剂主要有以下这些：
[0007]首先采用将血液样本前处理后，再滴入试剂盒样品垫中测试糖化血红蛋白含量：CN114778242A中公开了一种糖化血红蛋白前处理剂，用于使含有糖化血红蛋白的全血样本脱色，糖化血红蛋白前处理剂包括溶血剂和脱色剂，溶血剂和脱色剂的体积比为2:10，脱色剂为氧化剂。但是在该项专利中的溶血剂为亚硝酸钠、次氯酸钠以及三氯异氰尿酸，在实际生产中都存在一些问题，比如亚硝酸钠在加热条件下易生成二氧化氮，且本身为剧毒物，三氯异氰尿酸具有强烈的氯气刺激味道，次氯酸钠不能皮肤接触、吸入等，在配置这些氧化剂时，需要佩戴自吸过滤式防尘口罩以及防毒衣等，这在实际生产中是繁琐且危害工人身体健康的，不利于商品的实际生产操作过程。
[0008]CN101464453A公开了一种溶血剂的配方，该溶血剂中含有至少一种有机酸，并且所述有机酸的含量为1～20g/L。该专利技术涉及一种多用途溶血剂，可用于自动血液分析，在保持白细胞正常分类的同时能够准确测试血红蛋白，此专利技术溶血剂中添加了血红蛋白衍生物的稳定剂，避免衍生物随反应温度的变化而发生变化，保证在仪器正常使用温度范围内均能够获得准确、稳定的测试结果。但此种方法操作复杂，和生化分析仪配套使用，生化分析仪需要上大量的血浆或血清，测试的品类多，价格昂贵，不适用于基层医疗自测。同时，在溶血剂中加入过多的有机酸，导致有机酸将替换糖化血红蛋白，与单克隆抗体结合，使检测结果偏低。
[0009]CN111057150A涉及体外诊断
，公开了一种乳胶微球及其应用以及糖化血红蛋白检测试剂盒。该专利技术提供了一种偶联血红蛋白抗体的乳胶微球以及包含其在内的糖化血红蛋白检测试剂盒，所述乳胶微球的加入能使得糖化血红蛋白抗体不会被吸附或连接在乳胶上，可以消除不同血液样本中血红蛋白含量在糖化血红蛋白检测中的影响，准确检测出贫血样本中糖化血红蛋白含量，而且孵育时间更短，稳定性好，便于长期保存使用。但在该项专利技术中，需要两种试剂R1和R2，这些试剂必须在低温保存，否则会导致试剂中的蛋白变性，因此是不利于保存和运输的，且此专利技术运用在荧光免疫层析法也存在一定的局限性。
[0010]CN 113009021B公开了一种添加剂在测定糖化血红蛋白中的使用方法，包括洗脱液A、洗脱液B和溶血剂，洗脱液A和洗脱液B分别包括缓冲液、表面活性剂和添加剂，溶血剂包括表面活性剂和添加剂，添加剂为苏氨酸、β丙氨酸、甘氨酸中的一种或一种以上；还公开了一种测定全血中糖化血红蛋白的方法。此专利技术提供的糖化血红蛋白试剂盒，可以避免样本的测定值随着样本的保存时间的推移而发生变动，同时也减少了样本前处理的复杂过程，但其没有考察环境温度变化对测试结果的影响，准确度仍欠缺。

技术实现思路

[0011]本专利技术提供了一种溶血剂及使用该溶血剂的糖化血红蛋白试剂盒，以解决现有技术中操作复杂、检测结果准确度低的问题。
[0012]一种溶血剂，包括：
[0013]阳离子表面活性剂0.05mg/mL
‑
2mg/mL
[0014]牛血清白蛋白1g/L
‑
20g/L
[0015]缓冲液0.05mol/L
‑
1mol/L
[0016]非离子型表面活性剂0.1
‑
10g/L
[0017]非离子型亲水剂0.02g/L
‑
4g/L
[0018]氯化钠2g/L
‑
8g/L
[0019]有机脂肪酸0.5
‑
15g/L
[0020]防腐剂0.02％；
[0021]溶血剂的pH为7.40
±
0.05；
[0022]所述阳离子表面活性剂包括氨基酸表面活性剂；
[0023]所述有机脂肪酸包括抗坏血酸、酒石酸、辛酸、辣椒酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸一种或多种。
[0024]在其中一个实施例中，所述氨基酸表面活性剂包括赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、β
‑
丙氨酸中的一种或几种。
[0025]在其中一个实施例中，所述氨基酸表本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种溶血剂，其特征在于，包括：阳离子表面活性剂0.05mg/mL
‑
2mg/mL牛血清白蛋白1g/L
‑
20g/L缓冲液0.05mol/L
‑
1mol/L非离子型表面活性剂0.1
‑
10g/L非离子型亲水剂0.02g/L
‑
4g/L氯化钠2g/L
‑
8g/L有机脂肪酸0.5
‑
15g/L防腐剂0.01％
‑
0.02％；pH为7.40
±
0.05；所述阳离子表面活性剂包括氨基酸表面活性剂；所述有机脂肪酸包括抗坏血酸、酒石酸、辛酸、辣椒酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸一种或多种。2.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，所述氨基酸表面活性剂包括赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、β
‑
丙氨酸、精氨酸中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，所述非离子型表面活性剂为曲拉通X
‑
100；所述缓冲液为Tris
‑
HCl缓冲液；所述非离子型表面亲水剂为聚乙二醇；所述非离子型表面亲水剂为聚乙二醇600；所述防腐剂为Procline300。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的溶血剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨海霞，陈叶，刘丽霞，
申请(专利权)人：可孚医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：