一种丹参遗传转化体系的建立方法技术

本发明专利技术提供一种丹参遗传转化体系的建立方法，属于基因工程技术领域，所述方法是将含有重组载体PYLTAC380H

【技术实现步骤摘要】
一种丹参遗传转化体系的建立方法


[0001]本专利技术属于基因工程
，涉及一种丹参遗传转化方法。

技术介绍

[0002]丹参是常用中药材，同时丹参基因组小、染色体少，在转基因再生植株时世代周期较短，作为药用模式植物有着极高的研究价值。通过基因工程，可以辅助定向培育高产、高抗的优质新品种，或提高原药材次生代谢产物含量用于有效成分提取，以满足丹参巨大的市场需求量。以农杆菌介导使用叶盘转化法为转化手段的丹参遗传转化体系需要进行组织培养，因此条件要求高，影响因素多，时间长，易污染，同时品种选育年限过长等问题大大限制了新品种选育的进程，无法满足丹参生产多样化、精准化的需求。

技术实现思路

[0003]为了解决现有技术中的不足，本专利技术的目的在于提供一种丹参遗传转化体系的建立方法，利用丹参根茎结合段作为外植体，在非无菌条件下，不需要组织培养就可实现基因高效转化。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术采用的具体方案为：一种丹参遗传转化体系的建立方法，将含有重组载体的发根农杆菌侵染丹参根茎连接处根段，取出放置于蛭石培养，出芽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种丹参遗传转化体系的建立方法，其特征在于：将含有重组载体的发根农杆菌侵染丹参根茎连接处根段，取出放置于蛭石培养，出芽后2
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3周对丹参幼苗筛选检测。2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于：所述重组载体为PYLTAC380H
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SmCYP76AH1
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GFP。3.根据权利要求2所述的建立方法，其特征在于：以丹参叶片cDNA为模板，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列为引物克隆出SmCYP76AH1，通过一步克隆重组到pYLDonar
Ⅰ‑
35S
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GFP，测序正确后将重组载体pYLDonar
Ⅰ‑
35S
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SmCYP76AH1
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GFP组装到表达载体pYLTAC380H，获得重组载体pYLTAC380H
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SmCYP76AH1
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GFP。4.根据权利要求2所述的建立方法，其特征在于：所述方法具体为：将含有丹参SmCYP76AH1的重组载体PYLTAC380H
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SmCYP76AH1

【专利技术属性】
技术研发人员：吕淑芳，郭广洋，侯典云，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：