一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法技术

本发明专利技术公开了一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法。本发明专利技术对高分子量的透明质酸水溶液，采用氧系氧化剂和酸性助剂复合作用，通过程序升温控体系的制加热过程，对大分子中的糖苷键进行可控剪切降解，获得寡聚透明质酸。本发明专利技术制备得到的寡聚透明质酸具有非常好的稳定性，长时间放置无颜色变化；本发明专利技术制备得到的寡聚透明质酸可以应用于化妆品、食品、医药等领域，具有很强的实用价值。具有很强的实用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法


[0001]本专利技术属于生物材料领域，具体涉及一种降解透明质酸糖苷键的方法，具体涉及一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法。

技术介绍

[0002]透明质酸是一种从鸡冠或者微生物发酵产生的高分子聚糖，大分子聚糖中相邻两个单元糖分别含有羧基和氨基(乙酰化)。该物质具有超强的吸水能力，在皮肤表面具有良好的保湿效果，然而由于分子大，其在皮肤表皮细胞的渗透受阻；为了提高其渗透性，需要将其部分降解，降解后的聚糖为寡聚透明质酸，具有较强渗透到细胞能力，可以深入皮肤角质层，达到深层补水的功能，有激活机体免疫，修复皮肤的功效并能起到消炎和细胞修复的作用，因此降解后的寡聚透明质酸是化妆品和医药的重要原料。
[0003]由于发酵分离得到的透明质酸的分子量很大，渗透效果不佳，因此对高分子量的透明质酸进行剪切产生寡聚透明质酸很有必要。目前的相关报道，对高分子量的透明质酸降解不能有效控制。本专利技术提供一种程序升温的酸性助剂催化下的降解方法，可以控制寡聚透明质酸的分子量，因此本专利技术方法具有很强的实用价值。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，该方法通过程序升温，透明质酸实现可控降解，能够获得精准控制分子量，制备小分子透明质酸产品。
[0005]本专利技术的目的至少通过如下技术方案之一实现。
[0006]一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，将发酵产生的高分子量的透明质酸制成水溶液，然后再路酸性助剂催化体系中氧化降解，通过程序升温控制反应，能够获得所需分子量的透明质酸。具体步骤如下：
[0007](1)先将高分子量透明质酸或高分子量透明质酸钠配制成水溶液，在105
‑
115℃灭菌20
‑
60分钟，获得溶液A；
[0008](2)在溶液A中加入氧系氧化剂和酸性助剂，预反应；所述溶液A、氧系氧化剂和酸性助剂体积比为(10
‑
100):(5
‑
10):(5
‑
10)；
[0009](3)转入程序升温反应器中，进行程序升温，达到设定稳定后，保温，获得所需分子量的透明质酸，并测定分子量。
[0010]上述方法中，步骤(1)中，所述高分子量透明质酸或高分子量透明质酸钠的分子量在150万道尔顿以上。
[0011]上述方法中，步骤(1)中，所述高分子量透明质酸水溶液的质量分数浓度为1％～5％；所述高分子量透明质酸钠水溶液的质量分数浓度为2
‑
8％。
[0012]上述方法中，步骤(2)中，所述氧系氧化剂为ROOH，其中R为CH3CO或者H；所述酸性助剂为路易斯酸。
[0013]上述方法中，步骤(2)中，所述预反应时间为30
ꢀ‑
120分钟；所述预反应的温度为
30
‑
50℃。
[0014]上述方法中，步骤(3)中，所述程序升温1
‑
5℃/min，终点温度115
‑
121℃。
[0015]上述方法中，步骤(3)中，所述保温的时间30～180min。
[0016]上述方法中，所述路易斯酸为多羟基化合物，分子式为C6H8O6；或者有机金属框架化合物，分子式为C
24
H
12
ClFe3O
13
，铁原子提供催化中心。
[0017]上述方法中，步骤(2)中，所述氧系氧化剂的浓度为1％～3％w/w；不限于此。
[0018]上述方法中，步骤(2)中，所述路易斯酸的浓度为0.2％～0.4％w/w；不限于此。
[0019]本专利技术中，产品的测定方法如下：
[0020]1)精密称干燥的透明质酸样品适量，置200ml量瓶中，加0.2mol/L氯化钠溶液适量使溶解，待供试品溶液中无气泡，用0.2mol/L氯化钠溶液稀释至刻度，作为供试品溶液1。
[0021]2)取供试品溶液1分别用0.2mol/L氯化钠溶液稀释至0.8倍、0.6倍和0.4倍，作为供试品溶液2、供试品溶液3和供试品溶液4，经3号垂熔玻璃漏斗滤过后使用。
[0022]3)采用黏度测定法采用乌氏黏度计，在30
±
0.1下测定0.2mol/L氯化钠溶液的流出时间t 0与四个供试品溶液的流出时间t 1、t 2、t 3、t 4；选用合适内径乌氏粘度计。
[0023]4)使0.2mol/L氯化钠溶液流出时间为200～300秒，调整供试品溶液1称样量，使其流出时间为0.2mol/L氯化钠溶液流出时间的2.0～2.4倍。所有测试采用同一黏度计不重装试样，依法重复测定3次，3次测定值与平均值的差值不得超过平均值的
±
0.35％。采用四点法，最小二乘法线性回归计算特性黏数[η]，以比浓黏度[ηsp/C，即(ηr
‑
1)/C]对浓度C作线性回归当浓度趋近于0时，线性回归方程的截距即为特性黏数，线性回归系数应不小于0.95，单位为L/g。
[0024]5)按干燥品计算特性黏数在1.00L/g～2.49L/g之间或2.50L/g～5.50L/g。
[0025]6)平均分子量根据本品的特性黏数[η]计算平均分子量，计算结果应在标示分子量范围内。平均分子量按下式计算：
[0026][0027]与现有技术相比，本专利技术的优势在于：
[0028]本专利技术中将发酵产生的高分子量的透明质酸制成水溶液，然后再路酸性助剂催化体系中氧化降解，通过程序升温，透明质酸实现可控降解，能够获得精准控制分子量，制备小分子透明质酸产品。
[0029]本专利技术制备得到的寡聚透明质酸具有非常好的稳定性，长时间放置无颜色变化；本专利技术制备得到的寡聚透明质酸可以应用于化妆品、食品、医药等领域，具有很强的实用价值。
具体实施方式
[0030]下面结合说明书具体实施例对本专利技术作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
[0031]实施例1
[0032]称取分子量为150万道尔顿的透明质酸配制成浓度为5％w/w的水溶液(称取透明质酸5g，加入95mL去离子水，振荡均匀获得)，在105℃灭菌30分钟，获得溶液A；在此溶液中加入20mL 10％w/w的H2O2和10mL 2％w/w抗坏血酸，50℃预反应4h；将反应瓶转入程序升温反应器中，进行程序升温5℃/min，达到设定120℃后，保温2h，获得所需分子量的透明质酸，并测定分子量为3000道尔顿。
[0033]实施例2
[0034]称取分子量为150万道尔顿的透明质酸配制成浓度为1％w/w的水溶液(称取透明质酸1g，加入99mL去离子水，振荡均匀获得)，在105℃灭菌30分钟，获得溶液A；在此溶液中加入本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)先将高分子量透明质酸或高分子量透明质酸钠配制成水溶液，在105
‑
115℃灭菌20
‑
60分钟，获得溶液A；(2)在溶液A中加入氧系氧化剂和酸性助剂，预反应；所述溶液A、氧系氧化剂和酸性助剂体积比为(10
‑
100):(5
‑
10):(5
‑
10)；(3)转入程序升温反应器中，进行程序升温，达到设定稳定后，保温，获得所需分子量的透明质酸，并测定分子量。2.根据权利要求1所述的一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述高分子量透明质酸或高分子量透明质酸钠的分子量在150万道尔顿以上。3.根据权利要求1所述的一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述高分子量透明质酸水溶液的质量分数浓度为1％～5％；所述高分子量透明质酸钠水溶液的质量分数浓度为2
‑
8％。4.根据权利要求1所述的一种程序升温可控降解透明质酸糖苷键的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述氧系氧化剂为ROOH，其中R为CH3CO或者H；所述酸性助剂为路易斯酸。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：付时雨，李映伟，刘浩，杨雪迪，周锦霞，
申请(专利权)人：广州市白云区白云美湾华研国际化妆品研究院，
类型：发明
国别省市：