一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂及其制备方法和用途。本发明专利技术提供的用于缓解肝损伤的外泌体制剂主要由党参、当归、麦冬、桑葚、熟地黄、川楝子、植物外泌体提取物、谷胱甘肽、乳铁蛋白、苯甲酸钠、低聚果糖和单糖浆等原料制得。制备得到的外泌体制剂具有健脾益气固表，调和营卫，活血养血、补肝肾等功效。本发明专利技术提供的外泌液体体制剂对脾肾两虚型、气血亏损型、肝肾不足等肝损伤疾病具有良好的治疗效果，尤其对酒精性脂肪肝具有显著的治疗效果，是一种副作用小，治疗效果显著的治疗肝损伤的新药物。疗效果显著的治疗肝损伤的新药物。疗效果显著的治疗肝损伤的新药物。

【技术实现步骤摘要】
一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]根据全球疾病负担项目显示，急性肝炎、肝硬化和肝癌等疾病死亡人数约占全球死亡总数的4％。据估计，在中国，约有五分之一的人口受到某种形式的肝脏疾病困扰，包括乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、肝硬化、肝癌、非酒精脂肪肝(NAFLD)、酒精肝病(ALD)、药物诱导肝损等。尽管目前有研发出可相关的疫苗和抗病毒药物，但是，肝疾病仍然严重影响着人们的身体健康。
[0003]目前，有研究发现外泌体可以具有缓解和治疗肝损伤的作用。专利文献CN114107179A公开了一种鸡胆汁外泌体在治疗鸡肝损伤注射药物中的用途及药物，该研究发现鸡胆汁外泌体对LPS诱导的肝细胞损伤具有良好的保护作用，能明显降低LPS所致的细胞培养上清液的ALT、AST水平，降低IL
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6、TNF
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α、iNOS、Caspase、Bax表达水平，提高Bcl
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2表达水平。以LPS诱导肝损伤动物模型，观察腹腔注射鸡胆汁外泌体对LPS诱导的肝损伤的影响，明确了注射鸡胆汁外泌体一次性给药后可明显减轻LPS诱导的肝损伤，证明了鸡胆汁外泌体对肝损伤有治疗作用。
[0004]专利文献CN113171379A公开了一种间充质干细胞外泌体在制备脂肪性肝病药物中的应用，所述的脂肪性肝病为酒精性脂肪性肝病。经试验发现，间充质干细胞外泌体在治疗脂肪性肝病中具有明显的效果，尤其是酒精性脂肪性肝病；间充质干细胞外泌体与白皮杉醇的结合可显著的提高乙醛脱氢酶的酶活，延缓了酒精性脂肪性肝病与酒精相关性癌症的发生。
[0005]随着研究的深入，研究人员发现与动物外泌体相比，植物外泌体具有独特的优势，包括未被免疫系统检测到、更高的生物利用度和无害性。与游离或与蛋白质结合的miRNA相比，植物外泌体表现出更好的生物利用度。植物外泌体已被证明在胃肠道中具有稳定性，多项研究表明植物外泌体可用于口服或鼻内给药的治疗应用。与天然产物相比植物外泌体可以靶向特定器官，具有更高的溶解度、更高的屏障渗透性、更快的肠道吸收和更少的副作用。同时，植物来源的外泌体在临床应用中具有更多的优势：(1)植物来源外泌体具备组织损伤修复和免疫调控功能。(2)植物外泌体对冻融损伤适应性更强，在体内稳定性高。(3)植物来源外泌体不会自我复制，无潜在的成瘤风险。(4)外泌体相比于细胞体积更小且膜表面组织抗原低/无表达，不易引起免疫应答。(5)植物来源外泌体可穿透血脑屏障。植物外泌体生物膜结构可与机体高效融合，作为药物的载体为静脉注射药物口服化提供可能。
[0006]然而，目前对于植物外泌体的利用与开发还较为匮乏，基于植物外泌体对肝损伤的功能性产品的研究和开发具有十分重大的意义。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂及其制备方法和用途，该用于缓解肝损伤的外泌体制剂是以植物外泌体和中草药结合制成一种可以有效的改善肝脏功能，达到保肝护肝缓解酒精肝，脂肪肝功效的口服剂。专利技术人通过优化中草药配方与植物外泌体结合协同起增强改善肝脏功能的效果，尤其是对酒精性脂肪肝具有显著的治疗效果。
[0008]本专利技术提供了一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂，包括以下成分及其重量份数：
[0009]党参15～25份、当归15～25份、麦冬25～35份、桑葚15～25份、熟地黄10～20份、川楝子0.2～0.6份、植物外泌体提取物10～20份、谷胱甘肽0.5～0.9份、乳铁蛋白0.1～0.5份、苯甲酸钠0.01～0.05份、低聚果糖1～5份和单糖浆5～15份。
[0010]进一步地，所述的用于缓解肝损伤的外泌体制剂，包括以下成分及其重量份数：
[0011]党参20份、当归20份、麦冬30份、桑葚20份、熟地黄14份、川楝子0.4份、植物外泌体提取物14份、谷胱甘肽0.8份、乳铁蛋白0.2份、苯甲酸钠0.01份、低聚果糖2份和单糖浆10份。
[0012]进一步地，所述植物外泌体提取物由石榴外泌体提取物、生姜外泌体提取物和柑橘外泌体提取物按质量比(2～4):(3～5):(1～3)混合组成。
[0013]进一步地，所述石榴外泌体提取物的制备方法为：
[0014]A：将新鲜的石榴剥皮取出软籽进行榨汁，取榨汁上清在4℃，4000g离心30min，去除残留的软籽，肉碎片，以及石榴籽自体分泌质量较大的蛋白质，再以0.45um的过滤器对离心完的上清液进行过滤，去除450nm以上的杂蛋白质，得上清液；
[0015]B：称取食品级PEG6000240g、食品级NaCl29.25g，三水乙酸钠41g，溶于注射用水中，加注射用水定容到1L，混匀，使其完全溶解，4℃冷藏静置24h，将其用0.22um孔径的滤膜及滤器对其进行过滤除菌，制得0.5mol24％PEG6000饱和盐溶液；
[0016]C：将步骤A制得的上清液与步骤B制得的24％PEG6000饱和盐溶液按体积比1:1分装于500ml离心管中，并用冰乙酸调节或用稀乙酸调节pH值至4.7～5.0，盖上管盖，颠倒混匀，转入4℃冰箱，静置沉降12h，得悬液；
[0017]D：将步骤C得到的悬液直接转入离心机，在4℃，5000g离心30min，将离心好的悬液弃除上清液，盖上盖子然后倒立5min，使其多余的上清完全流干；每100ml上清用2ml生理盐水重悬，将重悬好的外泌体沉淀封好石蜡膜放置于
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80℃冰箱保存。
[0018]进一步地，所述生姜外泌体提取物的制备方法为：
[0019]A：将新鲜的生姜剥皮进行榨汁，取榨汁上清在4℃，4000g离心30min，再以0.45um的过滤器对离心完的上清液进行过滤，去除450nm以上的杂蛋白质，得上清液；
[0020]B：称取食品级PEG6000240g、食品级NaCl29.25g，三水乙酸钠41g，溶于注射用水中，加注射用水定容到1L，混匀，使其完全溶解，4℃冷藏静置24h，将其用0.22um孔径的滤膜及滤器对其进行过滤除菌，制得0.5mol24％PEG6000饱和盐溶液；
[0021]C：将步骤A制得的上清液与步骤B制得的24％PEG6000饱和盐溶液按体积比1:1分装于500ml离心管中，并用冰乙酸调节或用稀乙酸调节pH值至4.7～5.0，盖上管盖，颠倒混匀，转入4℃冰箱，静置沉降12h，得悬液；
[0022]D：将步骤C得到的悬液直接转入离心机，在4℃，5000g离心30min，将离心好的悬液
弃除上清液，盖上盖子然后倒立5min，使其多余的上清完全流干；每100ml上清用2ml生理盐水重悬，将重悬好的外泌体沉淀封好石蜡膜放置于
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80℃冰箱保存。
[0023]进一步地，所述柑橘外泌体提取物的制备方法为：
[0024]A：将新鲜的柑橘剥皮取出软籽进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于缓解肝损伤的外泌体制剂，其特征在于，包括以下成分及其重量份数：党参15～25份、当归15～25份、麦冬25～35份、桑葚15～25份、熟地黄10～20份、川楝子0.2～0.6份、植物外泌体提取物10～20份、谷胱甘肽0.5～0.9份、乳铁蛋白0.1～0.5份、苯甲酸钠0.01～0.05份、低聚果糖1～5份和单糖浆5～15份。2.如权利要求1所述的用于缓解肝损伤的外泌体制剂，其特征在于，包括以下成分及其重量份数：党参20份、当归20份、麦冬30份、桑葚20份、熟地黄14份、川楝子0.4份、植物外泌体提取物14份、谷胱甘肽0.8份、乳铁蛋白0.2份、苯甲酸钠0.01份、低聚果糖2份和单糖浆10份。3.如权利要求1所述的用于缓解肝损伤的外泌体制剂，其特征在于，所述植物外泌体提取物由石榴外泌体提取物、生姜外泌体提取物和柑橘外泌体提取物按质量比(2～4):(3～5):(1～3)混合组成。4.如权利要求3所述的用于缓解肝损伤的外泌体制剂，其特征在于，所述植物外泌体提取物由石榴外泌体提取物、生姜外泌体提取物和柑橘外泌体提取物按质量比3:4:2混合组成。5.如权利要求1～4任一所述的用于缓解肝损伤的外泌体制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1将党参、当归、麦冬、熟地黄和川楝子粉碎成粗粉，得原料粗粉，接着加纯净水，加热至70～80℃浸渍5～7h，过滤，收集滤液，通过减...

【专利技术属性】
技术研发人员：李标，华佩君，郭之彬，
申请(专利权)人：广州市普森生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：