本发明专利技术涉及抗体技术领域，具体涉及小热休克蛋白HSPB1的抗体、杂交瘤细胞株及其应用。本发明专利技术提供的小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段能够特异性结合人小热休克蛋白HSPB1，且具有较高的亲和力；在进行人小热休克蛋白HSPB1检测时具有较高的灵敏度和特异性，能够实现低含量小热休克蛋白HSPB1的检测，能够满足检测实践的要求，在小热休克蛋白HSPB1的检测领域具有重要的应用价值。的检测领域具有重要的应用价值。
【技术实现步骤摘要】
小热休克蛋白HSPB1的抗体、杂交瘤细胞株及其应用
[0001]本专利技术涉及抗体
，尤其涉及小热休克蛋白HSPB1的抗体、杂交瘤细胞株及其应用。
技术介绍
[0002]热休克蛋白是细胞在应激的环境下（如高热、缺氧、创伤、疾病等）产生的一类具有分子伴侣功能的物质，参与细胞蛋白的折叠、修饰等过程，可提高细胞对逆境的抵抗力。热休克蛋白根据分子量的不同分为大、中、小三种类型。HSPB1是小热休克蛋白的一种，全长205个氨基酸，分子量约27kD。HSPB1对错误折叠的蛋白质有修复或分解功能，在细胞受到应激时，HSPB1表达量增加，通过多种途径帮助细胞应对不利环境，增加细胞存活率，延缓或抑制细胞凋亡。在多种疾病的发展过程中HSPB1 均出现高表达，如糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。检测HSPB1的表达水平有利于对疾病进程或预后情况进行评估。
[0003]目前HSPB1的检测主要采用免疫组化方法，该方法可以评估HSPB1的高表达或低表达，但无法进行精确的定量。基于双抗夹心法的酶联免疫吸附检测技术能够准确、快速地对HSPB1进行定量检测。HSPB1在正常人血清中含量较低，因此，需要开发具有高亲和力的抗体以保证检测的高灵敏度。
技术实现思路
[0004]本专利技术提供小热休克蛋白HSPB1的抗体、杂交瘤细胞株及其应用。
[0005]本专利技术通过制备人HSPB1抗原，以人HSPB1抗原免疫小鼠进行融合筛选后，得到两株亲和力、特异性和稳定性良好的单克隆抗体，并利用这两株抗体开发了基于双抗夹心法的酶联免疫吸附检测试剂盒，该试剂盒可以较为准确地检测人HSPB1的含量，具有较高的灵敏度和特异性，可以检测人HSPB1含量较低的样本。
[0006]具体地，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3所示，轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示、CDR2的氨基酸序列为WAS，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
[0007]优选地，所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示或与如SEQ ID NO.11所示序列具有至少80%的相似性，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示或与如SEQ ID NO.12所示序列具有至少80%的相似性。
[0008]优选地，所述抗体或其抗原结合片段为单克隆抗体、Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、dAb、单链抗体、双特异抗体或多特异抗体。
[0009]在本专利技术的一些实施方式中提供小热休克蛋白HSPB1的抗体，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示。
[0010]在上述抗体或其抗原结合片段的基础上，本专利技术提供编码所述抗体或其抗原结合
片段的核酸分子。
[0011]根据上述抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列，本领域技术人员可获得编码上述抗体或其抗原结合片段的核酸分子的核苷酸序列。由于密码子的简并性，编码上述抗体或其抗原结合片段的核酸分子的核苷酸序列并不唯一，所有能够编码产生上述抗体或其抗原结合片段的核酸分子均在本专利技术的保护范围内。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，编码所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示，编码所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示。
[0013]进一步地，本专利技术提供含有所述核酸分子的生物材料；所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。
[0014]上述表达盒可通过在所述核酸分子的上游连接启动子等转录或翻译调控元件和/或在其下游连接终止子等转录或翻译调控元件得到。
[0015]上述载体包括但不限于质粒载体、噬菌体载体、病毒载体、人工染色体载体等。
[0016]上述宿主细胞包括微生物细胞、昆虫细胞或其它动物细胞。
[0017]在所述抗体或其抗原结合片段的基础上，本专利技术提供抗体偶联物，其为将所述小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段与标记物偶联得到，所述标记物选自酶标记、生物素标记、荧光染料标记、化学发光染料标记、放射性标记中的一种或多种。
[0018]本专利技术提供小热休克蛋白HSPB1的抗体组合物，所述抗体组合物包含以下（1）和（2）中的抗体：（1）重链可变区的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3所示；轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示、CDR2的氨基酸序列为WAS，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；（2）重链可变区的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.6、7、8所示；轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示、CDR2的氨基酸序列为YAS，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示。
[0019]上述抗体组合物可用于作为双抗夹心法检测小热休克蛋白HSPB1的配对抗体，抗体组合物中的两个抗体分别作为双抗夹心法中的包被抗体和标记抗体。
[0020]优选地，上述（1）中所述的抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示或与如SEQ ID NO.11所示序列具有至少80%的相似性，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示或与如SEQ ID NO.12所示序列具有至少80%的相似性。
[0021]上述（2）中所述的抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示或与如SEQ ID NO.13所示序列具有至少80%的相似性，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示或与如SEQ ID NO.14所示序列具有至少80%的相似性。
[0022]本专利技术提供杂交瘤细胞株9F8，其于2023年8月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），分类命名为小鼠抗人HSPB1单抗杂交瘤细胞株，保藏编号为CGMCC No. 45646。
[0023]本专利技术还提供杂交瘤细胞株20G5，其于2023年8月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学
院微生物研究所，邮编100101），分类命名为小鼠抗人HSPB1单抗杂交瘤细胞株，保藏编号为CGMCC No. 45647。
[0024]本专利技术还提供由上述杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体，其能够特异性结合小热休克蛋白HSPB1。
[0025]本专利技术提供以上所述的小热休克蛋白HSPB1的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3所示，轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示、CDR2的氨基酸序列为WAS，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。2.根据权利要求1所述的小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示或与如SEQ ID NO.11所示序列具有至少80%的相似性，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示或与如SEQ ID NO.12所示序列具有至少80%的相似性。3.根据权利要求1或2所述的小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为单克隆抗体、Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、dAb、单链抗体、双特异抗体或多特异抗体。4.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1~3任一项所述的小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段。5.生物材料，其特征在于，所述生物材料含有权利要求4所述的核酸分子；所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。6.抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物为将权利要求1~3任一项所述的小热休克蛋白HSPB1的抗体或其抗原结合片段与标记物偶联得到，所述标记物选自酶标记、生物素标记、荧光染料标记、化学发光染料标记、放射性标记中的一种或多种。7.小热休克蛋白HSPB1的抗体组合物，其特征在于，所述抗体组合物包含以下（1）和（2）中的抗体：（1）重链可变区的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3所示，轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈新新，潘悦，苑晓松，刘星，赵海龙，路轲，王芳，魏彦辉，马玉岭，
申请(专利权)人：北京索莱宝科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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