一种蛋白质体FNL的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种蛋白质体FNL的制备方法，属于生物医药技术领域。包括：将大豆卵磷脂和胆固醇溶于溶剂中、旋转蒸发，得到薄膜；将海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白溶于缓冲液中，得到蛋白溶液，将所述蛋白溶液与得到的薄膜混合、旋转，得到旋转溶液；将得到的旋转溶液超声，经微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。海藻酸钠和尿囊素提高了纤连蛋白的透皮吸收率，24h后达到70％以上，相交于未使用海藻酸钠和尿囊素提高了22％以上。提高了22％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质体FNL的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种蛋白质体FNL的制备方法。

技术介绍

[0002]纤连蛋白又称纤维结合蛋白、粘连蛋白、纤粘蛋白，简称FN。纤连蛋白主要由肝脏及血管内皮细胞生成，存在于动物组织和组织液中，是一种大分子糖蛋白，二聚体分子量约为450KD，具有多种生物活性。纤连蛋白在进化过程中保守性很强，各种动物体液中的纤连蛋白具有非常相近的结构、性质和生物学功能，因而不同来源的纤连蛋白可以相互替代使用。纤连蛋白可促进细胞生长，提高细胞贴壁率，增强细胞代谢水平，缩短细胞生长时间，提高杂交瘤技术中细胞融合率等。
[0003]纤连蛋白可以清除色斑、防晒、保湿、填充皮肤塌陷部位、清除体内过多的自由基等。纤连蛋白具有清除色斑、防晒、晒后修复、保湿、抗衰祛皱、修复等多重功效。因此，纤连蛋白可以应用到化妆品中。然而，纤连蛋白作为一种高分子糖蛋白，直接添加使用无法使皮肤吸收，无法达到应有的效果。

技术实现思路

[0004]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种蛋白质体FNL的制备方法，采用本专利技术提供的制备方法提高了蛋白质体FNL的皮肤吸收率。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种蛋白质体FNL的制备方法，包括以下步骤：
[0007]1)将大豆卵磷脂和胆固醇溶于溶剂中、旋转蒸发，得到薄膜；
[0008]2)将海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白溶于缓冲液中，得到蛋白溶液，将所述蛋白溶液与步骤1)得到的薄膜混合、旋转，得到旋转溶液；
[0009]3)将所述步骤2)得到的旋转溶液超声，经微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。
[0010]优选的，所述步骤1)大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为8～12:3～5。
[0011]优选的，所述步骤1)大豆卵磷脂的质量与溶剂的体积比为8～12g:250～300ml。
[0012]优选的，所述溶剂包括乙醇和/或三氯甲烷。
[0013]优选的，所述步骤2)海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白的质量比为0.5～0.8:0.1～0.3:0.012～0.018。
[0014]优选的，所述步骤2)纤连蛋白的质量与缓冲液的体积比为12～18mg:50～100ml；
[0015]所述大豆卵磷脂与纤连蛋白的质量比为8～12:0.012～0.018。
[0016]优选的，所述步骤1)旋转蒸发的条件包括：温度为25～35℃，转速为150～250rpm；
[0017]所述步骤2)旋转的条件包括：温度为40～45℃，时间为20～25min，转速为100～200rpm。
[0018]优选的，所述步骤3)微孔滤膜的孔径为0.45μm。
[0019]本专利技术还提供了一种上述技术方案所述制备方法制备得到的蛋白质体FNL。
[0020]本专利技术还提供了上述技术方案所述的蛋白质体FNL在制备提高皮肤透皮吸收率药物或化妆品中的应用。
[0021]本专利技术的有益效果为：
[0022]海藻酸钠和尿囊素提高了纤连蛋白的透皮吸收率，24h后达到70％以上，相交于未使用海藻酸钠和尿囊素提高了22％以上。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供了一种蛋白质体FNL的制备方法，包括以下步骤：
[0024]1)将大豆卵磷脂和胆固醇溶于溶剂中、旋转蒸发，得到薄膜；
[0025]2)将海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白溶于缓冲液中，得到蛋白溶液，将所述蛋白溶液与步骤1)得到的薄膜混合、旋转，得到旋转溶液；
[0026]3)将所述步骤2)得到的旋转溶液超声，经微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。
[0027]本专利技术将大豆卵磷脂和胆固醇溶于溶剂中、旋转蒸发，得到薄膜。在本专利技术中，所述大豆卵磷脂和胆固醇的质量比优选为8～12:3～5。在本专利技术中，所述大豆卵磷脂的质量与溶剂的体积比优选为8～12g:250～300ml。在本专利技术中，所述溶剂优选包括乙醇和/或三氯甲烷。在本专利技术中，所述旋转蒸发的条件优选包括：温度为25～35℃，转速为150～250rpm。
[0028]本专利技术将海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白溶于缓冲液中，得到蛋白溶液，将所述蛋白溶液与得到的薄膜混合、旋转，得到旋转溶液。在本专利技术中，所述海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白的质量比优选为0.5～0.8:0.1～0.3:0.012～0.018。在本专利技术中，所述纤连蛋白的质量与缓冲液的体积比优选为12～18mg:50～100ml。在本专利技术中，所述大豆卵磷脂与纤连蛋白的质量比优选为8～12:0.012～0.018。在本专利技术中，所述缓冲液优选为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液的pH值优选为6.5～7.0。
[0029]本专利技术将得到的旋转溶液超声，经微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。在本专利技术中，所述超声的条件优选包括：功率为250～350W，时间为2～5min。在本专利技术中，所述微孔滤膜的孔径优选为0.45μm。
[0030]本专利技术还提供了上述技术方案所述制备方法制备得到的蛋白质体FNL。
[0031]本专利技术还提供了上述技术方案所述的蛋白质体FNL在制备提高皮肤透皮吸收率药物或化妆品中的应用。本专利技术对所述药物或化妆品的制备方法等没有特殊限定，本领域技术人员采用常规即可。
[0032]为了进一步说明本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细地描述，但不能将它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0033]实施例1
[0034]一种蛋白质体FNL的制备方法，步骤为：
[0035]1)将大豆卵磷脂8g和胆固醇5g溶于三氯甲烷250ml中，在温度为25℃和转速为150rpm下旋转蒸发，得到薄膜；
[0036]2)将海藻酸钠0.5g和尿囊素0.1g、纤连蛋白12mg溶于磷酸盐缓冲液100ml(pH值6.5)中，得到蛋白溶液，将蛋白溶液与步骤1)得到的薄膜混合，在温度为40℃和转速为100rpm下旋转20min，得到旋转溶液；
[0037]3)将步骤2)得到的旋转溶液在功率为250W下超声超声5min，经0.45μm微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。
[0038]实施例2
[0039]一种蛋白质体FNL的制备方法，步骤为：
[0040]1)将大豆卵磷脂12g和胆固醇4g溶于三氯甲烷300ml中，在温度为30℃和转速为200rpm下旋转蒸发，得到薄膜；
[0041]2)将海藻酸钠0.8g和尿囊素0.3g、纤连蛋白15mg溶于磷酸盐缓冲液80ml(pH值6.7)中，得到蛋白溶液，将蛋白溶液与步骤1)得到的薄膜混合，在温度为40℃和转速为150rpm下旋转20min，得到旋转溶液；
[0042]3)将步骤2)得到的旋转溶液在功率为300W下超声超声4min，经0.45μm微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。
[0043]实施例3
[0044]一种蛋白质体FNL的制备方法，步骤为：...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质体FNL的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将大豆卵磷脂和胆固醇溶于溶剂中、旋转蒸发，得到薄膜；2)将海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白溶于缓冲液中，得到蛋白溶液，将所述蛋白溶液与步骤1)得到的薄膜混合、旋转，得到旋转溶液；3)将所述步骤2)得到的旋转溶液超声，经微孔滤膜挤压整粒，得到蛋白质体FNL。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为8～12:3～5。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)大豆卵磷脂的质量与溶剂的体积比为8～12g:250～300ml。4.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂包括乙醇和/或三氯甲烷。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)海藻酸钠和尿囊素、纤连蛋白的质量比为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：杨涛，李艳徽，
申请(专利权)人：广州易和生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：