抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5-ALA的方法技术

本发明专利技术公开了抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5

【技术实现步骤摘要】
抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5
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ALA的方法


[0001]本专利技术属于生物工程技术与应用领域，具体地涉及抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5
‑
ALA的方法。

技术介绍

[0002]5‑
氨基乙酰丙酸(5
‑
aminolevulinic acid，5
‑
ALA)，是生物体内合成维生素B
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、血红素、叶绿素等四吡咯类化合物的重要前体，广泛存在于微生物和动植物细胞中。由于其绿色无毒、易降解且无残留的特性，作为光动力学药物、生物可降解除草剂、植物生长调节剂以及饲料添加剂等在医药以及农业等领域得到广泛应用。目前5
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ALA的大规模生产主要以化学法为主，但是合成过程中存在的高成本、高污染和低得率等问题大大限制了其大规模生产与应用。鉴于此，微生物合成法应运而生，并随着合成生物学，特别是代谢工程手段的兴起，5
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ALA的生物法合成得到了进一步发展。但是，大多数生物合成方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5
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ALA的方法，其特征是所述全局转录调控因子基因glxR的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的方法，其特征是包括如下步骤：1)pCRISPRi
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low
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GlxR质粒构建：以pdCas9gRNA为模板，以l
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GlxR
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F1和cas
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R1为上下游引物，用Phanta DNA聚合酶进行扩增，得到线性化载体片段1；以pdCas9gRNA为模板，以ori
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F和CRISPRi
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R2为上下游引物，用Phanta DNA聚合酶进行扩增，得到线性化载体片段2；将所述片段1和片段2连接起来，通过菌落PCR的方式进行验证得到pCRISPRi
‑
low

【专利技术属性】
技术研发人员：罗健诚，王智文，郑洋洋，王子尧，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：