本发明专利技术公开了一种用于胃癌诊疗的生物标志物，具体的该标志物为LINC01633。本发明专利技术首次发现LINC01633的差异表达与胃癌的发生发展相关，在胃癌患者中，LINC01633的表达上调，提示干预LINC01633基因表达可能成为胃癌治疗的新途径。为了进一步验证，通过抑制剂降低LINC01633的表达发现可以显著降低胃癌细胞的增殖和细胞形成克隆集落数。增殖和细胞形成克隆集落数。增殖和细胞形成克隆集落数。
【技术实现步骤摘要】
LINC01633在胃癌诊断和治疗中的应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及LINC01633在胃癌诊断和治疗中的应用。
技术介绍
[0002]胃癌(GC)是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球所有恶性肿瘤中排名第五，是癌症患者的第三大死因。根据Lauren系统分类，可将胃癌患者分为三个亚型：高分化(非贲门/肠型)、低分化(贲门/弥漫性)和混合型。高分化(肠型)胃癌最常见，多见于年龄大于70岁的男性患者，肿瘤体积较大。此亚型总体上比低分化(弥漫)亚型预后更好。低分化亚型的存活率很低，常见于年轻女性。混合亚型常存在于年龄较小的男性患者亚群中，且具有高度侵袭性和转移性。除了Lauren的分类外，世界卫生组织(WHO)根据主要的组织学模式将GC分为四种主要类型：管状腺癌、乳头状腺癌、粘液腺癌和粘液腺癌。目前，手术治疗是临床上治疗胃癌的首要选择，但复发和转移也很常见。对于胃癌的治疗，仍存在许多未知需研究探索，因此探究胃癌的发病机制对于揭示胃癌的本质以及开发新的治疗都至关重要。
[0003]LncRNA被定义为长度超过200个核苷酸且不能翻译成蛋白质的转录本。在各种类型的癌细胞中，异常表达的lncRNA起着至关重要的作用。一般来说，lncRNA在不同水平的基因表达中发挥调节功能，包括染色质修饰、转录和转录后。从机制上讲，lncRNA可通过与DNA、mRNAs、ncRNAs和蛋白质的相互作用发挥其调节功能，在各种与癌症相关的细胞过程中充当不同的功能分子，起着信号、诱饵、支架和引导等作用。目前已经发现多种lncRNA与胃癌密切相关，如LncRNA SNHG1、LncRNASND1
‑
IT1、以及LncRNADLEU2等.
[0004]目前，关于lncRNA在胃癌中的相关调控机制仍有待进一步阐明，探寻胃癌中相关的lncRNA对于胃癌机制的阐明，以及胃癌的诊断、治疗和预防等都具有重要作用，也可为胃癌的基因靶向治疗提供新的思路。
技术实现思路
[0005]为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于，提供一种与胃癌发生发展相关的生物标志物，通过检测生物标志物，从而实现胃癌的早期诊断以及胃癌的精准分子靶向治疗。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]本专利技术提供了检测LINC01633的试剂在制备诊断胃癌的产品中的应用。
[0008]所述试剂包括用RT
‑
PCR、实时定量PCR、原位杂交、northern blotting、芯片或高通量测序平台检测LINC01633表达水平的试剂。
[0009]进一步，用实时定量PCR检测LINC01633的试剂至少包括一对特异性扩增LINC01633的引物。
[0010]进一步地，所述试剂包括：
[0011]特异性识别LINC01633的探针；或
[0012]特异性扩增LINC01633的引物。
[0013]进一步地，所述特异性扩增LINC01633的引物序列如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示。
[0014]本专利技术提供了一种诊断胃癌的产品，所述产品包括检测样本中LINC01633表达水平的试剂。
[0015]所述产品包括芯片、制剂或试剂盒。其中，所述芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测LINC01633转录水平的针对LINC01633的寡核苷酸探针；所述试剂盒包括用于检测LINC01633转录水平的引物或芯片。
[0016]固相载体可采用基因芯片领域的各种常用材料，例如但不限于尼龙膜，经活性基团(如醛基、氨基等)修饰的玻片或硅片、未修饰的玻片、塑料片等。
[0017]本专利技术中基因检测试剂盒或基因芯片可用于检测包括LINC01633基因在内的多个基因(例如，与胃癌相关的多个基因)的表达水平，将胃癌的多个标志物同时进行检测，可大大提高胃癌诊断的准确率。
[0018]进一步，所述检测样本中LINC01633的水平的试剂包括：
[0019]特异性识别LINC01633的探针；或
[0020]特异性扩增LINC01633的引物。
[0021]进一步，特异性扩增LINC01633的引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
[0022]本专利技术提供了LINC01633在制备治疗胃癌的药物组合物中的应用。
[0023]进一步地，所述的药物组合物包括LINC01633的抑制剂，和/或与所述抑制剂配伍的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料，所述抑制剂能够抑制LINC01633或涉及LINC01633上游或下游途径的物质的表达。所述抑制剂可以在DNA水平或RNA(即基因产物)水平上起作用。
[0024]进一步地，所述抑制剂为针对LINC01633的siRNA。
[0025]本专利技术在筛选有效的siRNA序列时，通过大量的比对分析，从而找出最佳的有效片段。在本专利技术的具体实施方式中，专利技术人设计合成了多种siRNA序列，并将它们分别通过转染试剂转染胃癌细胞系进行验证，结果检测出干扰效果较好的干扰分子，它们分别具有SEQ IDNO.9、SEQ ID NO.10所示的序列，进一步地在细胞水平实验，结果证明对于细胞实验而言抑制效率非常高。
[0026]本专利技术的核酸抑制物如siRNA可以化学合成，也可以通过一个重组核酸结构里的表达盒转录成单链RNA之后进行制备。siRNA等核酸抑制物，可通过采用适当的转染试剂被输送到细胞内，或还可采用本领域已知的多种技术被输送到细胞内。
[0027]本领域技术人员将认识到，本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的标志物基因的任何特定变体的基因表达进行定量。在具体的实施方案中，作为非限制性的实例，标志物基因LINC01633具有目前国际公共核酸序列数据库GeneBank中LINC01633基因(NC_000001.11)所示的序列。
[0028]在本专利技术中，术语“探针”指能与另一分子的特定序列或亚序列或其它部分结合的分子。除非另有指出，术语“探针”通常指能通过互补碱基配对与另一多核苷酸(往往称为“靶多核苷酸”)结合的多核苷酸探针。根据杂交条件的严谨性，探针能和与该探针缺乏完全序列互补性的靶多核苷酸结合。探针可作直接或间接的标记，其范围包括引物。杂交方式，
包括，但不限于：溶液相、固相、混合相或原位杂交测定法。
[0029]在本专利技术中，药学上可接受的载体包括(但并不限于)：稀释剂、赋形剂如乳糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、水等、填充剂如淀粉、蔗糖等；粘合剂如单糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如干淀粉、海藻酸钠、海带多糖粉末、琼脂粉末、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂季铵化合物、十二烷基硫酸钠等；表面活性剂如聚氧化乙烯山梨聚糖脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘油酯、十六烷醇等；致湿剂如甘油、淀粉等；吸本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.检测LINC01633的试剂在制备诊断胃癌的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述试剂包括：特异性识别LINC01633的探针；或特异性扩增LINC01633的引物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述特异性扩增LINC01633的引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。4.一种诊断胃癌的产品，其特征在于：所述产品包括检测样本中LINC01633表达水平的试剂。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：所述产品包括芯片、制剂或试剂盒。6.LINC01633在制备治疗胃癌的药物组合物中的应用。7...
【专利技术属性】
技术研发人员：沈贤，郑建建，陈孝冬，陈吉，詹雅婷，李鑫淼，林丽凡，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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