橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用。橙黄决明素及其衍生物在COVID

【技术实现步骤摘要】
橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用。

技术介绍

[0002]目前已有的抗新冠小分子药物，如瑞德西韦、莫匹拉韦、帕昔洛韦和阿兹夫定等在临床治疗中并未表现出预期的保护效果。
[0003]决明子是一种常见的中药材，通常用于治疗肝热、目赤、头痛和高血压、高血脂等。其主要成分包括：决明子苷、决明素、决明内酯、决明蒽醌、决明碱等。各种决明子单体活性小分子被报道对多种疾病，如神经退行性疾病、过敏性疾病和乳腺癌具有很好的治疗效果，但尚未有文献报道决明子及其主要活性小分子单体抗SARS
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CoV
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2作用。

技术实现思路

[0004]鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用。
[0005]橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用。
[0006]可选地，所述的橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用，其中，所述新型冠状病毒包括：野生型SARS
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CoV
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2WIV
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04、Delta、Omicron BA 1.1、Omicron BA 2.2、Omicron BA 5.1。
[0007]可选地，所述的橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用，其中，所述橙黄决明素对新型冠状病毒的感染与复制的抑制表现为抑制细胞上清中病毒核酸水平，以及细胞内病毒NP蛋白水平。
[0008]有益效果：本专利技术相对于现有技术相比具有如下技术效果：
[0009](1)本专利技术中的橙黄决明素是中药材决明子中的有效活性成分之一，被广泛报道用于减肥、护肝等保健用品，本专利技术首次发现橙黄决明素对SARS
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CoV
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2具有高效的抗病毒效果。
[0010](2)本专利技术中的橙黄决明素在动物体内无明显肝肾毒性，长期口服药物(每天1次，连续服药14天)对恒河猴的各项生化指标无明显损伤。
[0011](3)本专利技术中的橙黄决明素在多个细胞模型(Vero、小气道上皮细胞和角膜缘上皮细胞)对野生型SARS
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CoV
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2和常见突变株具有显著的抑制效果。
附图说明
[0012]图1是橙黄决明素的结构式，以及在人小气道上皮细胞(HAWEC
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02014)、人角膜缘上皮细胞(HNCWC/HL
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008)和Vero细胞中的细胞毒性结果图；
[0013]图2是橙黄决明素对野生型SARS
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CoV
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2WIV
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04在人小气道上皮细胞(HAWEC
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02014)、人角膜缘上皮细胞(HNCWC/HL
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008)和Vero细胞中的抗病毒药效结果图；
[0014]图3是橙黄决明素对Delta株、Omicron BA1.1、BA2.2和BA5.1在人小气道上皮细胞(HAWEC
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02014)、人角膜缘上皮细胞(HNCWC/HL
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008)和Vero细胞中的抗病毒药效结果图。
具体实施方式
[0015]本专利技术提供一种橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0016]本专利技术中的橙黄决明素为市售产品，英文名：Aurantio
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obtusin，CAS号为67979
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25
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3，HPLC＝98.7％。
[0017]所述的橙黄决明素细胞水平溶解条件优选为DMSO于室温溶解至20mM，分装后冻存于
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20℃冰箱；动物实验的溶解条件优选为2％的吐温80，超声波震荡溶解，每次使用前现配现用。
[0018]所述的SARS
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CoV
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2免疫荧光实验优选条件为SARS
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CoV/SARS
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CoV
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2Nucleocapsid Antibody(HRP),Rabbit Mab(40143
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R004
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H)，或Goat Anti
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Rabbit IgG H&L(Alexa488)。
[0019]所述的人小气道上皮细胞(HAWEC
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02014)和人角膜源上皮细胞(HNCWC/HL
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008)的培养条件优选为用HL培养基于37℃、5％ CO2培养；所述的HL培养基为：DMEM与无血清培养基SFM按体积比1:3混合，同时添加5％(v/v)的FBS(胎牛血清)，以及0.4μg/mL皮质醇(hydrocortisone)，5μg/mL胰岛素(insulin)，8.4ng/mL霍乱毒素(choleratoxin)，10ng/mL表皮生长因子(epithelial growth factor(EGF))，24μg/mL腺嘌呤(adenine)，100U/mL青霉素(penicillin)，100μg/mL链霉素(streptomycin)，0.25μg/mL两性霉素B(Fungizone)，30μM法舒地尔(Fasudil)，上述培养基需经0.22μm孔径滤膜过滤。
[0020]所述的Vero细胞的培养条件优选为用10％ FBS的DMEM培养基于37℃、5％CO2培养。
[0021]下面通过具体的实施例来对本专利技术所提供的橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用做进一步的解释说明。
[0022]实施例1
[0023]橙黄决明素在细胞水平中的细胞毒性检测
[0024](1)Vero、人小气道上皮细胞或人角膜缘上皮细胞以8000/孔铺板至96孔板，24小时后吸掉培养基，每孔加入含有浓度梯度的橙黄决明素的新鲜培养基，继续培养48小时；
[0025](2)吸去培养上清后，每孔使用200μL室温平衡后的PBS清洗3次；
[0026](3)吸去PBS，每孔加入100μL CCK8工作液(CCk8与DMEM以1:9配置)37℃孵育2h；
[0027](4)使用多功能酶标仪(Bio
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Tek)检测OD450和OD630，经过GraphPad Prism 6.0软件处理数据后，绘制细胞存活率曲线。如图1所示，在人小气道上皮细胞、人角膜缘上皮细胞和Vero细胞中，200μM浓度以下的橙黄决明素无细胞毒性。
[0028]实施例2
[0029](1)实验选用4只年龄、体重相近的健康恒河猴(雌雄各2只)，年龄在3
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5周岁，其中实验组A、B各2只猴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用。2.根据权利要求1所述的橙黄决明素在制备抗新型冠状病毒药物中的应用，其特征在于，所述新型冠状病毒包括：野生型SARS
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CoV
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2WIV
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04、Delta、O...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯炜，肖宇，叶琳，房师松，陈述亮，罗凡，王玲，熊朝瑞，覃伶鑫，李红亮，蔡铠红，
申请(专利权)人：武汉大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：