本发明专利技术涉及微生物研究技术领域，具体涉及一株具有磺胺类抗生素转化作用的海洋木霉属微生物转化菌株及其应用。微生物转化菌株A
【技术实现步骤摘要】
一株木霉属微生物转化菌株及其应用
[0001]本专利技术涉及微生物研究
，具体涉及一株具有磺胺类抗生素转化作用的海洋木霉属微生物转化菌株及其应用。
技术介绍
[0002]磺胺类抗生素(SAs)作为一种用于人类、动物或植物中具有抗菌或抗寄生活性的特殊抗菌剂，在治疗或预防人类疾病或用于家畜养殖、水产养殖、动植物病害防治等方面具有重要作用，因其高效、抑菌、价格低、方便购买以及临床应用等原因被各国各行业大量而频繁地使用，但也因此负面影响也不断暴露。抗生素的滥用和过度使用刺激了细菌进化和耐药性的传播，对生态环境造成不可忽视的影响。世界上许多河流沉积物、地下水和土壤中，可检出的SAs多达十几种。例如，磺胺甲恶唑(SMX)作为SAs的典型代表，在相当低的浓度范围内，仍可能对水生生物构成生态毒性风险，进而对人类健康带来潜在危害。
[0003]木霉属(Trichoderma)真菌分布广泛且种类多样，具有多种重要的生态功能，能向细胞外代谢分泌复合的酶系统，这些复合的酶系统包含几丁质酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶等，可用于生物转化，具有环保、高效和专一的特点。
[0004]本专利技术从海洋来源木霉属真菌中获得了一株对磺胺类抗生素具有转化功能的菌株，为磺胺的转化过程提供新的微生物来源，推动海洋微生物菌株对环境中磺胺类抗生素残留转化的应用。
技术实现思路
[0005]本专利技术提供了一株具有磺胺类抗生素转化作用的海洋木霉属微生物转化菌株及其应用。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用技术方案为：
[0007]一株木霉属微生物转化菌株，微生物转化菌株A
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1为木霉属中的棘孢木霉Trichoderma asperellum，已于2022年5月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉大学；保藏编号为CCTCC M 2022674。
[0008]所述的转化菌株的应用，所述转化菌株在转化磺胺类抗生素中的应用。
[0009]所述转化菌株在转化磺胺甲恶唑中的应用。
[0010]一种转化磺胺类抗生素制剂，含所述的菌株。
[0011]所述制剂含有该菌株的发酵培养物、培养物悬液或发酵液。
[0012]所述发酵培养物将权利要求1所述菌株进行活化，活化后接入至液体真菌培养基中培养，培养产物添加至含磺胺类抗生素的液体真菌培养基中发酵培养，即得发酵培养物。
[0013]进一步的说，
[0014]1)将棘孢木霉(Trichoderma asperelloides)A
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1菌株接种于PDA固体培养基中，在28℃活化5
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7d，制得活化菌株；
[0015]2)将步骤1)制得的活化菌株接种至液体真菌培养基中，即种子培养液，在25℃的
条件下培养4
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5d；
[0016]3)将步骤2)所得种子培养液接种在添加磺胺甲恶唑(SMX)的液体真菌培养基，保证接种量在9
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10％，25℃的条件下培养21d。
[0017]4)用适量的乙酸乙酯灭菌48h，抽滤。发酵液采用分液漏斗萃取有机相，40℃减压蒸馏得到发酵培养物粗提物。
[0018]所述磺胺类抗生素为磺胺甲恶唑(SMX)。
[0019]所述制剂在转化磺胺类抗生素中降低抗生素抗菌活性、生物毒性的应用中。
[0020]本专利技术与现有技术相比具有以下优点：
[0021]目前已报道的菌株中大部分对高浓度磺胺类抗生素耐受能力较差，转化效率较低，并缺乏对转化后代谢产物结构及其抗菌活性和生物毒性的研究。本专利技术中的菌株A
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1可以转化磺胺类抗生素，且转化产物大大降低磺胺类抗生素的抗菌能力和生物毒性作用，为环境中磺胺类抗生素的去除提供了优良转化菌株。
[0022]具体涉及菌株A
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1，经检测本专利技术菌株能够将底物磺胺类抗生素进行生物转化。
附图说明
[0023]图1为本专利技术实施例提供的棘孢木霉A
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1的菌落图；
[0024]图2为本专利技术实施例提供的棘孢木霉A
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1的分生孢子图；
[0025]图3为本专利技术实施例提供的棘孢木霉A
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1转化磺胺甲恶唑的转化粗提物及其对照的高效液相色谱图；其中，对照1：未添加磺胺甲恶唑，仅为菌株自身空白对照；对照2：未添加菌株，仅为磺胺甲恶唑空白对照；转化粗提物：为含200mg/L磺胺甲恶唑发酵培养所得粗提物；
[0026]图4为本专利技术实施例提供的杜氏盐藻及三角褐指藻生物量与吸光系数的线性关系图。
具体实施方式：
[0027]下面结合具体实例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。
[0028]本专利技术所附图式所绘制的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解和阅读，并非用以限定本专利技术可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，在任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本专利技术所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本专利技术所揭示的
技术实现思路
能涵盖的范围内。
[0029]本专利技术的高效液相色谱(HPLC)测定方法包括：高效液相色谱定量分析代谢产物。Poroshell 120色谱柱(4μm,4.6
×
150mm)，流动相为：水/乙腈(85/15，v/v)梯度洗脱，流速为1.000mL/min，时间为40min，进样量10μL。
[0030]本专利技术所述磺胺类抗生素在下列实例中为磺胺甲恶唑。
[0031]所述细菌为海洋费氏弧菌(Vibrio fischeri)。
[0032]所述海洋微藻为杜氏盐藻(Dunaliella salina)和三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)。
[0033]PDA培养基：马铃薯浸粉5.0g/L，葡萄糖20.0g/L，琼脂20.0g/L，氯霉素0.1g/L，pH值6～7；
[0034]液体真菌培养基：蛋白胨1.25g/L，葡萄糖5.0g/L，酵母粉0.5g/L，磷酸氢二钾0.25g/L，硫酸镁0.125g/L，pH值6～7；
[0035]2216E培养基：蛋白胨5.0g/L，酵母粉1.0g/L，柠檬酸铁0.1g/L，氯化钠19.45g/L，氯化镁5.98g/L，硫酸钠3.24g/L，氯化钙1.8g/L，氯化钾0.55g/L，碳酸钠0.16g/L本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株木霉属微生物转化菌株，其特征在于：微生物转化菌株A
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1为木霉属中的棘孢木霉Trichoderma asperellum，已于2022年5月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022674。2.按权利要求1所述的转化菌株的应用，其特征在于：所述转化菌株在转化磺胺类抗生素中的应用。3.按权利要求2所述的转化菌株的应用，其特征在于：所述转化菌株在转化磺胺甲恶唑中的应用。4.一种转化磺胺类抗生素制剂，其特征在于：含权利要求1所述的菌株。5...
【专利技术属性】
技术研发人员：季乃云，于汶莉，宋银平，
申请(专利权)人：中国科学院烟台海岸带研究所，
类型：发明
国别省市：
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