一种强化动物免疫功能的发酵饲料及其制备方法技术

本发明专利技术属于发酵饲料领域，公开了一种强化动物免疫功能的发酵饲料及其制备方法。申请人首次从海洋环境中筛选出产胞外多糖的发酵粘液乳杆菌，保藏编号为：GDMCC NO：62193。经GPC系统测定是一种在化学结构上全新的多糖。申请人进一步研发了其与解淀粉盐水球菌HL

【技术实现步骤摘要】
一种强化动物免疫功能的发酵饲料及其制备方法


[0001]本专利技术属于发酵饲料领域，具体涉及一种强化动物免疫功能的发酵饲料及其制备方法。

技术介绍

[0002]发酵饲料指在人为控制下，把有益微生物接种在饲料原料或全价配合饲料，经过一段时间的发酵，利用发酵过程中产生的消化酶，将饲料原料进行体外消化，并且还会产生乳酸、维生素等有益代谢产物。发酵饲料在近些年已发展为饲料行业的一个发展趋势，其开发与利用成为饲料行业的研究热点。然而，现在用于发酵饲料的有益微生物，代谢过程中很少产生具有免疫增强功能的物质。
[0003]多糖称多聚糖，是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子。不仅参与组织细胞骨架的构成，而且是多种内源性生物活性分子的重要组成成分。多糖具有一定的调节机体免疫功能的作用，其作用是多途径、多环节、多靶点的，如促进免疫细胞增殖与分化，分泌各种淋巴因子等。多糖作为饲料添加剂具有良好的活性，能提高机体的免疫力，并有低毒和低耐药性等特点，具有广阔的应川前景。多糖的来源有植物、动物与微生物，相对于植物与动物源多糖，微生物源多糖具有容易大规模生产的特点，具有更好的应用前景。
[0004]乳酸菌（lactic acid bacteria，LAB）是国际公认的安全微生物（generally recognized as safe, GRAS），不仅可以维持宿主正常的胃肠道微生态平衡，还具有免疫调节的作用。乳酸菌胞外多糖（exopolysaccharide，EPS）是乳酸菌主要的代谢产物之一。近年来，已从陆地上分离筛选出较多产胞外多糖的乳酸菌，由于对陆地产EPS乳酸菌的大量筛选及研究，发现新的产EPS乳酸菌变得越来越困难。而海洋中蕴藏着丰富的微生物资源，且已有相关报道表明海洋中存在乳酸菌，因此从海洋中筛选产EPS乳酸菌成为可能。由于海洋高盐、低温、寡营养的独特环境决定了海洋乳酸菌与陆地乳酸菌在生长代谢上的差别，从而使得海洋乳酸菌可能具有生产独特生物活性多糖的能力。
[0005]乳酸菌胞外多糖具有免疫调节功能，在饲料工业有着良好的应用前景，然而现有的乳酸菌发酵发酵产量较低，影响了乳酸菌胞外多糖在饲料工业的应用。发酵培养基的配方是发酵工业中非常关键的因素，其直接影响代谢产物的产量以及后续的生产成本。尽管现有的发酵培养基很多，也有很多成功的范例，但是由于微生物菌种的多样性，不同菌种之间配方没有参考和借鉴意义。目前，乳酸菌的培养常用MRS培养基或其改良型，但上述培养基不能高产乳酸菌胞外多糖，影响了乳酸菌胞外多糖的应用。
[0006]本专利技术，首次于海洋源样品中筛选出了可分泌胞外多糖的发酵粘液乳杆菌，该乳杆菌分泌的胞外多糖的重均分子量为21.44 KDa；经高效液相色谱测定，得出EPSLAN4是由葡萄糖（70.33%）、甘露糖（23.02%）、半乳糖（4.02%）、葡萄糖醛酸（0.76%）、半乳糖醛酸（0.51%）组成的杂多糖，是一种在化学结构上全新的多糖。进一步的，申请人筛选出适合该菌株分泌胞外多糖的培养基及共培养菌株，获得了高产全新胞外多糖的方法。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供了一种强化动物免疫功能的发酵饲料，所述的发酵饲料中含有发酵菌株发酵粘液乳杆菌LAN4和解淀粉盐水球菌HL
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6，所述的发酵粘液乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）的保藏编号为：GDMCC NO：62193，解淀粉盐水球菌HL
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6（Salinicoccus amylolyticus）的保藏编号为：GDMCC NO：60715，已在CN 111893069 B中公开。
[0008]本专利技术另一个目的在于提供一种强化动物免疫功能的发酵饲料的制备方法。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：
[0010]申请人自海洋源样品筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌，通过生物形态和分子鉴定，该菌株鉴定为发酵粘液乳杆菌，该菌株已于2022年04月07日送至广东省微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为：GDMCC NO：62193，分类命名：Limosilactobacillus fermentum LAN4，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
[0011]发酵粘液乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum LAN4）在MRS培养基上，于37℃培养48小时的菌落形态如图1中A所示，其菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐。扫描电镜观察其个体形态如图1中B所示，为短杆状。本专利技术的发酵粘液乳杆菌产的胞外多糖，经GPC系统测定胞外多糖EPS
LAN4
的重均分子量为21.44 KDa；经高效液相色谱测定，得出EPS
LAN4
是由葡萄糖（70.33%）、甘露糖（23.02%）、半乳糖（4.02%）、葡萄糖醛酸（0.76%）、半乳糖醛酸（0.51%）组成的杂多糖，是一种在化学结构上全新的多糖。
[0012]一种强化动物免疫功能的发酵饲料，所述的发酵饲料中含有发酵菌株发酵粘液乳杆菌LAN4和解淀粉盐水球菌HL
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6，所述的发酵粘液乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）的保藏编号为：GDMCC NO：62193，解淀粉盐水球菌HL
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6（Salinicoccus amylolyticus）的保藏编号为：GDMCC NO：60715。
[0013]一种强化动物免疫功能的发酵饲料的制备方法，包括下述步骤：将发酵粘液乳杆菌LAN4和解淀粉盐水球菌HL
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6的种子液均按1
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5%（V/V）的接种量接种于灭菌后冷却至室温的发酵培养基中，于37℃～41℃，静置发酵16
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24h；按照发酵液质量：发酵原料的质量比为0.4～0.9：1的比例将发酵液与发酵原料混合，加入营养物，接入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酵母菌，并混匀；于10℃～50℃，静置发酵48h～96h，即得；所述的蔬菜汁的制备方法为：将新鲜的大白菜与芥菜切碎后，按照湿重质量比为1：0.5～1.5的比例混合，然后按照蔬菜：水的质量比为1:0.5～1.5的比例加入水，用匀浆机打浆，打浆后用纱布过滤，收集滤液即可得到蔬菜汁；所述的发酵培养基的配方为：蔬菜汁1L，葡萄糖10～60g，麦芽糖10～60g，氯化钠30～60g，碳酸钙1～10g，蛋白胨10～60 g；所述的发酵原料为全价配合饲料或饲料原料，所述的饲料原料为豆粕、麸皮和玉米粉中的一种或其组合物；所述的营养物为葡萄糖、麦芽糖、蛋白胨、磷酸氢二钾与碳酸钙所组成的混合物，所述的营养物的加入量以加入的营养物的质量占发酵原料总质量百分比计，分别为：葡萄糖0.01%～5%，麦芽糖0.01%～5%，蛋白胨0.01%～5%，磷酸氢二钾0.01%～5%，碳酸钙0.01%～5%；所述的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酵母菌均来源于商业渠道，即为常规的发
酵用菌株，其添加量均为占发酵原料总质量百分比计为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种强化动物免疫功能的发酵饲料，所述的发酵饲料中含有发酵菌株发酵粘液乳杆菌LAN4和解淀粉盐水球菌HL
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6，所述的发酵粘液乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）的保藏编号为：GDMCC NO：62193，解淀粉盐水球菌HL
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6（Salinicoccus amylolyticus）的保藏编号为：GDMCC NO：60715。2. 权利要求1所述的发酵饲料的制备方法，包括下述步骤：将发酵粘液乳杆菌LAN4和解淀粉盐水球菌HL
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6的种子液均按体积分数1
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5%的接种量接种于灭菌后冷却至室温的发酵培养基中，于37℃～41℃，静置发酵16
ꢀ‑
24h；按照发酵液质量：发酵原料的质量比为0.4～0.9：1的比例将发酵液与发酵原料混合，加入营养物，接入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酵母菌，并混匀；于10℃～50℃，静置发酵48h～96h，即得；所述的发酵粘液乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）的保藏编号为：GDMCC NO：62193、解淀粉盐水球菌HL
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6（Salinicoccus amylolyticus）的保藏编号为：GDMCC NO：60715；所述的发酵培养基的配方为：蔬菜汁1L，葡萄糖10～60g，麦芽糖10～60g，氯化钠30～60g，碳酸钙1～10g，蛋白胨10～60 g；所述的蔬菜汁的制备方法为：将新鲜的大白菜与芥菜切碎后，按照湿重质量比为1：0.5～1.5的比例混合，然后按照蔬菜：水的质量比为1:0....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘唤明，洪鹏志，钟赛意，邓楚津，周春霞，
申请(专利权)人：‑，
类型：发明
国别省市：