本发明专利技术公开了一种长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物，所述长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵滤液、菌体裂解物、溶胞物、多糖粗提物中的至少一种。本发明专利技术还公开了上述长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物的制备方法。本发明专利技术还公开上述长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物在抑制黑色素中的应用。本发明专利技术发现长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵物具有抑制黑色素的作用。制黑色素的作用。制黑色素的作用。
【技术实现步骤摘要】
一种长双歧杆菌ZJ1发酵物及其制备方法、应用
[0001]本专利技术涉及长双歧杆菌
，尤其涉及一种长双歧杆菌ZJ1发酵物及其制备方法、应用。
技术介绍
[0002]当皮肤暴露于紫外线辐射下时，黑色素的生成会通过黑素生成的关键酶酪氨酸酶的激活而增强。因此，抑制酪氨酸酶的活性或其表达会减少黑色素的进一步生成，从而达到改善皮肤肤色的目的。
[0003]益生菌是活的微生物，给予足够的数量能给宿主带来健康益处。益生元是益生菌的食物，而后生元是指对动物健康有益的无生命微生物和/或其成分的制剂。每种益生菌菌株都有其独特的生理生化性质，产生的次级代谢产物也丰富多样，作用也各不相同。
[0004]双歧杆菌属(Bifidobacterium sp.)是一种革兰氏阳性菌，存在于人和动物的消化道、阴道和口腔等。双歧杆菌属的细菌是人和动物肠道菌群的重要组成，可以作为益生菌使用。中国专利CN 110373368 A公开了一种长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1，该菌株是从长寿老人粪便中分离筛选而得，且已于2019年6月26日保藏于中国微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC 18032。其公开了长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、单增李斯特菌、肺炎克雷伯菌均有抑制效果，具有抑制胃肠道致病菌、降低胆固醇、耐H2O2的作用。本专利技术针对长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1进行进一步研究，以扩展其用途。
技术实现思路
[0005]基于
技术介绍
存在的技术问题，本专利技术提出了一种长双歧杆菌ZJ1发酵物及其制备方法、应用，本专利技术发现长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵物具有抑制黑色素的作用；可用于制备抑制黑色素化妆品、抑制黑色素药品、抑制黑色素保健品。
[0006]本专利技术提出了一种长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1发酵物，所述长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1发酵物为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵滤液、菌体裂解物、溶胞物、多糖粗提物中的至少一种。
[0007]长双歧杆菌属于益生菌的一种，由于益生菌的功效具有菌株特异性，专利技术人筛选多个长双歧杆菌菌株，发现长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1发酵物具有抑制黑色素的作用。
[0008]所述长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1，来源于长寿老人肠道中，命名为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1，且已于2019年6月26日保藏于中国微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC 18032。
[0009]本专利技术所使用的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1为卓源健康科技有限公司赠送得到。
[0010]本专利技术还提出了上述长双歧杆菌发酵物的制备方法，制备发酵滤液时，包括如下
步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液，固液分离，取液体，调节pH＝7.2
‑
7.4得到发酵滤液；
[0011]制备菌体裂解物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液中的菌体，用PBS缓冲液重悬，然后超声破碎，固液分离，取液体得到菌体裂解物；
[0012]制备溶胞物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液，超声破碎，固液分离，取液体得到溶胞物；
[0013]制备多糖粗提物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液，经脱蛋白处理，然后对溶液进行醇沉处理，取固体得到多糖粗提物。
[0014]上述PBS缓冲液为磷酸缓冲盐溶液的简称，可从市场购得。
[0015]优选地，将长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1接种到MRSL培养液中，调节pH＝5.8
‑
6.8，厌氧发酵培养得到长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液。
[0016]优选地，MRSL培养液的配方为：每1L水中含有15
‑
25g/L的葡萄糖、8.0
‑
12.0g/L的蛋白胨、7.0
‑
9.0g/L的牛肉粉、3.5
‑
4.5g/L的酵母粉、1.5
‑
2.5g/L的磷酸氢二钾、1.5
‑
2.5g/L的柠檬酸氢二铵、4.5
‑
5.5g/L的乙酸钠、0.1
‑
0.3g/L的硫酸镁、0.03
‑
0.05g/L的硫酸锰、0.8
‑
1.2g/L的吐温80和0.4
‑
0.6g/L的L
‑
半胱氨酸盐酸盐。
[0017]MRSL培养液需经118℃高压高温灭菌15min后才能使用。
[0018]上述长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1发酵前需经活化、种子培养处理，然后在MRSL培养液接种长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的种子培养基进行发酵；发酵时的接种量可以为2
‑
4％(v/v)。
[0019]优选地，长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ZJ1的发酵液的pH＝4.0
‑
4.4。
[0020]优选地，发酵培养的温度为36
‑
38℃，发酵时间为16
‑
24h。
[0021]专利技术人通过对发酵时的接种量(1％、2％、4％、8％、12％、16％)、发酵初始发酵液的pH(5.0、6.0、6.5、7.0、8.0和未调节pH的MRSL培养液pH为5.7)、发酵时间(12h、15h、18h、21h、24h、36h)进行筛选，以发酵液菌体细胞密度OD
600
做为指标，进行菌体培养检测，筛选出最适宜的发酵条件，能获得大量的菌体；例如发酵初始发酵液的pH的筛选结果如图1所示。
[0022]优选地，制备菌体裂解物时，超声破碎3
‑
5次，每次超声的程序相同，均为：以每超声3
‑
5s后，间隔3
‑
5s继续超声为一个循环，超声15
‑
25个循环，超声功率为150
‑
225W。
[0023]优选地，制备溶胞物时，超声破碎3
‑
5次，每次超声的程序相同，均为：以每超声3
‑
5s后，间隔3
‑
5s继续超声为一个循环，超声15
‑...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物，其特征在于，所述长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1发酵物为长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵滤液、菌体裂解物、溶胞物、多糖粗提物中的至少一种。2.一种如权利要求1所述长双歧杆菌发酵物的制备方法，其特征在于，制备发酵滤液时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵液，固液分离，取液体，调节pH＝7.2
‑
7.4得到发酵滤液；制备菌体裂解物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵液中的菌体，用PBS缓冲液重悬，然后超声破碎，固液分离，取液体得到菌体裂解物；制备溶胞物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵液，超声破碎，固液分离，取液体得到溶胞物；制备多糖粗提物时，包括如下步骤：取长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵液，经脱蛋白处理，然后对溶液进行醇沉处理，取固体得到多糖粗提物。3.根据权利要求2所述长双歧杆菌发酵物的制备方法，其特征在于，将长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1接种到MRSL培养液中，调节pH＝5.8
‑
6.8，厌氧发酵培养得到长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ZJ1的发酵液。4.根据权利要求3所述长双歧杆菌发酵物的制备方法，其特征在于，MRSL培养液的配方为：每1L水中含有15
‑
25g/L的葡萄糖、8.0
‑
12.0g/L的蛋白胨、7.0
‑
9.0g/L的牛肉粉、3.5
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4.5g/L的酵母粉、1.5
‑
2.5g/L的磷酸氢二钾、1.5
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2.5g/L的柠檬酸氢二铵、4.5
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5.5g/L的乙酸钠、0.1
‑
0.3g/...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖卫华，邬婧，张富娜，余海霞，戚仕梅，吴瑜，吴振坤，
申请(专利权)人：合肥卡迪尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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