【技术实现步骤摘要】
一种高产庆大霉素的绛红色小单孢菌抗性突变选育方法
[0001]本专利技术具体涉及一种高产庆大霉素的绛红色小单孢菌抗性突变选育方法，属于医药生物
技术介绍
[0002]庆大霉素是由Weinstein于1963年首次从绛红小单孢菌和棘孢小单孢菌中分离所得，是一种氨基糖苷类广谱抗生素；现有技术中，庆大霉素存在着产量低、发酵时间长和产品杂质高等缺点；目前，为了提高庆大霉素发酵单位，主要是从改变菌株的遗传性状出发；绛红小单孢菌是GM的产生菌之一，属于放线菌目小单孢菌属，革兰氏阳性菌，具有遗传性质十分稳定，传统的选育方法较难得到高产菌株。
技术实现思路
[0003]为解决上述问题，本专利技术提出了一种高产庆大霉素的绛红色小单孢菌抗性突变选育方法，菌种操作简单，利用微生物代谢产物的反馈抑制机制，增加绛红色小单孢菌对逆环境生长的耐受性，短时间内获得有效价值的突变菌株，是一种可以提高绛红色小单孢菌发酵单位的方法；筛选得到的突变菌株通过发酵试验考察具有较高的产抗能力与传代稳定。
[0004]本专利技术的高产庆大...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高产庆大霉素的绛红色小单孢菌抗性突变选育方法，其特征在于，所述方法步骤如下：（1）培养基制备，将15000μ/ml硫酸庆大霉素粉加入5ml纯化水溶解，过滤无菌后加入60ml种瓶培养基中；（2）孢子菌接种，取一支生长成熟的菌株斜面加入5ml生理盐水，用接种棒均匀地将菌株刮入无菌生理盐水中，制备成孢子悬浮液，接种至上述种瓶培养基中，培养4~6天，温度37℃~40℃，并进行镜检；（3）菌丝培养，当上一步骤镜检菌丝生长状态旺盛时，将正在培养的种瓶加入1%氯化锂溶液，继续培养5~7天，并进行镜检；（4）单菌落获取，当上一步的种瓶中颜色转为浅紫色，镜检菌丝成团，种瓶液变粘稠，取下种瓶，并用逐级稀释法吸取1ml种瓶液，分别稀释至10
‑4、10
‑5、10
‑6、10
‑7，并分别取上述稀释的100μl菌液涂布于平板培养基的培养皿中，培养10~12天，温度37℃~40℃，获取单菌落；（5）突变菌株制备，目视挑选单菌落用无菌技术划线法接种斜面固体培养基并进行培养，得到突变菌株；（6）突变菌株培养，将突变菌株斜面和原始菌株斜面采用挖块法接入1cm2至发酵瓶的发酵培养基种，培养温度33℃~35℃，培养时间96小时；（7）菌株液相测效价，成熟后取下发酵瓶，液相测效价。2.根据权利要求1所述的高产庆大霉素的绛红色小单孢菌抗性突变选育方法，其特征在于：所述60ml种瓶培养基制备过程如下：先进行培养基配比，再进行装瓶，所述培养基配比以1L计为：可溶性淀粉6.25g、蛋白胨5g、玉米粉15g、鹰豆粉18.8g、葡萄糖1g、硝酸钾0.6...
【专利技术属性】
技术研发人员：毛宁，王莉莉，叶晖，时圣凤，孟晓妍，伍雄辉，杨勇，金绍杰，张力支，张文浩，
申请(专利权)人：福安药业集团烟台只楚药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。