一种疟原虫的恒温扩增检测试剂盒及应用方法技术

本发明专利技术涉及一种疟原虫的恒温扩增检测试剂盒及应用方法，该试剂盒包含DNA提取试剂、恒温PCR扩增反应液、阳性对照和阴性对照；本发明专利技术的检测试剂盒特异性好、灵敏度高；核酸扩增反应全部恒定同一温度，恒温扩增仅需35分钟，核酸试纸条检测结果2分钟，全程从接受样品到获得结果整个检测过程仅需1小时左右，且整个反应过程只需一个恒温仪器，特别适合疟原虫的现场快速检测与排除。场快速检测与排除。场快速检测与排除。

【技术实现步骤摘要】
一种疟原虫的恒温扩增检测试剂盒及应用方法


[0001]本专利技术涉及一种针对疟原虫核酸的恒温扩增快速检测技术，适合对疟原虫的定性检测。

技术介绍

[0002]疟疾是严重危害人类健康的重要寄生虫病之一，是全球重要的公共卫生问题。目前发现的可感染人类的疟原虫有恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫、三日疟原虫和诺氏疟原虫5种，其中恶性疟原虫和间日疟原虫广泛分布于全球温热带地区，三日疟原虫主要分布于温热带地区，卵形疟原虫主要分布于非洲撒哈拉地区以南和太平洋西部的某些岛屿，诺氏疟原虫主要分布于东南亚地区。
[0003][0004]目前，用于疟疾快速诊断的主要是一种基于抗原
‑
抗体反应和胶体金免疫层析技术，检测疟原虫抗原的快速诊断方法，简称RDT。该方法检测体内疟原虫因操作简便、快速等特点而备受推崇，然而目前商品化的RDT检测试剂的靶标多针对于恶性疟原虫(pf)和泛疟原虫(Pan，即间日疟、卵形疟和三日疟)，尚无专门针对卵形疟原虫、三日疟原虫的RDT检测试剂，检测敏感性多表现为对恶性疟原虫灵敏度高，而对非恶性疟原虫检测灵敏度不足，尤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种疟原虫恒温扩增检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括下列组成：(1)DNA提取试剂；(2)PCR恒温扩增反应液，所述PCR恒温扩增反应液包括引物和两条探针，所述引物为正向外围引物、反向外围引物、两条扩增交叉引物、1
×
Thermol Buffer，MgSO4，dNTPs溶液，Bst DNA聚合酶和无菌双蒸水；所述正向外围引物为：5
′‑
GAGTTTCTGACCTATCAGCT
‑3′
；反向外围引物为：5
′‑
TCTTGTCACTACCTCTCTTC
‑3′
；所述两条探针的序列分别为：正向5
’
端Biotin标记探针5
′‑
Biotin
‑
TTACCCGTCATAGCCATGTTA
‑3′
；反向3
’
端FitC标记探针5
′‑
Fitc
‑
ACATCTAAGGAAGGCAGCAGG
‑3′
；所述两条扩增交叉引物分别为：扩增正向引物：5
′‑
GGAATCGAACTCTAATTCCCCGTGATGTTAGGGTATTGGCC
‑3′
；扩增反向引物：5
′‑
GGAGAGGGAGCCTGAGAAATTTTAGAATTGGGTAATTTACGCG
‑3′
；(3)阳性对照：含有疟原虫的18S rRNA基因的DNA质粒；(4)阴性对照：无菌双蒸水。2.如权利要求1所述疟原虫恒温扩增检测试剂盒，其特征在于所述1
×
Thermol Buffer组成为：20mM的Tris
‑
HCl、10mM的KCl、1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李望丰，侯建华，
申请(专利权)人：苏州开窗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：