一种卵白蛋白抗炎肽及其应用制造技术

本发明专利技术属于活性肽技术领域，特别涉及一种卵白蛋白抗炎活性肽及其美拉德反应物的制备与应用。所述抗炎肽为FGPH，浓度为500μg/mL时，对LPS诱导的RAW264.7的炎性介质(NO)、炎症因子(TNF

【技术实现步骤摘要】
一种卵白蛋白抗炎肽及其应用

：
[0001]本专利技术属于活性肽
，特别涉及一种卵白蛋白抗炎活性肽及其美拉德反应物的制备与应用。

技术介绍
：
[0002]生物活性肽源于蛋白质，是其中具有生物活性的片段，有着超出基本营养需求的独特生物活性，因其对人体健康的贡献而受到越来越多的关注。由于肽是隐藏在母蛋白中的复杂结构，导致其生物活性难以有效发挥。经过外界蛋白酶酶解、发酵等生物化学反应或是胃肠道消化后可以产生多种生理功能，对人体健康产生积极影响。
[0003]近年来，许多研究都致力于鉴定新型鸡蛋清蛋白肽，鸡基因组的发表极大地提高了在复杂样品中鉴定蛋白质与多肽的能力。研究表明，鸡蛋清蛋白经特定的蛋白酶酶解后鉴定可以得到种类不同的生物活性肽。
[0004]美拉德反应是指以蛋白质、多肽以及氨基酸为代表的氨基化合物与以还原糖、醛和酮为代表的羰基化合物发生的化学反应，受控的美拉德反应可以发展形成包括颜色、风味在内的理想感官属性，还可以影响生物活性。
[0005]当前，生物活性肽已被应用于预防与治疗，我国作为鸡蛋产业大国，鸡蛋的产量与消耗量居世界之首，鸡蛋清中含有丰富的蛋白质，而且含有大量的生物活性物质，有着防治疾病、免疫调节等生理功能。目前，对于鸡蛋清的深度开发利用较少，导致大量的优质蛋白资源被浪费，对鸡蛋清蛋白抗炎活性肽深度加工与利用存在空缺。因此，以鸡蛋清蛋白为原料，研发高品质的鸡蛋清多肽产品具有良好的前景与意义。

技术实现思路
：
[0006]鸡蛋蛋清中含有丰富的蛋白质，是制备生物活性肽的重要来源。蛋白质/肽经美拉德反应后可以进一步提高活性和改善风味。因此，本专利技术将以鸡蛋清蛋白酶解制备多肽，并探究其经美拉德反应后活性以及风味的变化。
[0007]本专利技术提供的技术方案之一，是一种鸡蛋清抗炎活性肽，所述抗炎活性肽的氨基酸序列为：Phe
‑
Gly
‑
Pro
‑
His，以下简称FGPH；
[0008]所述抗炎肽FGPH，可通过对鸡蛋清进行酶解筛选获得，也可通过人工合成的方式获得。
[0009]本专利技术提供的技术方案之二，是上述活性肽FGPH在抗炎反应中的应用，特别是在制备抗炎药物、食品或其他产品中的应用。
[0010]本专利技术提供的技术方案之三，是FGPH的美拉德反应产物FGPH
‑
MRPs；
[0011]进一步地，所述FGPH
‑
MRPs的制备方法如下：称取FGPH，配置成水溶液，按照肽糖质量比为1.5:1比例加入葡聚糖，充分混合，在80℃、pH 9.0下反应10h，反应结束后冷却至室温，得到FGPH的美拉德产物FGPH
‑
MRPs。
[0012]本专利技术提供的技术方案之四，技术方案三所述FGPH的美拉德反应产物FGPH
‑
MRPs
的应用，特别是在抗炎反应中的应用，特别是在制备抗炎药物、食品或其他产品中的应用。
[0013]有益效果：
[0014]本申请从鸡蛋清中酶解制备了抗炎多肽，并经过一系列分离纯化鉴定合成后获得一种具有较高抗炎活性的多肽FGPH。人工合成FGPH后验证抗炎活性，发现浓度为500μg/mL时，FGPH对LPS诱导的RAW264.7的炎性介质(NO)、炎症因子(TNF
‑
α、IL
‑
6、IL
‑
1β)的抑制率分别为64.41
±
0.47％、28.07
±
2.10％、41.72
±
1.83％、52.43
±
2.29％。
[0015]进一步探究了美拉德反应对抗炎活性肽FGPH活性与风味的影响。利用傅里叶红外光谱和扫描电镜探究美拉德产物FGPH
‑
MRPs，发现其结构和形貌较反应前均发生变化；测定美拉德反应前后活性的变化，发现经LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成量抑制率由64.41
±
0.47％提高至68.16
±
0.48％，DPPH、ABTS、羟自由基清除率EC
50
值分别从4.96
±
0.05mg/mL降至4.07
±
0.03mg/mL，从0.81
±
0.01mg/mL降至0.61
±
0.01mg/mL，从2.01
±
0.03mg/mL降至1.56
±
0.02mg/mL；经感官评价和电子舌测评FGPH的滋味得到改善，经电子鼻测评特征气味响应值明显提高。说明经美拉德反应，FGPH的NO抑制率、抗氧化活性以及风味得到改善。
附图说明：
[0016]图1不同分子量(＞10kDa、5～10kDa、3～5kDa、＜3kDa)多肽对细胞活力的影响。
[0017]图2分子量＜3kDa的多肽对NO生成量的影响。
[0018]图3分子量＜3kDa多肽组分的总离子流色谱图。
[0019]图4FGPH的化学结构。
[0020]图5FGPH与iNOS的相互作用图。
[0021]图6FGPH对细胞活力的影响。
[0022]图7不同浓度的FGPH对细胞NO(A)、TNF
‑
α(B)、IL
‑
6(C)、IL
‑
1β(D)分泌量的影响。
[0023]图8FGPH与FGPH
‑
MRPs的红外光谱分析图。
[0024]图9FGPH(A)与FGPH
‑
MRPs(B)的扫描电镜图像。
[0025]图10FGPH与FGPH
‑
MRPs对细胞活力的影响。
[0026]图11FGPH与FGPH
‑
MRPs对细胞NO生成量的影响。
[0027]图12FGPH与FGPH
‑
MRPs的感官评价雷达图。
[0028]图13FGPH与FGPH
‑
MRPs的电子舌味觉指标雷达图。
[0029]图14FGPH与FGPH
‑
MRPs的电子鼻气味指标雷达图。
具体实施方式：
[0030]为了使本专利的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利，并不用于限定本专利技术。
[0031]本专利技术所述抗炎肽FGPH，可通过对鸡蛋清进行酶解筛选获得，也可通过人工合成的方式获得。
[0032]本专利技术采用的部分试验方法如下：
[0033]1.抗炎活性的测定
[0034]1.1RAW264.7细胞培养
[0035]配置含10％胎牛血清的DMEM培养基，将小鼠巨噬细胞RAW264.7活化并快速加入至培养基中，在显微镜下观察细胞形态，转移至培养箱中培养，培养箱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗炎活性肽，其特征在于，所述抗炎活性肽为FGPH，氨基酸序列为：Phe
‑
Gly
‑
Pro
‑
His。2.权利要求1所述FGPH在抗炎反应中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，是FGPH在制备抗炎药物、食品或其他产品中的应用。4.FGPH的美拉德反应产物FGPH
‑
MRPs。5.权利要求4所述FGPH的美拉德反应产物FGPH
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王阿琴，任迪峰，余钧，梁雅馨，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：