【技术实现步骤摘要】
一种巯基修饰寡糖的合成方法
[0001]本专利技术属于糖领域，涉及寡糖的合成与分离，具体涉及一种巯基修饰寡糖的合成方法。
技术介绍
[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]糖类化合物具有潜在的生物医学作用，为了研究其生物学功能，需要有效获取纯度的寡糖及糖缀合物。虽然，化学酶法利用化学合成的灵活多样性和酶的专一性制备了大量的寡糖，但是酶反应体系复杂分离过程过于繁琐仍不能满足对寡糖的需求。Blixt和Norberg在1997年使用二硫键作为耦合/分离策略，首先将二糖以二硫键的形式连接到Thiopropyl 6B树脂上。酶促反应结束后，用二硫苏糖醇DTT将带连接剂的聚糖从固体载体上除去。然而，专利技术人研究发现，靶定到树脂上的寡糖进行酶反应效率低，反应不完全并且使用的Thiopropyl 6B树脂比较昂贵，难以大规模推广使用。
技术实现思路
[0004]为了解决现有技术...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，采用化学法将乳糖制成含巯基的糖基受体，采用酶法将含巯基的糖基受体与单糖偶联合成巯基修饰的寡糖；将巯基修饰的二氧化硅加入至酶法反应后的体系，并将巯基修饰的二氧化硅与所述巯基修饰的寡糖形成二硫键获得二氧化硅
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寡糖复合物，将二氧化硅
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寡糖复合物分离提取后采用双蒸水洗涤，然后采用β
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巯基乙醇溶液打开二氧化硅
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寡糖复合物的二硫键，并将二氧化硅去除，即得巯基修饰的寡糖；所述含巯基的糖基受体的化学结构式如式I所示：其中，R为巯基或巯基取代的烷基。2.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，β
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巯基乙醇溶液在使用前进行超声脱气处理，尽量避免氧化巯基。3.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，酶法反应后，沸水浴终止反应，在1～10℃条件下离心分离，取上清液浓缩，将浓缩液与巯基修饰的二氧化硅混合20～60min，离心分离收集沉淀，将沉淀双蒸水洗涤，然后加入β
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巯基乙醇溶液混合20～60min，离心分离收集含有巯基修饰的寡糖的上清液。4.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，R为巯基。5.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，巯基修饰的二氧化硅的制备过程为：通过法用四乙氧基硅烷在氨水条件下制备二氧化硅，采用巯基硅烷对所述二氧化硅进行修饰反应获得巯基修饰的二氧化硅。6.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，对乳糖依次进行全乙酰化反应、溴苷化反应、硫苷化反应、脱保护反应获得含巯基的糖基受体。7.如权利要求1所述的巯基修饰寡糖的合成方法，其特征是，采用酶法制备巯基修饰的寡糖的过程包括：利用酶法模块化组装1将N
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乙酰氨基葡萄糖以β1
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3糖苷键偶联到含巯基的糖基受体上合成三糖；利用酶法模块化组装2将半乳糖以β1
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4糖苷键偶联到三糖上合成四糖；利用酶法模块化组装1将N
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乙酰氨基葡萄糖以β1
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3糖苷键偶联到四糖上合成poly
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LacNAc骨架五糖；利用酶法模块化组装2将半乳糖以β1
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4糖苷键偶联到poly
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LacNAc骨架五糖上合成六糖1；利用酶法模块化组装3将岩藻糖以α1
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2糖苷键偶联到六糖1上合成式(II)所示的七糖；优选地，酶法模块化组装1采用的酶为N
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乙酰氨基己糖激酶与糖核苷生成酶的融合酶以及β1
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3N
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乙酰氨基葡萄糖基转移酶；优选地，酶法模块化组装2采用的酶为半...
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