一种人参总蛋白提取物及其制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种人参总蛋白提取物及其制备方法及应用，该人参总蛋白提取物为冻干粉状，该人参总蛋白提取物中含量最高的8种蛋白为：核糖核酸酶样主要贮存蛋白、类黄素依赖型氧化还原酶FOX5、类β

【技术实现步骤摘要】
一种人参总蛋白提取物及其制备方法及应用
[0001]本申请是针对申请号为2022107302632，申请日为2022年6月24日，专利技术名称为一种人参总蛋白的制备方法及其改善帕金森病的应用的分案申请。


[0002]本专利技术具体涉及一种人参总蛋白提取物及其制备方法及应用。

技术介绍

[0003]人参是五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的根及根茎，是我国应用广泛的传统中药，有保护神经系统、心血管系统、内分泌系统的作用。人参的活性成分复杂，主要包括皂苷、多糖、挥发油、甾醇、有机酸、蛋白质和多肽、生物碱等。目前国内外关于人参的研究多集中于人参皂苷，有关人参蛋白和多肽的相关研究较少。根据人参蛋白(GP)的性质，GP常用的提取方法有以Tris
‑
HCl溶液及PBS溶液为主的传统浸提法和有机试剂沉淀法。有机试剂沉淀法包括Trizol提取法、膜过滤法、沉淀法、快速溶剂萃取法等。目前报道的人参蛋白根据功能不同分为：类RNA酶蛋白、核糖核酸酶、皂苷合成相关酶、几丁质样蛋白和木聚糖酶等，这些蛋白与人参抗真菌、抗病毒、合成皂苷、影响细胞增殖和转录活性有关。
[0004]随着对GP的研究的深入，发现了GP的药理作用、抗氧化应激及老化、提升免疫的作用、耐缺氧和抗疲劳、调节血脂的作用、抗辐射的作用、有抗真菌作用、有镇痛、提高睡眠质量、改善记忆力、增强学习能力等作用。
[0005]现有GP提取工艺中需使用Tris
‑
HCl溶液、PBS溶液以及有机试剂缓冲盐溶液等，且提取液中不可避免的含有大量的小分子化合物，对人体有毒副作用，需要在保证蛋白活性的前提下进行繁琐的去溶剂步骤以及纯化步骤，因此并不适合大规模工业化生产，导致人参总蛋白制备成本高，进而导致较高的用药成本。此外，人参总蛋白并非单一的化合物，具有功效的成分往往是一个大的有效成分群。复杂的提取工艺对人参总蛋白有效成分群的结构影响较大，破坏各蛋白质活性，且组成比发生改变，对于同种病症的治疗效果也出现明显的差异性。
[0006]帕金森病(PD)是一种进行性神经退行性疾病，可引起运动和非运动症状。运动症状包括运动和身体任务：震颤、僵硬、缓慢和不平衡。非运动(nonmovement)症状影响许多器官系统，如胃窦和泌尿生殖系统。通常情况下，患者可能不会主动自愿表明自己已经出现非运动症状，因为这些症状使他们很尴尬，导致治疗时间更多的集中在运动症状上，也或者他们并不知道这些症状可能与帕金森病有关。被诊断为帕金森病的人通常在运动症状开始前几年会逐渐显示出非运动症状，但通常他们不会主动提到这些症状，除非特别询问。这些前驱非运动特征包括快速眼动睡眠行为障碍、嗅觉丧失、便秘、尿功能障碍、直立性低血压、白天过度嗜睡和抑郁。这些症状不是帕金森病的特异性，但当它们同时发生时，随后诊断出患有帕金森病的风险更大。快速眼动睡眠行为障碍与后续诊断出帕金森病的风险增加密切相关。超过90％的特发性快速眼动睡眠行为障碍的个体最终发展为突触核蛋白相关的神经退行性疾病，通常是帕金森病或相关疾病(痴呆伴路易体，多系统萎缩)，初步估计有大约30％
至50％的帕金森病患者有快速眼动睡眠行为障碍。一旦帕金森病的病史和体格检查特征得到证实，临床医生排除了可能提示非典型帕金森病的特征(“红色标志症状”)，并评估患者对左旋多巴(或潜在的其他多巴胺能药物)的反应，以证实帕金森病。静息震颤的逐渐开始，出现缓慢或广义(不是关节特异性)僵硬。仅有大约20％的帕金森病患者没有静息震颤。
[0007]帕金森病运动交感神经的药理学治疗主要以多巴胺为基础。左旋多巴制剂、多巴胺激动剂和单胺氧化酶
‑
B(MAO
‑
B)抑制剂是有用的初始治疗方法。对于有明显震颤的年轻个体，抗胆碱能药物(如三羟苯基)是有用的，但由于可能发生不良事件，特别是与认知有关的不良事件，需要谨慎。有效的运动干预帕金森病包括步态和平衡训练，不同的运动方法可能有利于帕金森病的不同运动方面。跨学科治疗咨询的参考是帕金森病质量护理的重要组成部分。目前，没有药物疗法可以预防或延缓帕金森病的进展。最近的第二阶段随机临床试验高强度跑步机运动的个人新发帕金森病发现，运动功能的恶化在高强度运动组明显低于通常的护理组，需要进一步研究运动是否改变帕金森病的进展。开发能够预防、缓解和治疗帕金森病的药物一直是研究的重点和难点。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种适合工业化大规模生产的人参总蛋白的制备方法，通过该制备方法制备的人参总蛋白对人体无毒副作用，并对金森病的预防、缓解和治疗具有积极作用。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0010]一种人参总蛋白的制备方法，所述的制备方法包括以下步骤：
[0011](1)将人参干粉与8～12倍体积人参干粉体积的水混合，利用NaOH调节体系pH值为7.0～9.0，在4℃条件下浸提4～12h，分离得到上清液和残渣；
[0012](2)将步骤(1)的残渣代替步骤(1)中的人参干粉并重复步骤(1)1～3次；
[0013](3)合并步骤(1)和步骤(2)中的上清液，利用HCl调节pH值为3.0～3.5，在4℃条件下过夜，低温离心，取沉淀，加入水并调节pH值为7.0～9.0，使沉淀复溶，采用超滤管截留低温超滤，取上液，冻干得到所述的人参总蛋白。
[0014]优选地，调节步骤(1)中pH值为7.0～8.0。
[0015]优选地，控制步骤(1)中浸提时间为6～10h，例如6h、7h、8h、9h、10h。
[0016]优选地，步骤(3)中，合并步骤(1)和步骤(2)中的上清液，调节pH值为3.5～4.5。
[0017]优选地，步骤(3)中加入水并调节pH值为7.0～8.0。
[0018]优选地，步骤(3)中超滤管的截留分子量为2000～4000Da，例如2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da。
[0019]根据一种优选的实施方式，所述的制备方法为：
[0020]将人参干粉和人参干粉的十倍体积的已调节pH约为7.0的蒸馏水混合，调节终pH值6.5～7.5，5500～6500rpm离心25～35min，得到的上清液即为提取液，分离得到的残渣重复上述步骤，合并两次的提取液，之后将提取液调节pH至4.0以下，4℃过夜沉淀，之后离心分离上清与沉淀，重新加入适量蒸馏水并调节pH值为6.5～7.5，复溶沉淀，采用分子量为2800～3200的超滤管截留超滤，超滤管离心条件为4500～5500r/min离心25～35min，收集上液，将上液冻干即得所述的人参总蛋白。
[0021]本专利技术还提供由所述的制备方法制备的人参总蛋白。
[0022]具体地，所述的人参总蛋白中含量最高的8种蛋白为：核糖核酸酶样主要贮存蛋白、类黄素依赖型氧化还原酶FOX5、类β
‑
淀粉酶、类乳胶蛋白、甘油醛3
‑
磷酸脱氢酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人参总蛋白提取物，其特征在于，所述人参总蛋白提取物为冻干粉状，所述的人参总蛋白提取物中含量最高的8种蛋白为：核糖核酸酶样主要贮存蛋白、类黄素依赖型氧化还原酶FOX5、类β
‑
淀粉酶、类乳胶蛋白、甘油醛3
‑
磷酸脱氢酶、蛋氨酸合酶、铁氧还蛋白依赖的谷氨酸合酶1、前序列蛋白酶2。2.根据权利要求1所述的人参总蛋白提取物，其特征在于，上述8种蛋白是按照含量由高到低排列的。3.根据权利要求1所述的人参总蛋白提取物，其特征在于，所述人参总蛋白提取物由人参干粉提取得到，每克所述人参干粉能够提取23.9mg～29.18mg人参总蛋白。4.根据权利要求3所述的人参总蛋白提取物，其特征在于，所述人参总蛋白提取物的蛋白纯度为80.80％。5.如权利要求1至4中任一项所述的人参总蛋白提取物的制备方法如下：所述的制备方法包括以下步骤：(1)将人参干粉与水混合，NaOH调节pH值为7.0～9.0，在4℃条件下浸提4～12h，分离得到上清液和残渣；(2)HCl调节所述上...

【专利技术属性】
技术研发人员：连文慧，李婕，庞博，许宁，幸书杨，赵贵佳，孙天霞，冯琳，
申请(专利权)人：长春中医药大学，
类型：发明
国别省市：