血红蛋白F的测定方法技术

本发明专利技术涉及血红蛋白F的测定方法。本发明专利技术的课题在于，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，更准确地测定HbF。本发明专利技术的解决手段在于，基于将已知含有HbA1c且HbF相对于总血红蛋白低于规定含有率的第一血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，预先决定HbA1c峰值与包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值的相关式即第一相关式；将测定对象的血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图的HbA1c峰值带入第一相关式而得到合成峰值，将该合成峰值从该血液待测体的包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值中减去，计算出修饰HbF峰值；将该修饰HbF峰值与该血液待测体的HbF峰值相加来校正该HbF峰值。值。值。

【技术实现步骤摘要】
血红蛋白F的测定方法


[0001]本专利技术涉及血液待测体中的血红蛋白F的测定方法。

技术介绍

[0002]血液待测体中的各种血红蛋白可以在高效液相色谱等分离分级法中测定。作为血红蛋白的一种的血红蛋白F(HbF)的测定值由于成为异常血红蛋白症、地中海贫血症的诊断材料，因此要求高的准确性。作为使用液相色谱的血红蛋白F的测定方法，可以举出下述专利文献1所公开的方法。
[0003]在先技术文献
[0004]专利文献
[0005]专利文献1：日本特开2014
‑
235023号公报。

技术实现思路

[0006]专利技术要解决的问题
[0007]在将血液待测体供于阳离子交换液相色谱而得到的色谱图中，在从柱的溶出速度比HbF峰快的一侧出现合成峰，该合成峰是血红蛋白A(HbA)的糖化物即血红蛋白A1(HbA1)中的血红蛋白A1a(HbA1a)峰和血红蛋白A1b(HbA1b)峰重叠的峰。
[0008]因此，本公开的实施方式的课题在于，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，更准确地测定HbF。
[0009]解决问题的手段
[0010]推测：如HbA糖化后成为HbA1c那样，HbF也受到糖化等修饰而成为修饰型HbF。由于修饰型HbF也是HbF的一种，因此为了更准确地测定HbF，还需要测定修饰型HbF的峰值。在专利技术人的实验中，观察到该合成峰的大小根据HbF峰的大小而变化。基于该观察结果，推测在该合成峰中还含有HbF的修饰物。合成峰中所含的HbA1a、HbA1b、修饰型HbF的电荷、大小相互接近，因此难以用阳离子交换色谱分离HbA1a、HbA1b、修饰型HbF，无法准确地测定修饰型HbF的峰值。其结果，无法测定血液待测体中的HbF总量(换言之，未被修饰的HbF浓度与修饰型HbF浓度的合计浓度)。
[0011]本公开的一个方式的HbF的测定方法中，基于将已知含有HbA1c且HbF相对于总血红蛋白低于规定含有率的第一血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，预先决定第一相关式，该第一相关式是HbA1c峰值与包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值的相关式；将测定对象的血液待测体的HbA1c峰值带入第一相关式而得到合成峰值，将该合成峰值从该血液待测体的包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值中减去，计算出修饰HbF峰值；将该修饰HbF峰值与该血液待测体的HbF峰值相加来校正该HbF峰值。
[0012]专利技术效果
[0013]根据本专利技术的实施方式，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，能够更准确地测定HbF。
附图说明
[0014]图1示意性示出将血液待测体供于高效液相色谱而得到的血红蛋白的色谱图的示例。
[0015]图2示意性示出通常待测体中HbF峰与合成峰的关系。
[0016]图3示意性示出高HbF待测体中HbF峰与合成峰的关系。
[0017]图4是将血液待测体1供于高效液相色谱而得到的色谱图。
[0018]图5是将血液待测体2供于高效液相色谱而得到的色谱图。
[0019]图6是将血液待测体3供于高效液相色谱而得到的色谱图。
[0020]图7是将血液待测体4供于高效液相色谱而得到的色谱图。
[0021]图8是示出将健康人的血液受待测体组供于高效液相色谱而得到的色谱图中的、HbA1c峰值与包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值之间的相关关系的散布图。
[0022]图9是示出将已知含有HbF的血液待测体组供于高效液相色谱而得到的色谱图中的、HbF峰值与修饰HbF峰值之间的相关关系的散布图。
具体实施方式
[0023]以下，参照附图，对本公开的实施方式进行说明。各图中共用的符号即使没有特别的说明，也表示相同的部分。此外，本公开中的“峰值”是指通过色谱图确认的各峰的高度或面积，可以使用相对值，也可以使用绝对值。该相对值可以是相对于色谱图的面积整体的比例，也可以是相对于色谱图中所占的与血红蛋白相关的峰面积整体的比例，或者，也可以是相对于特定的峰(例如，HbA0峰)的面积的比例。
[0024](1)第一实施方式
[0025]将血液待测体供于阳离子交换液相色谱时，可以得到例如图1中示意性示出的血红蛋白的色谱图。在该色谱图中，按照从柱的溶出速度快的顺序，确认到包含HbA1a峰11和HbA1b峰12(参照图2和图3)的合成峰10、HbF峰20、不稳定型HbA1c峰30、HbA1c峰40、HbA0峰50和HbA2峰60(参照图4～图7)。
[0026]分别将HbF峰值小于1％的通常的血液待测体的色谱图示意性示出于图2中，并将高HbF血症患者的血液待测体的色谱图示意性示出于图3中。比较两个图中大致相同大小的HbA1c峰40可知，图3的色谱图的HbF峰20比图2的色谱图的HbF峰20高。此时，图3的色谱图的合成峰10也比图2的色谱图的合成峰10高。
[0027]在此，如图2所示，合成峰10中包含HbA的糖化物即HbA1中的HbA1a峰11和HbA1b峰12。并且，如图3所示，HbF峰20增大时，合成峰10增大。由于该合成峰10中包含作为糖化物的HbA1a峰11和HbA1b峰12，如图3所示，因此认为该合成峰10的增大量是由于HbF修饰物即修饰HbF峰13的增大而引起的。另一方面，在图2所示的通常待测体中修饰HbF峰13极少，认为合成峰10的大部分被HbA1a峰11和HbA1b峰12占据。
[0028]另一方面，假设不管是在图2所示的通常待测体中，还是在图3所示的高HbF待测体中，HbA1a峰11值和HbA1b峰12值的合计相对于HbA1c峰40的比例大致恒定。在该假设下，在通常待测体中，如果发现HbA1c峰40的峰值与合成峰10的峰值(实质上HbA1a峰11的峰值和HbA1b峰12的峰值的合计值)之间的相关关系，则能够将该相关关系带入高HbF待测体的HbA1c峰40中来计算合成峰10中的HbA1a峰11和HbA1b峰12的合计。HbA1a峰11的峰值和
HbA1b峰12的峰值的合计值与合成峰10的峰值之差基于修饰HbF峰13值。并且，认为能够通过从图3所示的色谱图中的合成峰10中减去该计算出的合计来计算出修饰HbF峰13。而且，如后述的实施例(参照图8)所示，可知对于多个通常待测体，HbA1c峰40与合成峰10之间存在高的相关关系。
[0029]基于该相关关系，本公开的第一实施方式的HbF的测定方法基于将已知含有HbA1c且不含HbF的第一血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，预先决定HbA1c峰值与包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值的相关式即第一相关式，将测定对象的血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图的HbA1c峰值带入所述第一相关式而得到合成峰值，将该合成峰值从该血液待测体的包含HbA1a峰和HbA1b峰的合成峰值中减去，计算出修饰HbF峰值，将修饰HbF峰值与该血液待测体的HbF峰值相加来校正该HbF峰值。该HbF峰值与血液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血红蛋白F的测定方法，其中，基于将已知含有血红蛋白A1c且血红蛋白F相对于总血红蛋白低于规定含有率的第一血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，预先决定第一相关式，所述第一相关式是血红蛋白A1c峰值与包含血红蛋白A1a峰和血红蛋白A1b峰的合成峰值的相关式；将测定对象的血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图的血红蛋白A1c峰值带入所述第一相关式而得到合成峰值，将该合成峰值从该血液待测体的包含血红蛋白A1a峰和血红蛋白A1b峰的合成峰值中减去，计算出修饰血红蛋白F峰值；将所述修饰血红蛋白F峰值与该血液待测体的血红蛋白F峰值相加来校正该血红蛋白F峰值。2.一种血红蛋白F的测定方法，其中，基于将已知含有血红蛋白A1c且血红蛋白F相对于总血红蛋白低于规定含有率的第一血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，预先决定第一相关式，所述第一相关式是血红蛋白A1c峰值与包含血红蛋白A1a峰和血红蛋白A1b峰的合成峰值的相关式；基于将已知含有血红蛋白A1c和血红蛋白F的第二血液待测体组供于液相色谱而得到的色谱图，将血红蛋白A1c峰值带入所述第一相关式而得到合成峰值，从该第二血液待测体组的包含血红蛋白A1a峰和血红蛋白A1b峰的合成峰值中减去所述合成峰值而得到该第二血液待测体组的修饰血红蛋白F峰估计值，使用该第二血液待测体组的血红蛋白F峰值和所述修饰血红蛋白F峰估计值，预先决定第二相关式，所述第二相关式是血红蛋白F峰值与修饰血红蛋白F峰值的相关式；将测定对象的血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图的血红蛋白F峰值带入所述第二相关式，计算出修饰血红蛋白F峰值；将所述修饰血红蛋白F峰值与该血液待测体的血红蛋白F峰值相加来校正该血红蛋白F峰值。3.一种血红蛋白F的测定方法，其中，基于将已知含有血红蛋白A1c且血红蛋白F相对于总血红蛋白低于规定含有率的第一血液待测体组供于液相...

【专利技术属性】
技术研发人员：石川一辉，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：