血红蛋白F的测定方法技术

本发明专利技术涉及血红蛋白F的测定方法。本发明专利技术的课题在于，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，更准确地测定HbF。本发明专利技术的解决手段在于，基于将血液待测体赋于液相色谱而得到的色谱图，计算出血红蛋白F峰的峰值相对于血红蛋白峰整体的峰值的比例；对所述比例乘以规定系数，计算出HbF峰相对于血红蛋白峰整体的校正值。的校正值。的校正值。

【技术实现步骤摘要】
血红蛋白F的测定方法


[0001]本专利技术涉及血液待测体中的血红蛋白F的测定方法。

技术介绍

[0002]血液待测体中的各种血红蛋白可以在高效液相色谱、毛细管电泳等分离分级法中测定。作为血红蛋白的一种的血红蛋白F(HbF)的测定值由于成为异常血红蛋白症、地中海贫血症的诊断材料，因此要求高的准确性。HbF的测定大多在毛细管电泳中进行，大多使用在毛细管电泳中测定的HbF的测定值作为诊断材料。作为使用液相色谱的血红蛋白F的测定方法，可以举出下述专利文献1所公开的方法。
[0003]在先技术文献
[0004]专利文献
[0005]专利文献1：日本特开2014
‑
235023号公报。

技术实现思路

[0006]专利技术要解决的问题
[0007]通过液相色谱得到的血红蛋白的色谱图中可见的成分峰与通过毛细管电泳得到的血红蛋白的分析图中可见的成分峰大致比例一致，但仅HbF峰在两者之间发现背离。具体而言，使用液相色谱的HbF峰的比例小于使用毛细管电泳的HbF峰的比例。
[0008]因此，本公开的实施方式的课题在于，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，更准确地测定HbF。
[0009]解决问题的手段
[0010]本公开的一个方式的HbF的测定方法中，基于将血液待测体赋于液相色谱而得到的色谱图，计算出HbF峰相对于血红蛋白峰整体的比例，对上述比例乘以规定系数，计算出HbF峰相对于血红蛋白峰整体的校正值。
[0011]专利技术效果r/>[0012]根据本专利技术的实施方式，基于将血液待测体供于液相色谱而得到的色谱图，更准确地测定HbF。
附图说明
[0013]图1示意性示出将血液待测体供于高效液相色谱而得到的血红蛋白的色谱图的示例。
[0014]图2示意性示出通常待测体中HbF峰与合成峰的关系。
[0015]图3示意性示出高HbF待测体中HbF峰与合成峰的关系。
[0016]图4是示意性示出将通常待测体供于毛细管电泳而得到的血红蛋白的分析图。
[0017]图5是示意性示出将高HbF待测体供于毛细管电泳而得到的血红蛋白的分析图。
[0018]图6示出在第一模式下使用装置1而得到的色谱图的示例。
[0019]图7示出在第二模式下使用装置1而得到的色谱图的示例。
[0020]图8示出使用装置2得到的血液待测体的色谱图的示例。
[0021]图9示出在第一模式下使用装置3而得到的血液待测体的色谱图的示例。
[0022]图10示出在第二模式下使用装置3而得到的血液待测体的色谱图的示例。
[0023]图11示出使用毛细管电泳装置得到的血液待测体的分析图的示例。
[0024]图12是示出通过液相色谱得到的HbF峰值与通过毛细管电泳得到的HbF峰值之间的相关关系的图。
具体实施方式
[0025]以下，参照附图，对本公开的实施方式进行说明。各图中共用的符号即使没有特别的说明，也表示相同的部分。此外，本公开中的“峰值”是通过色谱图确认的各峰的高度或面积，可以使用相对值，也可以使用绝对值。该相对值可以是相对于色谱图的面积整体的比例，也可以是相对于色谱图中所占的与血红蛋白相关的峰面积整体的比例，或者，也可以是相对于特定的峰(例如，HbA0峰)的面积的比例。
[0026]若将血液待测体供于液相色谱，则可以得到例如图1中示意性示出的血红蛋白的色谱图。在该色谱中，按照从柱的溶出速度快的顺序，确认到包含HbA1a峰11和HbA1b峰12(参照图2和图3)的合成峰10、HbF峰20、不稳定型HbA1c峰30、HbA1c峰40、HbA0峰50和HbA2峰60(参照图8)。
[0027]分别将HbF峰值小于1％的通常的血液待测体的色谱图示意性示出于图2中，并将高HbF血症患者的血液待测体的色谱图示意性示出于图3中。比较两个图中大致相同大小的HbA1c峰30可知，图3的色谱图的HbF峰20比图2的色谱图的HbF峰20高。此时，图3的色谱图的合成峰10也比图2的色谱图的合成峰10高。
[0028]在此，如图2所示，合成峰10中包含HbA的糖化物即HbA1中的HbA1a峰11和HbA1b峰12。并且，如图3所示，HbF峰20增大时，合成峰10增大。由于该合成峰10中包含作为糖化物的HbA1a峰11和HbA1b峰12，如图3所示，因此认为该合成峰10的增大量是由于HbF的修饰物即修饰HbF峰13的增大而引起的。另一方面，在图2所示的通常待测体中修饰HbF峰13极少，认为合成峰10的大部分被HbA1a峰11和HbA1b峰12占据。
[0029]接着，分别将HbF峰值小于1％的通常的血液待测体供于毛细管电泳得到的分析图示意性示出于图4中，并将高HbF血症患者的血液待测体供于毛细管电泳得到的分析图示意性示出于图5中。如两个图所示，在分析图中按照HbA峰100、HbF峰120、HbA2峰160的顺序出现峰。通过比较两个图可知，图5的色谱图的HbF峰120比图4的色谱图的HbF峰120高。然而，图4的HbA峰100和HbA2峰160的大小与图5的HbA峰100和HbA2峰160的大小大致相同。由此，推测在毛细管电泳的HbF峰120中还包含修饰HbF峰值。
[0030]基于以上的观察，本公开的实施方式的HbF的测定方法中，基于将血液待测体赋于液相色谱而得到的色谱图，计算出血红蛋白F峰相对于血红蛋白峰整体的比例，对该比例乘以规定系数，计算出血红蛋白F峰相对于血红蛋白峰整体的校正值。具体而言，该规定系数为1.15以上且小于1.25，优选为1.2。在计算该校正值时，只要对血红蛋白F峰相对于血红蛋白峰整体的比例结果上乘以规定系数即可。例如，若求出血红蛋白F的峰值乘以规定系数而得到的校正值后，计算出校正值相对于血红蛋白峰整体的峰值的比例，则能够计算出血红
蛋白F峰相对于血红蛋白峰整体的校正值。
[0031]实施例
[0032](1)液相色谱装置
[0033]作为液相色谱装置，使用以下的装置1、装置2、装置3和装置4的阳离子交换色谱装置。
[0034](1
‑
1)装置1
[0035]作为装置1，使用ADAMS HA
‑
8180V(销售商：爱科来)。在该装置1中，使用柱单元80(销售商：爱科来)，该柱单元80是0.35ml的由甲基丙烯酸酯共聚物构成的亲水性聚合物作为填充剂而填充的柱。作为试剂，分别使用80A(销售商：爱科来)作为洗脱液A、使用80B(销售商：爱科来)作为洗脱液B、使用80CV(销售商：爱科来)作为洗脱液C来使血红蛋白从柱中溶出，使用80H(销售商：爱科来)作为溶血/清洗液。80A、80B、80CV和80H的组成和pH如下表1所示。这些试剂以1.7ml/min的流速在柱中流动。
[0036](1
‑
2)装置2
[0037]作为装置2，使用ADAMS HA
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血红蛋白F的测定方法，其中基于将血液待测体赋于液相色谱而得到的色谱图，计算出血红蛋白F峰的峰值相对于血红蛋白峰整体的峰值的比例；对所述比例乘以规定系数，计算出血红蛋白F峰相对于血红蛋白峰整体的校正值。2.根据权利要求1所述的血红蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：石川一辉，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：