大狼毒中具有强抗皮肤癌和抗炎活性的二萜化合物的制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种大狼毒中具有强抗癌和抗炎活性的二萜化合物的制备方法和应用，所述二萜化合物具有式1、2和3的结构式：。所述二萜化合物的应用为在制备抗癌药物或抗炎药物中的应用；所述三个二萜化合物的制备方法是以大狼毒全草为原料，用化学溶剂提取、萃取，经过正相柱色谱分离，然后制备HPLC分离获得。本发明专利技术首次从大狼毒全草中分离得到ingenol

【技术实现步骤摘要】
大狼毒中具有强抗皮肤癌和抗炎活性的二萜化合物的制备方法和应用


[0001]本专利技术属于天然产物化学
，具体涉及大狼毒中三种具有强抗皮肤癌和抗炎活性的二萜化合物的制备方法和应用。

技术介绍

[0002]据世界卫生组织的报道，癌症是世界第二大致死疾病，每年都造成大量的人口死亡。到目前为止，很多抗癌药物的药效不能让人满意，我们仍然缺乏高效、无明显毒副作用的抗癌药物，而天然药物的抗癌活性研究却显现了广阔的运用前景。因此，开发活性更佳、治疗效果更好的癌症治疗药物是研究人员亟需解决的问题。
[0003]L
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NMMA（L
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单甲基精氨酸）是一种非特异的NOS抑制剂，能阻止关体内 NOS的合成，间接抑制NO的产生，从而抑制炎症，因此，研究抗NO产生的化合物对于开发抗炎药物具有重要的意义。
[0004]本专利技术旨在提供一种从大狼毒中分离得到的具有抗皮肤癌和抗炎活性的二萜化合物。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一目的是提供大狼毒中三种二萜化合物的应用，本专利技术的第二目的是提供所述三种二萜化合物的制备方法。
[0006]本专利技术的第一目的是这样实现的，一种二萜化合物或含有该二萜化合物的药物组合物在制备抗癌药物或抗炎药物中的应用，所述二萜化合物具有式1、式2和式3所示的结构：
。所述二萜化合物的制备方法，具体包括以下步骤：(1) 有机溶剂加热超声提取：将大狼毒全草晒干，粉碎至30
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90目，在55℃
‑r/>60℃下用第一有机溶剂浸泡后超声提取5
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7次，每次60
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80分钟，合并提取液，浓缩后得到浸膏a；(2) 有机溶剂萃取：将所述浸膏a倒入分液漏斗中，加入浸膏重量2
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3倍的水和第二有机溶剂，搅拌均匀后摇动，充分静置，待溶液分液后取有机溶剂层，反复3
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4次，合并有机溶剂层，减压蒸馏得到浸膏b；(3) 正相色谱法分离：将所述浸膏b 用硅胶柱层析分离，用体积比为1:0，9:1，7:1，4:1，2:1，1:1和0:1的石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱，经薄层色谱和紫外光谱分析检测后合并相似组分得到5个组分A
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E。其中组分A主要由石油醚/乙酸乙酯1:0制备，B主要由石油醚/乙酸乙酯9:1和7:1制备，C主要由石油醚/乙酸乙酯4:1制备，D主要由石油醚/乙酸乙酯2:1制备，E由石油醚/乙酸乙酯1:1和0:1制备；(4) 制备HPLC纯化：将组分B经制备HPLC分离纯化，即得化合物1、化合物2和化合物3。
[0007]本专利技术的有益效果为：本专利技术首次从大狼毒中分离得到三种具有抗癌和抗炎活性的二萜化合物，即ingenol
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dodecanoate、ingenol
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palmitate和ingenol
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pentadecanoate，为这三个二萜化合物的制备提供了新的制备途径，本制备方法操作简单，获得的二萜ingenol
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dodecanoate、ingenol
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palmitate和ingenol
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pentadecanoate纯度均高达98%
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99%；另外，本专利技术首次发现ingenol
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dodecanoate、ingenol
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palmitate和ingenol
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pentadecanoate具有很好的抗皮肤癌、抗结肠癌和抗炎活性，通过抗癌活性筛选，ingenol
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dodecanoate、ingenol
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palmitate和ingenol
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pentadecanoate对人类黑色素瘤细胞系A2058有很强的细胞毒活性，IC
50
值分别为2.13、2.82和2.11μΜ，均强于抗癌药顺铂；ingenol
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palmitate和ingenol
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pentadecanoate对人结肠癌细胞系SW480 的IC
50
值分别14.73和14.41μΜ，强于抗癌药顺铂；在抗炎活性实验中，这三个二萜的活性分别为
4.72、4.51和4.21μΜ，均强于NOS抑制剂L
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单甲基精氨酸。这三个二萜可作为抗皮肤癌和抗炎药物的先导性化合物的研发，在抗癌和抗炎药物研究领域开发有很好的应用前景，也为此类二萜化合物类物质的提取以及药用研究提供了基础及新思路。
附图说明
[0008]图1为本专利技术实施例1中化合物1的1H NMR谱图；图2为本专利技术实施例1中化合物1的DEPT谱图；图3为本专利技术实施例1中化合物1的MS谱图；图4为本专利技术实施例1中化合物2的1H NMR谱图；图5为本专利技术实施例1中化合物2的DEPT谱图；图6为本专利技术实施例1中化合物2的MS谱图；图7为本专利技术实施例1中化合物3的1H NMR谱图；图8为本专利技术实施例1中化合物3的DEPT谱图；图9为本专利技术实施例1中化合物3的MS谱图；图10为本专利技术二萜化合物的结构式。
具体实施方式
[0009]下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或替换，均属于本专利技术的保护范围。
[0010]本专利技术一种二萜化合物或含有该二萜化合物的药物组合物在制备抗癌药物或抗炎药物中的应用，所述二萜化合物具有式1、式2和式3所示的结构：。
[0011]所述抗癌药物为用于治疗皮肤癌的药物。
[0012]所述抗癌药物为用于治疗结肠癌的药物。
[0013]所述药物剂型为片剂、胶囊剂、口服液、口含片、 颗粒剂、混悬剂、栓剂、注射剂、粉
针剂、滴丸、缓释剂、控释剂或靶向制剂。
[0014]本专利技术还提供了所述二萜化合物的制备方法，具体按以下步骤实现：(1) 有机溶剂加热超声提取：将大狼毒全草晒干，粉碎至30
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90目，在55℃
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60℃下用第一有机溶剂浸泡后超声提取5
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7次，每次60
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80分钟，合并提取液，浓缩后得到浸膏a；(2) 有机溶剂萃取：将所述浸膏a倒入分液漏斗中，加入浸膏重量2
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3倍的水和第二有机溶剂，搅拌均匀后摇动，充分静置，待溶液分液后取有机溶剂层，反复3
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4次，合并有机溶剂层，减压蒸馏得到浸膏b；(3) 正相色谱法分离：将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二萜化合物或含有该二萜化合物的药物组合物在制备抗癌药物或抗炎药物中的应用，其特征在于，所述二萜化合物具有式1、式2和式3所示的结构：。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述抗癌药物为用于治疗皮肤癌的药物。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述抗癌药物为用于治疗结肠癌的药物。4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物剂型为片剂、胶囊剂、口服液、口含片、 颗粒剂、混悬剂、栓剂、注射剂、粉针剂、滴丸、缓释剂、控释剂或靶向制剂。5.权利要求1所述二萜化合物的制备方法，其特征在于，具体按以下步骤实现：(1) 有机溶剂加热超声提取：将大狼毒全草晒干，粉碎至30
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90目，在55℃
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60℃下用第一有机溶剂浸泡后超声提取5
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7次，每次60
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80分钟，合并提取液，浓缩后得到浸膏a；(2) 有机溶剂萃取：将所述浸膏a倒入分液漏斗中，加入浸膏重量2
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3倍的水和第二有机溶剂，搅拌均匀后摇动，充分静置，待溶液分液后取有机溶剂层，反复3
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4次，合并有机溶剂层，减压蒸馏得到浸膏b；(3) 正相色谱法分离：将所述浸膏b 用硅胶柱层析分离，用体积比为1:0，9:1，7:1，4:1，2:1，1:1和0:1的石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱得到组分A
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E；(4) 制备HPLC纯化：将组分B经制备HPLC分离纯化，即得化合物1、化合物2和化合物3。6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文星，
申请(专利权)人：云南民族大学，
类型：发明
国别省市：