间充质干细胞及其培养制造技术

提供了增强的间充质干细胞(eMSC)的体外群体。还提供了包括eMSC群体的药物组合物以及培养MSC以产生eMSC群体的方法以及所述群体和组合物的用途。组合物的用途。组合物的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】间充质干细胞及其培养
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年10月26日提交的美国临时专利申请号63/105,412和2021年8月1日提交的美国临时专利申请号63/228,112的优先权权益，这些申请的内容通过引用全部并入本文中。


[0003]本专利技术属于间充质干细胞以及干细胞培养的领域。

技术介绍

[0004]MSC是能够自我复制的多潜能祖细胞，并且是骨髓干细胞库的重要成员。这些细胞被描述为非造血基质细胞，并且其经典作用是支持造血和HSC移植的过程，并产生中胚层来源的细胞，比如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。MSC是已知的成人干细胞之一，并且它们在各种治疗方式和各种病症/疾病中的应用目前是研究的主要领域。
[0005]MSC可以通过标准的、众所周知的方案从各种组织中分离出来，包括骨髓、脂肪、牙髓、胎盘和脐带。可以将收获的MSC直接施用至患者，或者可以在其施用前进行培养以增加其产量。此外，MSC不会引起免疫反应，并且因此可以异体施用至患者。为了满足对大规模生产MSC的日益增长的需求，正在不断开发这些细胞的体外扩增技术和培养基。非常需要一种扩增收获的MSC的方法，这种方法还能增强MSC，并使其成为优异的治疗药物。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了增强的间充质干细胞(eMSC)的体外群体，以及包括eMSC的药物组合物和使用其和培养MSC以产生其的方法。
[0007]根据第一方面，提供了一种增强的间充质干细胞(eMSC)的体外群体，其包括选自下列的至少一种蛋白质的调节表达：PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
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4、FGF
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7、GH、HB
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EGF、HGF、IGFBP
‑
1、胰岛素、NGFR、NT
‑
3、NT
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4、PIGF、SCF、TGF
‑
α、TGF
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β3、VEGFR2、VEGFR3、AR、BMP
‑
4、GDF
‑
15、GDNF、HGF、IGFBP
‑
2、IGFBP
‑
3、IGFBP
‑
4、IGFBP
‑
6、IGF
‑
1、VEGF和VEGF
‑
D。
[0008]根据另一方面，提供了一种eMSC的体外群体，其包括表达选自下列的至少一种蛋白质的第一亚群：PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
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4、FGF
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7、GH、HB
‑
EGF、HGF、IGFBP
‑
1、胰岛素、NGFR、NT
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3、NT
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4、PIGF、SCF、TGF
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α、TGF
‑
β3、VEGFR2、VEGFR3、AR、BMP
‑
4、GDF
‑
15、GDNF、HGF、IGFBP
‑
2、IGFBP
‑
3、IGFBP
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4、IGFBP
‑
6、IGF
‑
1、VEGF和VEGF
‑
D，其中第一亚群占体外群体的至少10％。
[0009]根据另一方面，提供了一种eMSC的体外群体，其包括选自下列的蛋白质的调节表面表达：NTBA、SSEA
‑
5、NPC(57D2)、MUC
‑
13、CD206、Notch1、Notch4、Notch3、NKp80、CD207、CD132、Jagged 2、GPR
‑
56、CD66、DR3、CD85j、CD183、CD85h、CD319、GPR
‑
19、CD24、HVEM、EGF
‑
R、CD309、CD314、BTLA和CD368。
[0010]根据另一方面，提供了一种eMSC的体外群体，其不含选自下列的至少一种蛋白质的表面表达：CD271、SSEA
‑
4、SSEA
‑
3、CD133、CD106、CD146、CD54、CD58、CD62L和CD9。
[0011]根据另一方面，提供了一种包括至少第一亚群的eMSC的体外群体，其中第一亚群的细胞均表达选自下列的表面蛋白：NTBA、SSEA
‑
5、NPC(57D2)、MUC
‑
13、CD206、Notch1、Notch4、Notch3、NKp80、CD207、CD132、Jagged 2、GPR
‑
56、CD66、DR3、CD85j、CD183、CD85h、CD319、GPR
‑
19、CD24、HVEM、EGF
‑
R、CD309、CD314、BTLA和CD368，并且其中第一亚群占eMSC群体的至少30％。
[0012]根据一些实施方式，群体的特征在于增强的促神经原性能力、增强的免疫抑制、增强的免疫调节、增强的抗炎能力、增强的促血管生成能力、增强的神经保护、增强的抗凋亡能力、增强的髓鞘生成能力、增强的抗纤维化能力、增强的少突胶质细胞支持、增强的轴突支持、增强的神经元分化或其组合。
[0013]根据一些实施方式，调节表达是增强的表达，并且其中群体包括至少2种蛋白质的增强表达。
[0014]根据一些实施方式，蛋白质选自PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
‑
4、FGF
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7、GH、HB
‑
EGF、HGF、IGFBP
‑
1、胰岛素、NGFR、NT
‑
3、NT
‑
4、PIGF、SCF、TGF
‑
α、TGF
‑
β3、VEGFR2和VEGFR3。
[0015]根据一些实施方式，调节表达是与在标准方案下体外培养的MSC相比。
[0016]根据一些实施方式，调节表达是增强的表达，并且包括高于预定阈值的表达。
[0017]根据一些实施方式，表达是蛋白质分泌。
[0018]根据一些实施方式，体外群体包括至少1
×
10^7个MSC。
[0019]根据一些实施方式，MSC是人MSC。
[0020]根据一些实施方式，MSC是骨髓衍生的MSC。
[0021]根据一些实施方式，体外群体包括至少90％的MSC。
[0022]根据一些实施方式本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种增强的间充质干细胞(eMSC)的体外群体，其包括选自下列的至少一种蛋白质的调节表达：PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
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4、FGF
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7、GH、HB
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EGF、HGF、IGFBP
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1、胰岛素、NGFR、NT
‑
3、NT
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4、PIGF、SCF、TGF
‑
α、TGF
‑
β3、VEGFR2、VEGFR3、AR、BMP
‑
4、GDF
‑
15、GDNF、HGF、IGFBP
‑
2、IGFBP
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3、IGFBP
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4、IGFBP
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6、IGF
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1、VEGF和VEGF
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D。2.一种eMSC的体外群体，其包括表达选自下列的至少一种蛋白质的第一亚群：PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
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4、FGF
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7、GH、HB
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EGF、HGF、IGFBP
‑
1、胰岛素、NGFR、NT
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3、NT
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4、PIGF、SCF、TGF
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α、TGF
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β3、VEGFR2、VEGFR3、AR、BMP
‑
4、GDF
‑
15、GDNF、HGF、IGFBP
‑
2、IGFBP
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3、IGFBP
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4、IGFBP
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6、IGF
‑
1、VEGF和VEGF
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D，其中所述第一亚群占所述体外群体的至少10％。3.一种eMSC的体外群体，其包括选自下列的蛋白质的调节表面表达：NTBA、SSEA
‑
5、NPC(57D2)、MUC
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13、CD206、Notch1、Notch4、Notch3、NKp80、CD207、CD132、Jagged2、GPR
‑
56、CD66、DR3、CD85j、CD183、CD85h、CD319、GPR
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19、CD24、HVEM、EGF
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R、CD309、CD314、BTLA和CD368。4.一种eMSC的体外群体，其不含选自下列的至少一种蛋白质的表面表达：CD271、SSEA
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4、SSEA
‑
3、CD133、CD106、CD146、CD54、CD58、CD62L和CD9。5.一种包括至少第一亚群的eMSC的体外群体，其中所述第一亚群的细胞均表达选自下列的表面蛋白：NTBA、SSEA
‑
5、NPC(57D2)、MUC
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13、CD206、Notch1、Notch4、Notch3、NKp80、CD207、CD132、Jagged 2、GPR
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56、CD66、DR3、CD85j、CD183、CD85h、CD319、GPR
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19、CD24、HVEM、EGF
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R、CD309、CD314、BTLA和CD368，并且其中所述第一亚群占所述eMSC群体的至少30％。6.根据权利要求1至5中任一项所述的体外群体，其中所述群体的特征在于增强的促神经原性能力、增强的免疫抑制、增强的免疫调节、增强的抗炎能力、增强的促血管生成能力、增强的神经保护、增强的抗凋亡能力、增强的髓鞘生成能力、增强的抗纤维化能力、增强的少突胶质细胞支持、增强的轴突支持、增强的神经元分化或其组合。7.根据权利要求1或3所述的体外群体，其中所述调节表达是增强的表达，并且其中所述群体包括至少2种蛋白质的增强表达。8.根据权利要求1至2和6至7中任一项所述的体外群体，其中所述蛋白质选自PDGF、BDNF、β
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NGF、BMP
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7、CNTF、EG
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VEGF、FGF
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4、FGF
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7、GH、HB
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EGF、HGF、IGFBP
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1、胰岛素、NGFR、NT
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3、NT
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4、PIGF、SCF、TGF
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α、TGF
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β3、VEGFR2和VEGFR3。9.根据权利要求1、3和6至8中任一项所述的体外群体，其中所述调节表达是与在标准方案下体外培养的MSC相比。10.根据权利要求1、3和6至9中任一项所述的体外群体，其中所述调节表达是增强的表达，并且包括高于预定阈值的表达。11.根据权利要求1至10中任一项所述的体外群体，其中所述表达是蛋白质分泌。12.根据权利要求1至11中任一项所述的体外群体，其包括至少1
×
10^7个MSC。13.根据权利要求1至12中任一项所述的体外群体，其中所述MSC是人MSC。14.根据权利要求1至13中任一项所述的体外群体，其中所述MSC是骨髓衍生的MSC。15.根据权利要求1至14中任一项所述的体外群体，包括至少90％的MSC。16.根据权利要求5至15中任一项所述的体外群体，其中所述第一亚群包括：
a.至少85％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是SSEA
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5；b.至少80％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是NPC；c.至少75％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是MUC
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13；d.至少70％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD206；e.至少70％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是Notch1；f.至少70％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是Notch 4；g.至少65％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是Notch 3；h.至少60％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是NTBA；i.至少55％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是NKp80；j.至少55％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD207；k.至少50％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD132；l.至少45％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是Jagged
‑
2；m.至少45％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是GPR
‑
56；n.至少45％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD66；o.至少40％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是DR3；p.至少40％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD85j；q.至少40％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD183；r.至少35％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD85h；s.至少35％的所述eMSC，并且所述表面蛋白是CD319；t.至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：I，
申请(专利权)人：纽罗吉尼斯公司，
类型：发明
国别省市：