一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法技术

本发明专利技术提供了一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，涉及肉桂精油技术领域，包括以下步骤：S1：取肉桂粉碎，进行超临界CO2循环萃取，放油，计算得油率；S2：设置单因素实验，控制其他因素不变，以萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量、分离釜压力为单因素，考察各因素对得油率影响；本发明专利技术通过研究肉桂精油超临界CO2萃取法的最佳提取工艺参数、体外抗氧化活性、抑菌活性，为肉桂精油的加工生产和合理利用提供理论基础，有效提高的提取得率和减少提取时间，增加超临界CO2萃取法提取的科学性、合理性，以提高人们的接受程度，为肉桂精油的提取、综合利用提供参考。综合利用提供参考。综合利用提供参考。

【技术实现步骤摘要】
一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法


[0001]本专利技术涉及肉桂精油
，尤其涉及一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法。

技术介绍

[0002]肉桂，也叫桂皮，属于樟科樟属，分为东兴桂和西江桂。罗定肉桂是西江桂的一种，产于广东省罗定市，肉桂是我国卫生部公布的药食兼用植物材料，既能食用，又是名贵中药材，肉桂精油是指从肉桂干燥皮、枝、叶提取得到的挥发油，呈黄色或黄棕色的澄清液体，其主要成分是肉桂醛(约75％)，另外还有桂醇、香兰素、乙酸桂酯、丁香酚、甲基丁香酚和二氢桂酸等多种有机化合物，有肉桂的特异香气，味辛，研究发现，肉桂精油具有利尿、利胆、镇痛、抗菌、抗肿瘤、抗糖尿病、改善肠道免疫功能等多重功效，是食品工业、医药工业及化工工业的主要原料，在生活中多用作香料，多用于烹饪，在食品工业中常用于罐头、糖果、饮料等食品，在水果肉类防腐方面的研究运用也在逐年增加，因此，肉桂精油在保健食品、新型药品研发，生鲜防腐上都有巨大的应用前景，尤其是近年来对肉桂精油防腐可降解生物膜的研究十分热门，肉桂精油是一种绿色环保、无刺激性的植物添加剂，用途广泛，具有极大的研究利用价值，肉桂精油的提取方法主要有水蒸气蒸馏法、超声波辅助萃取法、超临界CO2萃取法等，但在企业生产中，肉桂精油的提取方式以传统的水蒸气蒸馏法为主，但该方法提取得到的挥发油质地较差，存在含水分高、纯度低、得率低、提取时间长、耗能高等缺点，其他方法暂未用于实际生产，若要扩大肉桂挥发油的利用价值和范围、增加经济收益，在纯度和提取成本方面需要进一步优化；r/>[0003]肉桂精油功效众多，但市面所售的精油以水蒸气蒸馏法提取为主，其他方法提取所得的肉桂精油接受程度低，比如，缺乏对超临界CO2萃取法提取的科学性、合理性研究验证，缺少肉桂精油的提取、综合利用的参考数据，难以有效提高的提取得率和减少提取时间，因此，本专利技术提出一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法以解决现有技术中存在的问题。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提出一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，该肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法通过研究肉桂精油超临界CO2萃取法的最佳提取工艺参数、体外抗氧化活性、抑菌活性，为肉桂精油的加工生产和合理利用提供理论基础。
[0005]为实现本专利技术的目的，本专利技术通过以下技术方案实现：一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，包括以下步骤：
[0006]S1：取肉桂粉碎，进行超临界CO2循环萃取，放油，计算得油率；
[0007]S2：设置单因素实验，控制其他因素不变，以萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量、分离釜压力为单因素，考察各因素对得油率影响；
[0008]S3：在单因素实验结果的基础上，筛选出A
‑
萃取压力、B
‑
萃取温度、C
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CO2流量三个显著的因素为影响因素，以得油率为响应值，设计三因素三水平响应面优化实验，获取最佳提取工艺参数；
[0009]S4：用肉桂精油和活性炭获取上清液，加入中性乙醚
‑‑
乙醇混合溶液、酚酞指示剂，用KOH溶液测定，记下消耗的毫升数，计算油脂酸价；
[0010]S5：进行抗氧化活性测定，包括羟自由基清除能力实验、DPPH自由基清除能力实验和超氧阴离子自由基(
·
O2‑
)清除实验；
[0011]S6：进行抑菌活性测定，包括抑菌圈的测定、最小抑菌浓度MIC的测定和最小杀菌浓度MBC的测定。
[0012]进一步改进在于：所述S1包括：
[0013]S11：取肉桂粉碎，过40目筛，置于50℃的烘箱中干燥3h；
[0014]S12：称取肉桂粉倒入萃取釜中，连接CO2钢气瓶，打开总电源，分别设好各釜的温度；
[0015]S13：缓慢打开阀门，让CO2进入超临界CO2萃取设备，调试各个釜中的压力，使超临界CO2循环萃取，等时间间隔放一次油，得油率按照以下公式计算：
[0016][0017]式中：
[0018]m
‑
肉桂精油的质量，g；
[0019]M
‑
肉桂的质量，g。
[0020]进一步改进在于：所述S4包括：
[0021]S41：取肉桂精油，加入1％的活性炭，搅拌静置并离心，取上清液即为脱色肉桂精油；
[0022]S42：称取均匀精油于瓶中，加入中性乙醚
‑‑
乙醇混合溶液，摇动使体系均匀；
[0023]S43：加若干滴酚酞指示剂，用0.05mol/L KOH溶液滴定至出现微红色且30s不褪色，记下消耗的碱液毫升数V；
[0024]S44：油脂酸价X(mg KOHg)按下式计算:
[0025][0026]式中：
[0027]V
‑
滴定消耗的氢氧化钾溶液体积，mL；
[0028]C
‑
氢氧化钾溶液的浓度，mol/L；
[0029]56.11
‑
氢氧化钾溶液的摩尔质量，g/moL。
[0030]进一步改进在于：所述S5中，羟自由基清除能力实验包括：
[0031]S511：配制10mmol/L的FeSO4溶液、10mmol/LH2O2溶液、10mmol/L水杨酸溶液和不同浓度的肉桂精油样品溶液；
[0032]S512：移取不同样品溶液于比色管中，每支比色管中分别加入FeSO4溶液、H2O2溶液，震荡混匀后静置，加水杨酸溶液，在37℃恒温水中反应，在510nm的波长下测定各管的吸光值；
[0033]S513：以维生素C为阳性对照，25％乙醇为参比，每组实验做三次平行，得到结果按照以下公式计算：
[0034][0035]其中：
[0036]A1为肉桂精油溶液清除羟自由基后的吸光值；
[0037]A2为肉桂精油溶液自身吸光值；
[0038]A3为空白对照组的吸光值。
[0039]进一步改进在于：所述S5中，DPPH自由基清除能力实验包括：
[0040]S521：配制0.05mg/mL的DPPH溶液和不同浓度的肉桂精油样品溶液，分别移取样品溶液于不同试管中；
[0041]S522：向每支试管加入DPPH溶液，用无水乙醇做空白对照，震荡摇匀后室温避光保存；
[0042]S523：以去无水乙醇为参比，维生素C为阳性对照，每组实验平行三次，在517nm波长处测吸光值，得到结果按照以下公式计算：
[0043][0044]其中：
[0045]A
i
为肉桂精油溶液清除DPPH自由基后的吸光值；
[0046]A
j
为肉桂精油溶液自身吸光值；
[0047]A
k
为空白对照组的吸光值。
[0048]进一步改进在于：所述S5中，超氧阴离子自由基(
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取肉桂粉碎，进行超临界CO2循环萃取，放油，计算得油率；S2：设置单因素实验，控制其他因素不变，以萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量、分离釜压力为单因素，考察各因素对得油率影响；S3：在单因素实验结果的基础上，筛选出三个显著的因素为影响因素，以得油率为响应值，设计三因素三水平响应面优化实验，获取最佳提取工艺参数；S4：用肉桂精油和活性炭获取上清液，加入中性乙醚
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乙醇混合溶液、酚酞指示剂，用KOH溶液测定，记下消耗的毫升数，计算油脂酸价；S5：进行抗氧化活性测定，包括羟自由基清除能力实验、DPPH自由基清除能力实验和超氧阴离子自由基(
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O2‑
)清除实验；S6：进行抑菌活性测定，包括抑菌圈的测定、最小抑菌浓度MIC的测定和最小杀菌浓度MBC的测定。2.根据权利要求1所述的一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，其特征在于：所述S1包括：S11：取肉桂粉碎，过40目筛，置于50℃的烘箱中干燥3h；S12：称取肉桂粉倒入萃取釜中，连接CO2钢气瓶，打开总电源，分别设好各釜的温度；S13：缓慢打开阀门，让CO2进入超临界CO2萃取设备，调试各个釜中的压力，使超临界CO2循环萃取，等时间间隔放一次油，得油率按照以下公式计算：式中：m
‑
肉桂精油的质量，g；M
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肉桂的质量，g。3.根据权利要求1所述的一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，其特征在于：所述S4包括：S41：取肉桂精油，加入1％的活性炭，搅拌静置并离心，取上清液即为脱色肉桂精油；S42：称取均匀精油于瓶中，加入中性乙醚
‑‑
乙醇混合溶液，摇动使体系均匀；S43：加若干滴酚酞指示剂，用0.05mol/L KOH溶液滴定至出现微红色且30s不褪色，记下消耗的碱液毫升数V；S44：油脂酸价X(mg KOHg)按下式计算:式中：V
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滴定消耗的氢氧化钾溶液体积，mL；C
‑
氢氧化钾溶液的浓度，mol/L；56.11
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氢氧化钾溶液的摩尔质量，g/moL。4.根据权利要求1所述的一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，其特征在于：所述S5中，羟自由基清除能力实验包括：
S511：配制10mmol/L的FeSO4溶液、10mmol/LH2O2溶液、10mmol/L水杨酸溶液和不同浓度的肉桂精油样品溶液；S512：移取不同样品溶液于比色管中，每支比色管中分别加入FeSO4溶液、H2O2溶液，震荡混匀后静置，加水杨酸溶液，在37℃恒温水中反应，在510nm的波长下测定各管的吸光值；S513：以维生素C为阳性对照，25％乙醇为参比，每组实验做三次平行，得到结果按照以下公式计算：其中：A1为肉桂精油溶液清除羟自由基后的吸光值；A2为肉桂精油溶液自身吸光值；A3为空白对照组的吸光值。5.根据权利要求4所述的一种肉桂精油超临界萃取及体外生理活性研究的方法，其特征在于：所述S5中，DPPH自由基清除能力实验包括：S521：配制0.05mg/mL的DPPH溶液和不同浓度的肉桂精油样品溶液，分别移取样品溶液于不同试管中；S522：向每支试管加入DPPH溶液，用无水乙醇做空白对照，震荡摇匀后室温避光保存；S523：以去无水...

【专利技术属性】
技术研发人员：周春晖，李展翔，何柏文，龚丽妍，何芸谦，李嘉欣，莫栩宾，秦佳俊，
申请(专利权)人：广东轻工职业技术学院，
类型：发明
国别省市：