【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】NO:14的氨基酸序列，其中hNeuroD1编码序列和hDlx2编码序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中hNeuroD1编码序列和hDlx2编码序列可操作地连接到调控元件，该调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。
[0011]在一方面，本公开提供并包括一种腺相关病毒(AAV)载体，其包含编码神经源性分化因子1(NeuroD1)蛋白的NeuroD1核酸编码序列和编码无远端同源框2(Dlx2)蛋白的Dlx2核酸编码序列，其中NeuroD1编码序列和Dlx2编码序列...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种腺相关病毒(AAV)载体，其包含：人神经源性分化因子1(hNeuroD1)序列，所述hNeuroD1序列包含SEQ ID NO:6的核酸序列，和人无远端同源框2(hDlx2)序列，所述hDlx2序列包含SEQ ID NO:13的核酸序列，其中所述hNeuroD1序列和所述hDlx2序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1序列和所述hDlx2序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。2.一种腺相关病毒(AAV)载体，其包含：编码人神经源性分化因子1(hNeuroD1)蛋白的核酸序列，所述hNeuroD1蛋白包含SEQ ID NO:10的氨基酸编码序列，和编码人无远端同源框2(hDlx2)蛋白的核酸编码序列，所述hDlx2蛋白包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列，其中所述hNeuroD1编码序列和所述hDlx2编码序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1编码序列和所述hDlx2编码序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。3.一种腺相关病毒(AAV)载体，其包含编码神经源性分化因子1(NeuroD1)蛋白的NeuroD1核酸编码序列和编码无远端同源框2(Dlx2)蛋白的Dlx2核酸编码序列，其中所述NeuroD1编码序列和所述Dlx2编码序列被接头序列隔开，其中所述NeuroD1编码序列和所述Dlx2编码序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：
(a)神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)增强子；(c)嵌合内含子；(d)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)多聚腺苷酸化信号序列。4.一种用于将人的神经胶质细胞转化为功能性神经元的包含腺相关病毒(AAV)载体的组合物，其中所述AAV载体包含：人神经源性分化因子1(hNeuroD1)序列，所述hNeuroD1序列具有SEQ ID NO:6的核酸序列，和人无远端同源框2(hDlx2)序列，所述hDlx2序列具有SEQ ID NO:13的核酸序列，其中所述hNeuroD1序列和所述hDlx2序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1序列和hDlx2序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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1α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。5.一种用于将人的神经胶质细胞转化为功能性神经元的包含腺相关病毒(AAV)载体的组合物，其中所述AAV载体包含：编码人神经源性分化因子1(hNeuroD1)蛋白的核酸编码序列，所述hNeuroD1蛋白包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列，和编码人无远端同源框2(hDlx2)蛋白的核酸编码序列，所述hDlx2蛋白包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列，其中所述hNeuroD1编码序列和所述hDlx2编码序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1编码序列和所述hDlx2编码序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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1α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的
核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。6.一种用于治疗有此需要的受试者的包含腺相关病毒(AAV)载体的组合物，其中所述AAV载体包含神经源性分化因子1(NeuroD1)序列和无远端同源框2(Dlx2)序列，其中所述NeuroD1序列和所述Dlx2序列被接头序列隔开，其中所述NeuroD1序列和Dlx2序列可操作地连接到表达控制元件，所述表达控制元件包含：(a)神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)增强子；(c)嵌合内含子；(d)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)多聚腺苷酸化信号。7.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体选自由AAV血清型2、AAV血清型5和AAV血清型9组成的组。8.根据权利要求7所述的AAV载体或组合物，其中所述AAV载体是AAV血清型2。9.根据权利要求7所述的AAV载体或组合物，其中所述AAV载体是AAV血清型5。10.根据权利要求7所述的AAV载体或组合物，其中所述AAV载体是AAV血清型9。11.根据权利要求4或5所述的组合物，其中所述神经胶质细胞是反应性星形胶质细胞。12.根据权利要求4或5所述的组合物，其中所述功能性神经元选自由谷氨酸能神经元、GABA能神经元、多巴胺能神经元、胆碱能神经元、血清素能神经元、肾上腺素能神经元、运动神经元和肽能神经元组成的组。13.根据权利要求4或5所述的组合物，其中所述人患有神经系统病症。14.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述NeuroD1是人NeuroD1(hNeuroD1)。15.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述Dlx2是人Dlx2(hDlx2)。16.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述NeuroD1选自由黑猩猩NeuroD1、倭黑猩猩NeuroD1、红毛猩猩NeuroD1、大猩猩NeuroD1、猕猴NeuroD1、狨猴NeuroD1、卷尾猴NeuroD1、狒狒NeuroD1、长臂猿NeuroD1和狐猴NeuroD1组成的组。17.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述Dlx2选自由黑猩猩Dlx2、倭黑猩猩Dlx2、红毛猩猩Dlx2、大猩猩Dlx2、猕猴Dlx2、狨猴Dlx2、卷尾猴Dlx2、狒狒Dlx2、长臂猿Dlx2和狐猴Dlx2组成的组。18.根据权利要求14所述的AAV载体或组合物，其中所述hNeuroD1包含编码与以下至少80％相同或相似的氨基酸序列的核酸序列：SEQ ID NO:10。19.根据权利要求15所述的AAV载体或组合物，其中所述hDlx2包含编码与以下至少80％相同或相似的氨基酸序列的核酸序列：SEQ ID NO:14。20.根据权利要求14所述的AAV载体或组合物，其中所述hNeuroD1编码序列包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:6，或其互补序列。21.根据权利要求15所述的AAV载体或组合物，所述hDlx2编码序列包含与以下至少
80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:13，或其互补序列。22.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述接头选自由P2A和T2A组成的组。23.根据权利要求22所述的AAV载体或组合物，其中所述接头是所述P2A。24.根据权利要求22所述的AAV载体或组合物，其中所述接头是所述T2A25.根据权利要求22所述的AAV载体或组合物，其中所述P2A接头包含与选自由以下项组成的组的序列至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:15和18，或其互补序列。26.根据权利要求22所述的AAV载体或组合物，其中所述T2A接头包含与选自由以下项组成的组的序列至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:16和19，或其互补序列。27.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述GFAP启动子是人GFAP(hGFAP)启动子。28.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述GFAP启动子选自由黑猩猩GFAP启动子、倭黑猩猩GFAP启动子、红毛猩猩GFAP启动子、大猩猩GFAP启动子、猕猴GFAP启动子、狨猴GFAP启动子、卷尾猴GFAP启动子、狒狒GFAP启动子、长臂猿GFAP启动子和狐猴GFAP启动子组成的组。29.根据前述权利要求中任一项所述的AAV载体或组合物，其中所述IRES序列包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:3，或其互补序列。30.根据权利要求27所述的AAV载体或组合物，其中所述hGFAP启动子包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:4，或其互补序列。31.根据权利要求27所述的AAV载体或组合物，其中所述hGFAP启动子包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:12，或其互补序列。32.根据权利要求27所述的AAV载体或组合物，其中所述hGFAP启动子包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:26，或其互补序列。33.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述增强子选自由来自人延伸因子
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α)启动子的增强子和巨细胞病毒(CMV)增强子组成的组34.根据权利要求33所述的AAV载体或组合物，其中所述EF1
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α包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:2，或其互补序列。35.根据权利要求33所述的AAV载体或组合物，其中所述CMV增强子包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:11，或其互补序列。36.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述嵌合内含子包含与选自由以下项组成的组的核酸至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:5和27，或其互补序列。37.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述WPRE包含与选自由以下项组成的组的核酸至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:7和29，或其互补序列。38.据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述多聚腺苷酸化信号选自由SV40多聚腺苷酸化信号、hGH多聚腺苷酸化信号和bGH多聚腺苷酸化信号组成的组。39.根据权利要求38所述的AAV载体或组合物，其中所述SV40多聚腺苷酸化信号包含与
以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:8，或其互补序列。40.根据权利要求38所述的AAV载体或组合物，其中所述hGH多聚腺苷酸化信号包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:17，或其互补序列。41.根据权利要求38所述的AAV载体或组合物，其中所述bGH多聚腺苷酸化信号包含与以下至少80％相同的核酸序列：SEQ ID NO:30，或其互补序列。42.根据权利要求3所述的AAV载体或根据权利要求6所述的组合物，其中所述AAV载体进一步包含编码AAV蛋白序列的核酸序列。43.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体包含AAV血清型2反向末端重复序列(ITR)。44.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体包含AAV血清型5反向末端重复序列(ITR)。45.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体包含AAV血清型9反向末端重复序列(ITR)。46.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体包含至少一个与以下至少80％相同的ITR核酸序列：SEQ ID NO:1。47.根据权利要求1至3中任一项所述的AAV载体或根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其中所述AAV载体包含至少一个与以下至少80％相同的ITR核酸序列：SEQ ID NO:9。48.根据权利要求6所述的组合物，其中所述有此需要的受试者是哺乳动物。49.根据权利要求48所述的组合物，其中所述哺乳动物是人。50.根据权利要求48所述的组合物，其中所述哺乳动物是非人灵长类动物。51.根据权利要求6所述的组合物，其中所述有此需要的受试者患有神经系统病症。52.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症包括中枢神经系统(CNS)或周围神经系统的损伤。53.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症包括CNS的损伤。54.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症选自由以下项组成的组：阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、亨廷顿病、癫痫、物理性损伤、卒中、脑动脉瘤、外伤性脑损伤、脑震荡、肿瘤、炎症、感染、共济失调、脑萎缩、脊髓萎缩、多发性硬化症、外伤性脊髓损伤、缺血性或出血性脊髓病(脊髓病)、全脑缺血、缺氧缺血性脑病、栓塞、纤维软骨栓塞性脊髓病、血栓形成、肾病、慢性炎性疾病、脑膜炎、和脑静脉窦血栓形成。55.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症是阿尔茨海默病。56.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症是帕金森病。57.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症是ALS。58.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症是亨廷顿病。59.根据权利要求13或51所述的组合物，其中所述神经系统病症是卒中。60.根据权利要求59所述的组合物，其中所述卒中是缺血性卒中。61.根据权利要求59所述的组合物，其中所述卒中是出血性卒中。62.根据权利要求51所述的组合物，其中所述组合物能够将至少一种神经胶质细胞转
化为神经元。63.根据权利要求62所述的组合物，其中所述神经胶质细胞选自由星形胶质细胞和NG2细胞组成的组。64.根据权利要求62所述的组合物，其中所述神经胶质细胞是星形胶质细胞。65.根据权利要求62所述的组合物，其中所述星形胶质细胞是反应性星形胶质细胞。66.根据权利要求62所述的组合物，其中所述神经胶质细胞是GFAP阳性的。67.根据权利要求62所述的组合物，其中所述神经元是功能性神经元。68.根据权利要求62所述的组合物，其中所述功能性神经元选自由谷氨酸能神经元、GABA能神经元、多巴胺能神经元、胆碱能神经元、血清素能神经元、肾上腺素能神经元、运动神经元和肽能神经元组成的组。69.根据权利要求68所述的组合物，其中所述功能性神经元是谷氨酸能神经元。70.根据权利要求6所述的组合物，其中所述组合物被配制成递送给有此需要的受试者。71.根据权利要求70所述的组合物，其中所述组合物被配制以用于局部递送。72.根据权利要求70所述的组合物，其中所述组合物被配制以用于全身递送。73.根据权利要求70至72中任一项所述的组合物，其中所述组合物被配制以用于经由腹膜内、肌肉内、静脉内、鞘内、大脑内、颅内、脑的侧脑室内、小脑延髓池内、玻璃体内、视网膜下内、脑实质内、鼻内或口服施用进行的递送。74.一种方法，其包括将根据权利要求6所述的组合物递送给所述有此需要的受试者。75.根据权利要求74所述的方法，其中所述组合物被配制成递送给有此需要的受试者。76.根据权利要求74所述的方法，其中所述递送包括局部施用。77.根据权利要求74所述的方法，其中所述递送包括全身施用。78.根据权利要求74至77中任一项所述的方法，其中所述递送包括腹膜内、肌肉内、静脉内、鞘内、大脑内、颅内、脑的侧脑室内、小脑延髓池内、玻璃体内、视网膜下内、脑实质内、鼻内或口服施用。79.一种将活人脑中的反应性星形胶质细胞转化为功能性神经元的方法，其包括：将腺相关病毒(AAV)注射到有此需要的受试者中，其中所述AAV包含DNA载体构建体，所述DNA载体构建体包含：人神经源性分化因子1(hNeuroD1)序列，所述hNeuroD1序列包含SEQ ID NO:6的核酸序列，和人无远端同源框2(hDlx2)序列，所述hDlx2序列包含SEQ ID NO:13的核酸序列，其中所述hNeuroD1序列和所述hDlx2序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1序列和所述hDlx2序列可操作地连接到调控元件，所述调控元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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1α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；
(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。80.一种将活人脑中的反应性星形胶质细胞转化为功能性神经元的方法，其包括：将腺相关病毒(AAV)注射到有此需要的受试者中，其中所述AAV包含DNA载体构建体，所述DNA载体构建体包含：编码人神经源性分化因子1(hNeuroD1)蛋白的核酸编码序列，所述hNeuroD1蛋白包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列，和编码人无远端同源框2(hDlx2)蛋白的核酸编码序列，所述hDlx2蛋白包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列，其中所述hNeuroD1编码序列和所述hDlx2编码序列被以下隔开：(i)包含选自由SEQ ID NO:15和18组成的组的核酸序列的P2A接头，(ii)包含选自由SEQ ID NO:16和19组成的组的核酸序列的T2A接头，或(iii)包含SEQ ID NO:3的脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(IRES)序列，其中所述hNeuroD1编码序列和hDlx2编码序列可操作地连接到表达控制元件，所述表达控制元件包含：(a)包含选自由SEQ ID NO:4、12和26组成的组的核酸序列的人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)包含SEQ ID NO:2的核酸序列的来自人延伸因子
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1α)启动子的增强子或包含SEQ ID NO:11的核酸序列的巨细胞病毒(CMV)增强子；(c)包含选自由SEQ ID NO:5和27组成的组的核酸序列的嵌合内含子；(d)包含选自由SEQ ID NO:7和29组成的组的核酸序列的土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)包含SEQ ID NO:8的核酸序列的SV40多聚腺苷酸化信号序列、包含SEQ ID NO:17的核酸序列的hGH多聚腺苷酸化序列，或包含SEQ ID NO:30的核酸序列的bGH多聚腺苷酸化序列。81.一种将有此需要的受试者的神经胶质细胞转化为神经元的方法，其包括：将腺相关病毒(AAV)递送至所述有此需要的受试者，其中所述AAV包含DNA载体构建体，所述DNA载体构建体包含神经源性分化因子1(NeuroD1)序列和无远端同源框2(Dlx2)序列，其中所述NeuroD1序列和Dlx2序列被接头序列隔开，其中所述NeuroD1序列和Dlx2序列可操作地连接到表达控制元件，所述表达控制元件包含：(a)神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)增强子；(c)嵌合内含子；(d)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)和多聚腺苷酸化信号序列，其中所述AAV载体能够将所述有此需要的受试者的至少一种神经胶质细胞转化为神经元。82.一种治疗有此需要的受试者的神经系统病症的方法，其包括：将腺相关病毒(AAV)递送至所述受试者，其中给予所述有此需要的受试者的所述AAV包含DNA载体构建体，所述DNA载体构建体包含神经源性分化因子1(NeuroD1)序列和无远端同源框2(Dlx2)序列，其中
所述NeuroD1序列和Dlx2序列被接头序列隔开，其中所述NeuroD1序列和所述Dlx2序列可操作地连接到表达控制元件，所述表达控制元件包含：(a)神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子；(b)增强子；(c)嵌合内含子；(d)土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)；和(e)多聚腺苷酸化信号。83.根据权利要求79至82中任一项所述的方法，其中所述AAV选自由AAV血清型2、AAV血清型5和AAV血清型9组成的组。84.根据权利要求83所述的方法，其中所述AAV是AAV血清型2。85.根据权利要求83所述的方法，其中所...
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