一种具有抑制酪氨酸酶作用的蕨麻提取物制造技术

本发明专利技术涉及以鲜蕨麻为原料，采用冷冻干燥的方法将鲜蕨麻干燥，干燥后的蕨麻以75%乙醇采用渗漉法提取，渗漉液经低温回收乙醇、冷冻干燥，干燥物具有抑制酪氨酸酶的作用，可用于制备具有增白作用化妆品的原料。制备具有增白作用化妆品的原料。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抑制酪氨酸酶作用的蕨麻提取物
(二)说明书


[0001]本专利技术涉及一种从以鲜蕨麻为原料，采用冷冻干燥的方法干燥后经75％乙醇渗漉提取得到具有抑制酪氨酸酶作用的提取物。属于日用化工


技术介绍
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在人体，黑色素的量决定了皮肤的颜色。黑色素的产生主要受黑色素细胞中的酪氨酸酶(tyrosinase TY)的调节，过量的TY或其活性过高会导致黑色素过量蓄积，出现色素沉着过度性皮肤病，如雀斑、黄褐斑等。另外，酪氨酸酶的过度表达能导致果蔬、食物中的酚类化合物催化成醌而出现褐变反应。虾类的黑变病等均与TY过度表达有关。因此，发现作用较好的酪氨酸酶抑制剂具有较重要的意义。已有的研究表明，植物中的黄酮类成分和多酚类成分具有较好的抑制酪氨酸酶的作用。我们研究发现，蕨麻提取物有较好的抑制酪氨酸酶的作用，其抑制作用与对蕨麻的加工方法和提取工艺有明显的关系。
(三)
技术实现思路
：
本专利技术是通过以下技术方案获得的。1.将采挖的蔷薇科委陵菜属植物蕨麻Potentilla anserina L.的新鲜块根，除去须根，洗净，粉碎成粗颗粒(粒径2
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4mm)；2.将鲜蕨麻粗颗粒置于冷冻干燥机干燥箱中，降温至
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30℃～
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40℃，维持2小时
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4小时；期间将冷凝器降温至
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60℃～
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70℃。开始抽真空、干燥箱开始缓缓升温，温度升高到0℃控制在12小时
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16小时，继续升温至温度35℃～40℃，维持6
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8小时，即得。干蕨麻粗粉水分控制在5％以下，即得。3.制成的冻干蕨麻粗粉用75％乙醇渗漉法提取，其步骤为：冻干蕨麻粗粉加等量的75％乙醇，混匀，闷润30min，装渗漉筒，加入3倍量的75％乙醇，浸渍12小时后开始渗漉，渗漉速度为3～5ml/kg.min。接受8倍量的渗漉液，渗漉液低温回收乙醇，得浓缩液。3.将浓缩液置于冷冻干燥机干燥箱中，降温至
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30℃～
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40℃，维持2小时
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4小时；期间将冷凝器降温至
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60℃～
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70℃。开始抽真空、干燥箱开始缓缓升温，温度升高到0℃控制在12小时
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16小时，继续升温至温度35℃～40℃，维持6
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8小时，即得具有抑制酪氨酸酶作用的提取物。提取物的水分控制在5％以下。本专利技术具有以下优点本专利技术的冻干蕨麻提取物可以作为具有增白作用化妆品的原料和果蔬保鲜的原料。
(四)具体实施方式
下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受下述实施例的限制。实施例1冻干蕨麻水提取物比晒干蕨麻水提取物含有更多的活性成分。蕨麻含有皂苷类、黄酮类和多分类成分。越来越多的研究表明黄酮类成分和多酚类成分具有抑制酪氨酸酶的作用。为此，比较了冻干蕨麻与晒干蕨麻用水提取提取物中总黄酮的含量和总多酚的含量，具体方法如下：取两种干燥方法的蕨麻各100g，分别加75％乙醇回流提取，第一次加10倍量75％乙醇，回流2小时，第二次加8倍量75％乙醇，回流1小时，合并两次75％乙醇回流提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水定容至100ml，即得。按照2020年版中国药典槐花项下的方法，测定提取液中总黄酮的含量，结果见表1；按照食品总酚酸的测定方法，测定提取液中总酚酸的含量，结果见表1。表1冻干蕨麻与晒干蕨麻75％乙醇提取液中总黄酮、总多酚的含量组别总黄酮mg/g总多酚mg/g冻干蕨麻7.894.65晒干蕨麻4.622.02注：总黄酮含量是指每1g干蕨麻(不计算水分)中相当的芦丁的量；总多酚是指每1g干蕨麻(不计算水分)中相当的没食子酸的量由表1可以看出，冻干蕨麻中总黄酮和总酚酸的含量显著高于晒干蕨麻中的含量，此可能与两方面有关；一方面是因为冷冻干燥能够使鲜蕨麻细胞中水分结冰，体积增加，使细胞涨裂，有利于成分的提取；另一方面可能与总黄酮和总酚酸不稳定，冷冻干燥不能破坏其成分有关。实例2冻干蕨麻以75％乙醇用渗漉法提取比用加热回流法提取，总黄酮和总多酚的提取量更多。具体方法如下：取冻干蕨麻粗粉100g，2份。分别以75％乙醇采用回流法和渗漉法提取，回流法提取同实例1项下的方法。渗漉提取法为：冻干蕨麻粗粉100g，加入75％乙醇100ml，密闭闷润30min至润透，装渗漉筒，层层压实；按渗漉法的操作，加入75％乙醇300ml，浸渍12小时，开始渗漉，渗漉速度5ml/min.kg，收集渗漉液800ml，回收乙醇至无醇味，加水定容至100ml，同实例1项下，测定总黄酮和总多酚的量。结果见表2。表2渗漉法与加热回流法提取冻干蕨麻总黄酮、总多酚含量的比较提取方法总黄酮mg/g总多酚mg/g渗漉法10.968.89加热回流法7.824.18由表2可以看出，渗漉法提取由于受热时间短(只在减压回收乙醇时受热)，保留了更多的黄酮类成分和多酚类成分。实例3冻干蕨麻75％乙醇渗漉法提取物经冷冻干燥法干燥能较好的保留总黄酮和总多酚按上述方法制备各种提取液，减压浓缩，分别采用热风干燥(温度60℃～70℃)；冷冻干燥条件为权利2项下的条件。测定干燥物中总黄酮和总多酚的量，换算成单位蕨麻中的量，结果见表3。
表3不同提取方法、干燥方法蕨麻提取物中总黄酮、总多酚的量
提取方法煎煮、热风干燥法回流、热风干燥法渗漉、热风干燥法渗漉、冷冻干燥法总黄酮4.10mg/g5.13mg/g6.04mg/g10.89mg/g总多酚2.06mg/g2.86mg/g3.07mg/g8.61mg/g
表3表明渗漉法提取，冷冻干燥法干燥能较好的保留冻干蕨麻中总黄酮和总多酚类成分。实例4冻干蕨麻75％乙醇渗漉法提取物抑制酪氨酸酶的作用及其与其他另种提取方法提取物的比较。方法如下：溶液配制：蘑菇酪氨酸酶(上海aladdin公司)、L
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dopa和曲酸(南京奥多福尼生物科技有限公司)用0.05mol/LpH 6.8的磷酸盐缓冲溶液分别配制成1.43
×
10
‑5mol/L、4.8
×
10
‑3mol/L和4.1
×
10
‑3mol/L。蕨麻提取物溶液的配制：分别取三种提取干燥物，分别加入磷酸缓冲溶液溶解，配制成酶1ml相当于1g蕨麻的溶液，滤过，即得。测定原理：酪氨酸酶活性通过酪氨酸酶多巴速率氧化法测定。黑色素生成过程中，酪氨酸酶首先以单酚酶活性催化L
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酪氨酸氧化为L
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多巴，然后以二酚酶活性催化L
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多巴转化为多巴醌。多巴醌是一种有色的合成黑色素的中间体，在波长475nm处有强吸收，因此在475nm的波长处测定体系的吸光度，以确定其对酪氨酸酶活性。反应体系见表4。表4反应体系组成名称A1A2A3A4磷酸缓冲溶液/μl8016000酶/μl800800样品/μl008080L
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Dopa/μl80808080A1：未加样品而加酪氨酸酶的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.具有抑制酪氨酸酶作用的蕨麻提取物的制备方法。其特征通过以下步骤实现：（1）采挖鲜蕨麻块根，除去须根，洗净，粉碎成粗颗粒（粒径2
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4mm）；（2）将鲜蕨麻粗颗粒置于冷冻干燥机干燥箱中，降温至
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30℃～
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40℃，维持2小时
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4小时；期间将冷凝器降温至
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60℃～
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70℃。开始抽真空、干燥箱开始缓缓升温，温度升高到0℃控制在12小时
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16小时，继续升温至温度35℃～40℃，维持6
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8小时，即得。干蕨麻粗粉水分控制在5%以下，即得。2.根据权利1的要求，制成的冻干蕨麻粗粉用75%乙醇渗漉法提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪波，王若馨，
申请(专利权)人：济南三源药业有限公司，
类型：发明
国别省市：