一种盐析辅助/固相萃取-液相色谱-串联质谱测定网红减肥类食品中匹可硫酸钠的方法技术

本发明专利技术公开了一种盐析辅助/固相萃取

【技术实现步骤摘要】
一种盐析辅助/固相萃取
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液相色谱
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串联质谱测定网红减肥类食品中匹可硫酸钠的方法


[0001]本专利技术涉及食品检测领域，具体涉及一种盐析辅助/固相萃取
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液相色谱
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串联质谱测定网红减肥类食品中匹可硫酸钠的方法。

技术介绍

[0002]随着人们对瘦身的需求和美的追求越来越高，各种新兴减肥类食品受到年轻人群的追捧，成为畅销的网红食品。在巨大利益的驱使下，在各种宣称减肥类食品中非法添加缓泻类物质，达到加快代谢，快速瘦身的目的，带来了较大的食品安全隐患。匹可硫酸钠是一种局部作用的缓泻药物，又名4，4'
‑
(吡啶
‑2‑
基亚甲基)双苯基双硫酸酯钠盐，分子式为C
18
H
13
NNa2O8S2，分子量为481.41，具有明显的脱水，腹痛，呕吐等副作用，严重者危及生命，必须遵医嘱才能使用。匹可硫酸钠对人体具有润肠通便的药理作用，被非法添加在食品中达到减肥的目的。减肥类食品中非法添加匹可硫酸钠的事件近年来屡见不鲜，2020年全国首例在食品中非法添加匹可硫酸钠的案件，引发了社会各界对匹可硫酸钠非法添加情况的广泛关注。2021年，某公司将匹可硫酸钠添加入酵素食品，非法添加含量更是高达2603mg/kg和2708mg/kg。网红减肥类食品种类五花八门，鱼龙混杂，不法分子通过添加非法添加化学药物增强减肥功效，从而牟取巨额暴利，严重威胁到了消费者的生命健康安全。我国食品安全法明确禁止食品中添加任何非食用化学物质。为消除该食品安全隐患，打击匹可硫酸钠的非法添加行为，建立准确有效的相关检测方法尤为必要。
[0003]文献报道减肥类食品中非法添加物的检测方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、表面增强拉曼光谱法、高效液相色谱
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串联质谱联用法等。薄层色谱法和高效液相色谱法主要存在灵敏度低，干扰较多的问题。表面增强拉曼光谱法容易引入污染导致定量重复性差。液相色谱
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串联质谱联用法因其灵敏度高，选择性好的特征，是目前监测非法添加应用最多的方法。减肥类食品中非法添加物的前处理过程大部分采取用甲醇、乙腈、水或者其混合溶液直接提取的方式，针对性不强，不适用于复杂基质。国家市场监督管理总局颁布食品补充检验方法BJS202213《食品中匹可硫酸钠的测定》方法中采三氯乙酸水溶液提取，聚酰胺柱或石墨化碳净化，液相色谱
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串联质谱法在检测食品中的匹可硫酸钠，该方法在处理部分食品基质时，存在提取率差，基质干扰严重，聚酰胺柱上柱困难等问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术针对网售较火爆的减肥茶、纤体梅、压片糖果、奶昔、酵素粉等不同减肥类产品，采用加水分散后经甲醇
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盐析体系提取，采用通过式固相萃取柱PRiME HLB净化后，经超高效液相色谱
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串联质谱检测，建立了一种快速准确测定减肥类食品中匹可硫酸钠的方法。该方法操作简单，适用性强，灵敏度高、特别适合减肥类食品中匹可硫酸钠的定性、定量检测，为减肥食品中匹克硫酸钠的检测提供一种新的检测思路，弥补现有标准方法的缺陷，全力保障食品安全的高效监管。
[0005]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0006]一种盐析辅助/通过式固相萃取
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液相色谱
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串联质谱法测定网红减肥类食品中非法添加匹可硫酸钠的方法，包括以下步骤：
[0007](1)样品的前处理：
[0008]提取：准确称取充分粉碎或混合均匀后的样品1g于50mL离心管中，加入5mL水或加40
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50℃热水超声融化，涡旋混匀10min后，加入20mL甲醇和2g氯化钠，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心5min，上清液待净化。
[0009]净化：准确移取1mL上清液于Plus型PRiME HLB固相萃取柱相连的注射管中，通过PTFE滤膜，随后再准确移取1mL甲醇，进一步洗脱小柱；合并所有流出液，涡旋混匀。
[0010](2)标准溶液的制备：准确称取匹可硫酸钠标准物质10.00mg，用甲醇溶解并定容，配制成标准储备液1mg/mL；移取储备液，用甲醇逐级稀释，得到需要的工作溶液；
[0011](3)液相色谱
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串联质谱仪测定。
[0012](4)结果处理：将待测液经液相色谱
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串联质谱检测，获得匹可硫酸钠的色谱图，以保留时间和特征光谱吸收进行定性分析，以色谱图的峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，根据质量浓度与色谱峰面积响应绘制标准曲线和计算回归方程，计算匹可硫酸钠的浓度。
[0013]进一步地，提取步骤为：准确称取充分粉碎或混合均匀后的样品1g于50mL离心管中，加入5mL水或加40
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50℃热水超声融化，涡旋混匀10min后，加入20mL甲醇和2g氯化钠，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心5min，上清液待净化。其中，所述的提取体系为甲醇
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水
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盐析辅助体系。
[0014]进一步地，净化步骤为：准确移取1mL上清液于Plus型PRiME HLB固相萃取柱相连的注射管中，通过PTFE滤膜，随后再准确移取1mL甲醇，进一步洗脱小柱；合并所有流出液，涡旋混匀。其中，所述的净化方式为Plus型PRiME HLB通过式固相萃取柱，与注射管相连。所述的洗脱溶剂为1mL甲醇。
[0015]进一步地，液相色谱的条件为：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C
18
，尺寸为100mm
×
2.1mm，1.7μm；流动相A/B：乙腈/10mmol/L乙酸铵溶液，梯度洗脱程序A：柱温：30℃；进样体积5μL。梯度洗脱程序见表：
[0016][0017]进一步地，质谱仪的条件为：离子源：电喷雾离子源；离子化模式：正离子模式；扫描方式：多反应监测；喷雾电压：3500V；喷嘴电压:0V；离子传输管温度：325℃；喷雾器温度：300℃；鞘气流速：40L/min；辅助气流速：13mL/min；扫气流速：1mL/min；匹可硫酸钠的定性离子定量离子对及质谱参数为：
[0018][0019]优选地，匹可硫酸钠的质谱二级碎裂步骤为：匹可硫酸钠在ESI源下易电离形成正离子。将1μg/mL的匹可硫酸钠标准溶液注入质谱仪，通过一级质谱扫描获得相应的母离子，匹可硫酸钠主要以脱钠得到准分子离子峰[M+H]+
m/z 438.1，该碎片较稳定不易碎裂。通过优化离子源质谱参数获得最优离子源参数。在产物离子扫描模式下，以化合物的准分子离子峰为母离子，进行二级质谱扫描，优化碰撞能，当能量分别达到20V和35V时，得到丰度较高的m/z 278.1和m/z 184.1碎片，见图1。m/z 184.1碎片为不同断裂方式的叠加，响应较高且稳定，选择m/z278.1为定性离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种盐析辅助/固相萃取
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液相色谱
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串联质谱法测定网红减肥类食品中匹可硫酸钠的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的前处理：提取：准确称取充分粉碎或混合均匀后的样品于离心管中，加入水或热水超声融化，涡旋混匀后，加入甲醇和氯化钠，涡旋，超声提取，离心，上清液待净化；净化：上清液于Plus型PRiME HLB固相萃取柱净化，以甲醇进一步洗脱；(2)标准溶液的制备：准确称取匹可硫酸钠标准物质10.00mg，用甲醇溶解并定容，配制成标准储备液1mg/mL，于冰箱4℃避光保存；移取储备液，用甲醇逐级稀释，得到需要的工作溶液；(3)样品分析检测：将待测液用液相色谱
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串联质谱仪测定；(4)结果处理：将待测液经液相色谱
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串联质谱检测，获得匹可硫酸钠的色谱图，以保留时间和特征光谱吸收进行定性分析，以色谱图的峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，根据质量浓度与色谱峰面积响应绘制标准曲线和计算回归方程，计算匹可硫酸钠的浓度。2.根据权利要求1所述的一种盐析辅助/固相萃取
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液相色谱
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串联质谱法测定网红减肥类食品中匹可硫酸钠的方法，其特征在于，提取的具体条件为：准确称取充分粉碎或混合均匀后的样品1g于50mL离心管中，加入5mL水或加40
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50℃热水超声融化，涡旋混匀10min后，加入20mL甲醇和2g氯化钠，涡旋1min，超声提取15min，8000r...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑文静，张艳侠，刘艳明，王明栋，孙珊珊，赵慧男，薛霞，胡梅，王骏，
申请(专利权)人：山东省食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：