安祖花组培新技术，选用幼嫩组织诱导出来的少量无菌苗茎段作为外植体，接种在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号培养基上，同步诱导出愈伤组织、侧芽、不定根；试管苗不必另行壮苗生根，长至２－３ｃｍ高时即可切取，然后用药剂浸泡处理移栽，转入炼苗室，移栽成活率达９５％以上。本发明专利技术可在４－５个月内形成大量完整植株，为工厂化育种创造了良好的条件。
【技术实现步骤摘要】
安祖花无菌苗组织培养和试管苗炼苗移栽技术的制作方法1.专利
本专利技术涉及植物组织培养
，特别涉及名称为安祖花植物的无菌苗组织培养技术和试管苗炼苗移栽技术。在培养中选用无菌外植体，在两种不同优势的培养基上交替培养，同步产生愈伤组织、侧芽、不定根，在最短时间内形成完整植株；然后选用2-3cm高的完整植株用药剂浸泡处理移栽，提高成活率。本专利技术为安祖花工厂化育苗创造良好的条件，而且本专利技术还有利于其它植物进行工厂化育种的组织培养工作者。2.
技术介绍
2.1安祖花组织培养技术安祖花(Anthurium andreamum)原产于美洲的热带地区，是天南星科安祖花属多年生草本花卉，花朵鲜艳夺目，花形独特，又名红掌、火鹤花、灯台花、花烛、蜡烛花。因其花形独特、花色艳丽、并具有蜡质光泽、非常优美可爱，而成为倍受人们欢迎的高档花卉；且盆花可周年开花、切花瓶插寿命长，在国际市场上是十分畅销的一种切花材料和盆栽品种。近五年来红掌成为跻身于国际花卉市场的“新星”。安祖花通常以分株和扦插方式繁殖，目前采用组织培养技术育苗越来越多，但是大部分选用的外植体为茎尖、叶片、叶柄茎尖分化率高，生长快，由于分枝少，适宜取材的部位甚少，难以满足外植体的需求；叶片、叶柄诱导愈伤组织、分化芽时间较长。自1974年Pierk首次培养安祖花取得成功以来，国内外对安祖花愈伤组织诱导的研究报道，大多是依照外植体一愈伤组织一愈伤组织增殖一芽一生根一完整植株这一技术路线；从外植体诱导愈伤组织到形成完整植株，需130-180天；而且以上技术都是采用器官发生型这条途径，愈伤组织继代时间过长，抵抗力差，易染病，移栽不易成活。本专利技术的目的是针对上述问题，提供一种在最短的时间获得大量试管苗的快速繁殖技术，该技术具有稳定性好、操作简便、繁殖速率更快的优点。本专利技术的方法是依照外植体一愈伤组织、芽、不定根一完整植株这一技术路线，从外植体诱导产生愈伤、芽、不定根的完整植株只需50-62天左右。本专利技术的目的可以通过以下技术实现A、外植体的选择选用安祖花幼嫩器官经组织培养获得的2～3cm高且生长健壮、长势均匀、品质良好的无菌苗为材料，切取带1～2个节的茎段为外植体进行培养。B、外植体的接种将带1～2个节的茎段，接种在I.1/2MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，II.1/2MS+6-BA1.5～2.0mg/L+NAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，III.1/2MS+6-BA1.0～1.5mg/L+NAA0.05mg/L+IAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，每瓶培养基接种10～12个茎段。C、培养条件接种后移到培养室培养，培养室温度为22～28℃，培养室相对湿度为30～40％，每天光照10～12小时，光照强度为1000～2000lx；培养25～32天左右三种不同培养基上的外植体基部产生愈伤组织，叶腋萌发1～2个侧芽；再培养25～30天，长至2～3cm高的芽，侧芽基部产生2～5条不定根，形成完整植株。D、组培苗继代将带愈伤和芽的外植体，用II号和III号培养基不断进行交替培养，分化更多健壮的芽苗，同时诱导粗壮不定根进行移栽。本专利技术具有如下的优点和效果1、利用无菌苗为外植体，稳定性好、操作简便，取材容易，不需经过体外消毒，恢复期短；至今有一篇报道采用无菌叶、叶柄及茎段为外植体，但45天后才长出愈伤，再转入分化培养基培养30天后才能分化出小芽点(黄珺梅等，福建热带科技，2002，27(1)12～13)。本专利技术25-32天左右同步诱导出愈伤组织和侧芽。2、按上述培养条件培养，继续培养25～30天，芽2～3cm高时，基部产生2～5条不定根，从出愈到完整植株形成，仅需50～62天。比目前报道最短时间提早了30～60天形成完整植株(见兰芹英等，园艺学报，2003，30(1)107～109)。3、利用两种培养基各自的优势交替培养，获得安祖花组织培养的最佳效果，在目前未见报道。4、外植体在I、II、III号培养基上均能同步产生愈伤、侧芽、不定根，且各有优势；目前还未见报道可同步诱导愈伤、侧芽、不定根的培养基。5、利用外植体——愈伤组织、芽、不定根——完整植株这一技术路线，仅需50～62天形成完整植株，4～5个月内可获得大量完整植株，进行大规模工厂化育种。下面结合实施例描述本专利技术的最佳实施方案1、选用组织培养获得的2～3cm高且生长健壮、长势均匀、品质优良的无菌苗，先切除叶片和叶柄，然后切成带1～2节的茎段，接种在I、II、III号培养基上，每瓶10～12个外植体。2、接种后移到培养室培养，培养室温度为22～28℃，培养室相对湿度为30～40％，每天光照12小时，光照强度为1000～2000lx；3、培养30天左右，平均出愈率达93％，大部分叶腋萌发1-2个侧芽(见表1)。表1不同培养基对安祖花无菌苗愈伤组织形成及芽分化的影响基本培养基 激素(mg/L)接种外植 产生愈伤组 产生愈伤的外 愈伤组织 叶腋长出 侧芽萌发体数(块) 织的天数 植体数(块) 诱导率的侧芽数 率(％)(天)(％)I、1/2MS 6BA1.0+NAA0.05 100298484％ 152 89％II、1/2MS6BA2.0+NAA0.05 10025100 100％ 135 85％III、1/2MS 6BA1.0+NAA0.05 100329595％ 194 100％+IAA0.05+100g/LCM(注表中数据为培养35天统计的结果。)4、上述培养的外植体，继续接种在三种培养基上培养，再培养25～30天，当长至2～3cm高的芽时，基部长出2～5条不定根，形成完整植株(见表2)。表2不同培养基增殖对安祖花各器官繁殖的影响培养基 愈伤组织状况芽苗分化情况 成苗数及长势 根状况叶片状况I 球茎不规则，直径约1 部分愈伤组织上分化 大部分顶芽和侧芽 气生根较多， 较小，约0.5cm2，厘米，淡绿色或淡黄 出芽点，3-5个萌发展叶，每块愈伤 3-5条，2-3cm 淡绿色。色，质地致密。组织上有成苗2-3 长。株，高1.5-3cm。II球茎形状明显，直径 大部分愈伤组织分化 大部分顶芽和侧芽 气生根少而短，较小，约0.5cm2，约2.5cm，淡绿、淡黄 出芽点，数目较多 萌发展叶，每块愈伤 1-2条，0.5-1.5cm 淡绿色。或黄色，质地致密。 (5-10个)。 组织上有成苗1-2 长。株，高1-2cm。III 球茎形状不明显，直 大部分愈伤组织分化 大部分顶芽和侧芽 2-4条，1-3cm长。较大，约1cm2，径约2cm，淡绿、淡黄 出芽点，数目较多 萌发展叶，每块愈伤 浓绿色，光滑。或黄色，质地光滑致 (5-6个)。组织上有成苗4-5密。株，高2-3cm，粗壮。(注表中数据为培养62天统计结果)5、从表1、表2可以看出I号培养基愈伤组织小而不规则，分化芽点少，芽苗长势一般，但气生根多而长；II号培养基上愈伤组织大而形状明显，分化芽点多，但成苗弱而少，气生根少而短；III号培养基愈伤组织较小，但分化芽点数比较多，成本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种安祖花植株组织培养技术，其特征在于安祖花无菌苗组织培养技术是按以下步骤和方法进行：Ａ、外植体的选择：选用安祖花幼嫩器官经组织培养获得的２～３ｃｍ高且生长健壮、长势均匀、品质良好的无菌苗为材料，切取带１～２个节的茎段为外植体进行培 养。Ｂ、外植体的接种：将带１～２个节的茎段，接种在Ⅰ．１／２ＭＳ＋６－ＢＡ０．５～１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋３％葡萄糖＋０．７５％琼脂，Ⅱ．１／２ＭＳ＋６－ＢＡ１．５～２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋３％葡萄糖 ＋０．７５％琼脂，Ⅲ．１／２ＭＳ＋６－ＢＡ１．０～１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋３％葡萄糖＋０．７５％琼脂，每瓶培养基接种１０～１２个茎段。Ｃ、培养条件：接种后移到培养室培养，培养室温度为２２～２８ ℃，培养室相对湿度为３０～４０％，每天光照１０～１２小时，光照强度为１０００～２０００ｌｘ；培养２５～３２天左右，三种不同培养基上的外植体基部产生愈伤组织，叶腋萌发１～２个侧芽；继续培养２５～３０天，长至２～３ｃｍ高的芽，侧芽基部产生２～５条不定根，形成完整植株。Ｄ、组培苗继代：将带愈伤和小芽的外植体，用Ⅱ号和Ⅲ号培养基不断进行交替培养，分化更多健壮的芽苗，同时诱导粗壮不定根进行移栽。...
【技术特征摘要】
1.一种安祖花植株组织培养技术，其特征在于安祖花无菌苗组织培养技术是按以下步骤和方法进行A、外植体的选择选用安祖花幼嫩器官经组织培养获得的2～3cm高且生长健壮、长势均匀、品质良好的无菌苗为材料，切取带1～2个节的茎段为外植体进行培养。B、外植体的接种将带1～2个节的茎段，接种在I.1/2MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，II.1/2MS+6-BA1.5～2.0mg/L+NAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，III.1/2MS+6-BA1.0～1.5mg/L+NAA0.05mg/L+IAA0.05mg/L+3％葡萄糖+0.75％琼脂，每瓶培养基接种10～12个茎段。C、培养条件接种后移到培养室培养，培养室温度为22～28℃，培养室相对湿度为30～40％，每天光照10～12小时，光照强度为1000～2000lx；培养25～32天左右，三种不同培养基上的外植体基部产生愈伤组织，叶腋萌发1～2个侧芽；继续培养25...
【专利技术属性】
技术研发人员：易自力，黄丽芳，蒋建雄，蔡能，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]
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