一种紫花苜蓿农杆菌介导的高效遗传转化方法技术

本发明专利技术提供了一种农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化方，本申请的方法通过在菌液、菌体重悬液中加入乙酰丁香酮、以及在侵染液中加入谷氨酰胺Gln和EGTA，来降低外植体防御反应，促进农杆菌侵染的方式，提高转化效率。提高转化效率。提高转化效率。

【技术实现步骤摘要】
一种紫花苜蓿农杆菌介导的高效遗传转化方法


[0001]本专利技术属于基因工程领域，具体地，本申请提供了一种农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化方法。

技术介绍

[0002]紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草，属生产和生态兼顾的牧草，被誉为“牧草之王”，对畜牧业发展起重要作用。随着我国居民膳食结构中肉蛋奶需求的不断增加，我国对优质紫花苜蓿的需求急剧增加。然而，我国优质、抗逆紫花苜蓿品种短缺，远不能满足我国畜牧业的饲喂需求，严重依赖进口。因此，培育自主知识产权的优质、抗逆紫花苜蓿对保障我国草牧业健康发展具有重要意义。
[0003]紫花苜蓿是同源多倍体植物(2n＝4x＝32)，具有自交不亲和的特性，育种手段仍停留在以群体选择和杂交选育为主的传统育种阶段。由于植物抗逆性本身的复杂性和其数量性状位点关系的连锁性，传统育种方法培育优良的抗性品种十分困难。因此，利用基因工程技术获得适应或抵抗不利环境条件的紫花苜蓿优质品种成为解决该问题快速且有效的方法之一。但紫花苜蓿受其自身生物学特性影响，再生频率低、农杆菌侵染后外植体不易分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种遗传转化的方法，其特征在于，所述方法使用农杆菌介导。2.根据权利要求1所述的方法，所述方法用于紫花苜蓿遗传转化。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述方法包括(1)外植体制备；(2)农杆菌侵染液制备；(3)农杆菌侵染；(4)获得再生植株。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述步骤(2)包括培养获得农杆菌菌液，获得菌体以及以重悬液重悬菌体获得农杆菌侵染液的步骤。5.根据权利要求3所述的方法，其中农杆菌菌液和重悬液中包含乙酰丁香酮。6.根据权利要求5所述的方法，其中农杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：张万军，高娅楠，王之杰，刘燕蓉，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：