一种低细胞毒性的PRP分离胶及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种低细胞毒性的PRP分离胶及其制备方法与应用。本发明专利技术是以甲基丙烯酸羟乙酯、1

【技术实现步骤摘要】
一种低细胞毒性的PRP分离胶及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及血液取样分离领域，特别涉及一种低细胞毒性的PRP分离胶及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]富血小板血浆(简称PRP)，是源于自体血液，成分包含高浓度血小板、白细胞及纤维蛋白。一般而言PRP中的血小板浓度可为正常血液中血小板浓度的3
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17倍。由于PRP的应用范围很广，提取高质量、高浓度的PRP至关重要。PRP的传统分离方法是采用两次离心方法，其原理是基于血液中各成分的比重不同，离心时沉降速度不同，第一次离心分离含有血小板的血浆与红细胞，第二次离心将血小板和贫血小板血浆分离，即可得到富含血小板血浆PRP。
[0003]但是该分离方法却存在以下缺陷：离心分层后无法形成有效的隔离，由于血小板的比重接近血细胞，故大部分的血小板将停在血浆与血细胞的交界处，吸取过程中容易吸入血细胞，且容易重新混匀导致无法收集PRP；开放式的制备体系容易受到外界污染；多个容器间的转移，增加了血小板被污染和激活的机率；操作人员的个人习惯及拿捏尺度极大地影响了PRP中血小板的浓度，使制备的PRP血小板回收率较低。故制备得到的富血小板血浆富集系数低，血小板回收不全，回收率偏低，操作繁琐，容易出现人为的误差甚至失误导致获得较少
[0004]量的PRP甚至是失效的PRP。
[0005]为此，相关研发人员在上述分离过程中加入了PRP分离胶以改善上述缺陷，但是目前现有技术中公开的PRP分离胶的富集效果相对较差，并不能得到高质量的PRP，同时，由于分离胶的引入富血小板血浆不可避免地会有残余的分离胶。而现有技术中采用的分离胶成分复杂，且细胞毒性未知，会对富血小板血浆的后期临床施用带来诸多不利因素。

技术实现思路

[0006]针对现有技术所存在的技术问题，本专利技术提供了一种低细胞毒性的PRP分离胶及其制备方法。
[0007]本专利技术的目的之一在于提供一种低细胞毒性的PRP分离胶，其特征在于，所述PRP分离胶是以甲基丙烯酸羟乙酯、1
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十二烯和端乙烯基硅油为单体制备得到。
[0008]优选地，所述甲基丙烯酸羟乙酯密度为1.073g/ml，常压沸点189℃。
[0009]优选地，所述1
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十二烯密度为0.76g/ml，常压沸点213℃。
[0010]优选地，所述端乙烯基硅油的粘度为200
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1000mpa.s；
[0011]进一步优选地，甲基丙烯酸羟乙酯和1
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十二烯单体为主合成的聚合物比重为1.02
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1.04g/ml。
[0012]进一步优选地，在聚合物中引入端乙烯基硅油，使聚合物中增加了硅原子，提高了聚合物与纳米二氧化硅之间的相容性。
[0013]本专利技术的另一目的在于提供一种低细胞毒性的PRP分离胶的制备方法，其特征在于，所述包括如下步骤：
[0014]1)将50g 1
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十二烯，225g甲基丙烯酸羟乙酯，7.5g端乙烯基硅油加入含有300g溶剂的烧瓶中，并迅速升温至160℃，使其充分混匀；
[0015]2)在滴液漏斗中加入225g甲基丙烯酸羟乙酯和13g过氧化苯甲酸叔丁酯，混合均匀；
[0016]3)将步骤2)中滴液漏斗缓慢滴入步骤1)中的烧瓶中，滴加时间为4h；
[0017]4)滴加结束后，160℃保温1小时，然后迅速升温至220℃开始减压蒸馏，真空度维持在
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0.097MPa以上，减压蒸馏时间为1小时，得到比重为1.036，树脂粘度为93pa.s的树脂；
[0018]5)将步骤4)的树脂降温至常温，在合成好的树脂中，加入纳米二氧化硅，使用行星分散机，调合成PRP分离胶。
[0019]优选地，步骤1)中的溶剂为异构十二烷溶剂。
[0020]优选地，步骤5)中是在100g合成好的树脂中，加入2.5g纳米二氧化硅，使用行星分散机，调合成PRP分离胶。
[0021]本专利技术的另一目的在于提供上述低细胞毒性的PRP分离胶在制备PRP分离试剂盒中的应用。
[0022]本专利技术的检测技术原理是基于：PRP为富血小板血浆的英文缩写，是指富含血小板的血浆，一般是通过采集患者血液，通过离心，使血液成分(红细胞、白细胞、血小板、血浆)分层，PRP分离胶是具有特定比重(介于红细胞与血小板之间)的触变性胶体，在离心剪切力作用下，粘度快速降低，变为可流动液体，因其特定比重，会自动切入到红细胞与血小板之间，离心停止，分离胶粘度快速上升，变为不流动状态，从而将红细胞与血小板隔离，以方便获取富含血小板的血浆。
[0023]本专利技术的设计要求是因血小板比重约为1.03g/ml，红细胞比重约为1.07g/ml，本分离胶比重设计为二者之间，即1.05g/ml。本分离胶以纳米气相二氧化硅做触变剂，经实验，获得适宜的触变性，二氧化硅的添加量约为2.5％，以此推算，上述三种单体共聚的聚合物的比重应为1.035g/ml，同时聚合物粘度约为100Pa.S左右，方能保证分离胶可以较好地反转。通过实验确定了三种单体的比例及工艺参数，得到比重和粘度满足要求的聚合物。
[0024]本专利技术同现有技术相比的优点：
[0025]1)本专利技术提供的低细胞毒性的PRP分离胶是以甲基丙烯酸羟乙酯、1
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十二烯和端乙烯基硅油为单体制备得到。上述三个单体都具体良好的生物安全性，合成的聚合物也具备良好的生物安全性。以GB/T16886.5
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2017标准进行细胞毒性对比测试，结果显示本专利技术的PRP分离胶细胞毒性为1级，远超过目前市场销售的同类产品。
[0026]2)甲基丙烯酸羟乙酯密度为1.073g/ml，1
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十二烯密度为0.76g/ml，以这二个单体为主合成的聚合物比重为1.02
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1.04g/ml，在聚合物中引入端乙烯基硅油，使聚合物中增加了硅原子，提高了聚合物与纳米二氧化硅之间的相容性。
[0027]3)本专利技术制备得到的PRP分离胶可以有效回收全血中的血小板，整体血小板的回收率高达93％以上，可制备得到高质量的富血小板血浆。且相比于实施例1而言，实施例2的PRP管中均没发现油滴而实施例1的PRP管中有油滴产生。由此可见，在所述单体中引入乙烯基硅油可以抑制油滴产生的技术效果，这也是选择该三个低细胞毒性单体构建PRP分离胶
的主要原因之一。
附图说明
[0028]图1.实施例1制备的PRP分离胶的胶流变曲线；
[0029]图2.实施例2制备的PRP分离胶的胶流变曲线。
具体实施方式
[0030]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本专利技术。
[0031]以下各实施例，仅用于说明本专利技术，并不用来限制本专利技术的范围。基于本专利技术中的具体实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的情况下，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低细胞毒性的PRP分离胶，其特征在于，所述PRP分离胶是以甲基丙烯酸羟乙酯、1
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十二烯和端乙烯基硅油为单体制备得到。2.如权利要求1所述的PRP分离胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸羟乙酯密度为1.073g/ml，常压沸点189℃。3.如权利要求1所述的PRP分离胶，其特征在于，所述1
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十二烯密度为0.76g/ml，常压沸点213℃。4.如权利要求1所述的PRP分离胶，其特征在于，所述端乙烯基硅油的粘度为200
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1000mpa.s。5.如权利要求1所述的PRP分离胶，其特征在于，甲基丙烯酸羟乙酯和1
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十二烯单体为主合成的聚合物比重为1.02
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1.04g/ml。6.如权利要求4所述的PRP分离胶，其特征在于，在所述聚合物中引入端乙烯基硅油，使聚合物中增加了硅原子，提高了聚合物与纳米二氧化硅之间的相容性。7.权利要求1
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6任一项所述的低细胞毒性的PRP分离胶的制备方法，其特征在于，所述包括如下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：马海波，刘强，
申请(专利权)人：珠海朗泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：