一种过表达HIC1基因质粒及其构建方法技术

本发明专利技术涉及一种过表达HIC1基因质粒及其构建方法，属于生物化学技术领域。本发明专利技术过表达HIC1基因质粒的构建方法包括：PCR扩增HIC1基因；质粒酶切形成线性质粒；将酶切回收的CDS和载体连接；转化并抽提质粒。本发明专利技术通过基因工程技术对HIC1基因进行过表达，能够准确使靶细胞中HIC1过表达，有助于研究HIC1基因的功能。能。

【技术实现步骤摘要】
一种过表达HIC1基因质粒及其构建方法


[0001]本专利技术属于生物化学
，主要涉及基因工程相关技术，具体涉及一种种过表达HIC1基因质粒及其构建方法。
技术背景
[0002]癌高甲基化基因1（HIC1）是一个肿瘤抑制基因。该基因位于人类染色体17p13.3位点、肿瘤抑制基因p53远端。HIC1编码一种转录抑制因子，该转录抑制因子识别的靶基因与细胞增殖、肿瘤生长、血管生成及侵犯等作用有关。研究发现，HIC1在多种实体肿瘤中发生基因缺失或启动子区高甲基化修饰而导致表达沉默，在肿瘤中恢复HIC1的表达能够明显改善病人的愈后。目前，应用甲基化酶抑制剂等恢复HIC1基因的活性,作为治疗肿瘤的策略引起人们的广泛关注，对其作用机制以及调控分子络的深入探讨将为肿瘤的治疗提供新的途径。
[0003]前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在西方国家男性恶性肿瘤中居第二位，近年来，在我国也呈显著上升趋势。上海市前列腺癌发病率已从1990年的2.6/10万上升至2005年的16.1/l0万，位列男性肿瘤的第5位。本专利技术希望本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种过表达HIC1基因质粒，其特征在于，所述基因是HIC1亚型1。2.一种构建如权利要求1所述的过表达HIC1基因质粒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)PCR扩增人源HIC1亚型1基因的CDS序列片段；(2)对所获得的基因片段和表达载体进双酶切，并进行连接；(3)将连接产物转化至大肠杆菌中，并挑去阳性克隆进行培养，然后抽提质粒。3.根据权利要求2所述的过表达HIC1亚型1基因质粒的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中PCR扩增CDS序列片段时所需的上、下游引物序列如下：上游引物：Forward:5

【专利技术属性】
技术研发人员：崔大祥，崔明青，周园园，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：