赤霉素A34、12-羟基十二烷酸在食管鳞状细胞癌的诊断试剂中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，为了解决目前ESCC患者肠道代谢产物之间的相互关系以及在其中发挥的作用尚未得到有效解决等问题，提供了肠道代谢产物赤霉素A34、12

【技术实现步骤摘要】
赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸在食管鳞状细胞癌的诊断试剂中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸在食管鳞状细胞癌的诊断试剂中的应用。

技术介绍

[0002]食管癌是人体内发病率较高的恶性肿瘤之一，最近的研究报告表明全球食管癌在所有恶性肿瘤中发病率居第7位，死亡率居第6位。食管鳞状细胞癌(Esophageal squaIilous cell carcinoma，ESCC)是中国食管癌最主要的病理类型，且预后极差，其具体发病机制目前尚不明确，当前的研究认为有多种危险因素与其相关，包括烟草、酒精及口腔菌群失调。
[0003]近年来，肠道代谢产物与肿瘤的关系是研究的热点，肠道代谢产物平衡的破坏可能导致恶性肿瘤的发生，寻找肠道标志代谢产物从而对ESCC进行早期诊断及治疗是至关重要的。然而，ESCC患者肠道代谢产物之间的相互关系以及在其中发挥的作用尚未得到有效解决。随着高通量分子检测技术的发展和应用，组学研究在人类医学学科中蓬勃发展，非靶向的粪便代谢组学可以对肠道内的代谢物进行定量分析，以给出一个系统的整体观点。非靶向的代谢组学技术又以液相色谱
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质谱联用（Liquid Chromatograph Mass Spectrometer，LC
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MS）方法最为精确可靠。因此，我们采用基于LC
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MS的非靶向代谢组学方法，结合生物统计学和生物信息学等技术进行了这项病例对照研究。以系统和全面地研究人类ESCC患者粪便样品代谢物，确定其代谢产物组成及变化，寻找潜在的生物诊断标志物，探究ESCC与肠道代谢产物的之间的关联。

技术实现思路

[0004]本专利技术为了解决目前ESCC患者肠道代谢产物之间的相互关系以及在其中发挥的作用尚未得到有效解决等问题，提供了肠道代谢产物赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸在食管鳞状细胞癌的诊断试剂中的应用。
[0005]本专利技术由如下技术方案实现的：本专利技术提供了肠道代谢产物赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸在制备食管鳞状细胞癌的诊断物中的应用。
[0006]进一步的，所述诊断物检测粪便中赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸的含量，所述的诊断物为诊断试剂盒，分别构建赤霉素A34和12
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羟基十二烷酸ROC曲线，计算AUC值；所述赤霉素A34在ESCC患者中含量显著增多，12
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羟基十二烷酸在ESCC患者中含量显著减少。
[0007]所述诊断试剂盒包含特异性检测粪便中赤霉素A34和12
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羟基十二烷酸含量的试剂。
[0008]经检测，肠道代谢产物的PLS
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DA 及OPLS
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DA分析显示ESCC组和Control组的代谢物组成具有显著的差异，检验置换显示结果可靠有效。赤霉素A34（GibberellinA34）、12
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羟基十二烷酸（12
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Hydroxydodecanoicacid）ROC曲线下面积分别为82.56%、85.33%，对ESCC具
有一定的诊断价值。
[0009]与现有技术相比，本专利技术证实了：赤霉素A34在ESCC患者中含量显著增多，12
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羟基十二烷酸在ESCC患者中含量显著减少，ROC曲线下面积分别为82.56%。85.33%，对ESCC具有一定的诊断价值，但目前并没有关于这两种代谢产物的相关研究。ESCC患者粪便代谢产物发生了改变，为使用肠道代谢产物作为早期诊断ESCC的生物标志物奠定了基础。
附图说明
[0010]图1为正负离子模式下的PLS
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DA 及OPLS
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DA得分图；注：横坐标表示第一主成分解释度，纵坐标方向第二主成分解释度；点表示实验样本，颜色表示不同分组。组内样本越聚集，组间样本越分散，说明结果越可靠；图2为正负离子模式下PLS
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DA 及OPLS
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DA置换检验图；注：当本图满足以下任意一点时，说明结果可靠有效：1.点的回归线与纵坐标交叉小于0。2.所有蓝色的 Q2 点均低于最右的原始的蓝色的Q2点；图3为火山图；注：横坐标表示代谢物在两样本中定量差异倍数的Log2的对数值；纵坐标表示P值的
‑
log10的对数值；横坐标绝对值越大，代谢物在两样本间的表达量倍数差异越大；纵坐标值越大，差异表达越显著；红色点代表上调差异表达代谢物，蓝色点代表下调；图4为Z
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score (标准分数)图；注：横坐标为代谢物在组中相对含量通过 Z
‑
score 换算得到的数值，越靠右代表该代谢物在该组中越多；图5为差异代谢物相对定量比较；注：横坐标为代谢产物名称，纵坐标为代谢产物的相对定量；
★
表示P＜0.05，
★★
表示P＜0.01；按照P值显著性从低到高排序展示前5个最显著的上调差异物质与下调差异物质及与关注通路相关的物质；图6为赤霉素A34（GibberellinA34）、12
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羟基十二烷酸（12
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Hydroxydodecanoicacid）的ROC曲线；注：横坐标为特异度，纵坐标为灵敏度。
具体实施方式
[0011]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0012]除非另有定义，所有在此使用的技术和科学术语，和本专利技术所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。
[0013]本领域技术人员意识到的通过常规实验就能了解到的描述的特定实施方案的等同技术，都将包含在本申请中。
[0014]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的仪器设备，如无特殊说明，均为实验室常规仪器设备；下述实施例中所用的实验材料，如无特殊说明，均为由常规生化试剂商店购买得到的。
[0015]一、研究对象：以民族、性别、年龄（
±
5岁）为匹配条件进行1:1匹配，将2019年8月至2021年4月在中国山西省长治市某医院住院的30例ESCC患者纳入食管鳞状细胞癌组
（ESCC组）；将同期在该医院进行健康体检的30名体检者纳入对照组（Control组）。所有入选者均向他们或其家属提供了问卷填写和粪便样本采集的知情同意书，长治医学院伦理委员会批准了该研究(伦理批准编号：RT2021148)。
[0016]病例组纳入和排除标准：（1）初诊的食管鳞状细胞癌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.肠道代谢产物赤霉素A34、12
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羟基十二烷酸在制备食管鳞状细胞癌的诊断物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述诊断物检测粪便中赤霉素A34、12
‑
羟基十二烷酸的含量，所述的诊断物为诊断试剂盒，分别构建赤霉素A34和12
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑金平，黄兴强，陈学怡，万国威，
申请(专利权)人：长治医学院，
类型：发明
国别省市：