一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用制造技术

技术编号:38714269 阅读:11 留言:0更新日期:2023-09-08 14:57
本发明专利技术公开了一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用,该产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌分类命名为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),菌株号YC3

【技术实现步骤摘要】
一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用


[0001]本专利技术涉及烟草生物
,特别涉及一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用。

技术介绍

[0002]目前,随着化肥的大量使用,土壤板结及盐渍化问题愈发严重,严重影响了植物的正常生长。植物在逆境生长环境下,根部会通过ACC会产生大量的乙烯,抑制植物的正常生长。
[0003]为了减缓过量的乙烯对植物生长造成的不利影响,本研究通过从烟草根系内分离得到一株能够产ACC脱氨酶的菌株YC3

1(Serratia marcescens),ACC脱氨酶可以分解ACC,减少乙烯的合成,从而促进植物的生长发育。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是提供一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用,其可以分解ACC,减少乙烯的合成,从而促进植物的生长发育。
[0005]本专利技术所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的:
[0006]本申请的目的在于,提供一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌,其分类命名为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),菌株号YC3

1,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.27138。
[0007]本申请的另一目的在于,提供一种产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌在促进烟草生长发育中的应用。
[0008]优选地,促进烟草生长发育包括促进烟草种子萌发以及促进烟草植株生长发育,其中:
[0009]促进烟草种子萌发,具体为:用LB培养基活化菌株,28℃,180rpm培养,将菌液浓度调至OD
600
=1,挑取大小一致、饱满均匀的烟草种子,表面消毒后用菌液浸泡后置于水琼脂中,以无菌水为对照,每个处理3个重复,每个重复30粒种子,于3d后调查种子萌发势,7d后调查萌发率,14d调查植株根长;
[0010]促进烟草植株生长发育,具体为:用LB培养基活化菌株,28℃,180rpm培养,将菌液用无菌水调至为OD
600
=1的菌悬液,选择健康且长势均匀一致的烟株,以无菌水作为对照,每个处理设置15个重复,每颗烟苗灌入5mL菌悬液,第30天测定其株高、叶片数、根长、最大叶长、最大叶宽、地上部鲜重、地下部鲜重和干重。
[0011]优选地,发芽指数=∑Gt/Dt,Gt为发芽试验终期内每日发芽数,Dt为发芽日数;活力指数=GI
×
S,GI为发芽指数,S为规定日期内幼苗或幼根的长度。
[0012]本申请的另一目的在于,提供一种产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌在促进油菜生长发育中的应用。
[0013]优选地,所述油菜生长发育具体为促进根部的生长,处理过程如下:
[0014]用LB液体培养基活化菌株,用以ACC为唯一氮源的ADF培养液洗涤两次,将洗涤好的菌液移入以ACC为唯一氮源的ADF培养液中,28℃,180rpm培养,将菌液浓度调至OD
600
=0.3,挑取大小一致、饱满均匀的油菜种子进行表面消毒,将消毒后的种子分别浸于菌悬液中浸种4h,以无菌水为对照,然后再将浸泡过的种子置于放有滤纸的培养皿中,每皿放30粒种子,每个处理设3次重复,2d后调查种子萌发率,5d后调查植株根长。
[0015]本申请的另一目的在于,提供一种产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌在植物根际稳定定殖中的应用。
[0016]本申请的另一目的在于,提供一种促进植物生长的微生物菌剂或促进植物生长发育的植物生长促进剂,所述微生物菌剂或所述植物生长促进剂中包含权利要求1所述的粘质沙雷氏菌YC3

1。
[0017]本专利技术上述技术方案,具有如下有益效果:
[0018](1)菌株YC3

1为烟草内生菌株,对烟草的农艺性状及生物量具有显著的提升:通过促生菌株YC3

1的处理,烟草种子的萌发、烟苗的生长都得到了显著提升。
[0019](2)菌株YC3

1对于油菜的生长也具有促进作用:经过菌株YC3

1处理后5天,处理组油菜的根长比对照组根长显著提高。
[0020](3)菌株YC3

1为内生菌株,因此菌株的定殖能力相对于外生菌株较强:菌株YC3

1在28d时在烟草根际土壤及根内仍具有较强的定殖能力。
附图说明
[0021]被结合在说明书中并构成说明书的一部分的附图示出了本专利技术的实施例,并且连同其说明一起用于解释本专利技术的原理。
[0022]图1为菌株YC3

1的系统发育树。
[0023]图2为菌株YC3

1在TSA上形态特征。
[0024]图3为烟草促生实验结果图。
具体实施方式
[0025]现在将参照附图来详细描述本专利技术的各种示例性实施例。应注意到:除非另外具体说明,否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对布置、数字表达式和数值不限制本专利技术的范围。
[0026]本申请的目的在于提供一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌,其分类命名为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),菌株号YC3

1,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.27138,保藏日期为:2023年4月17日。YC3

1菌株的16SrRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示(在GeneBank数据库中的序列号为OQ269458)。
[0027]本菌株YC3

1在TSA上形态特征如图2所示。菌株YC3

1近球形短杆菌,革兰氏阴性,周身鞭毛,能运动。无荚膜,无芽胞。
[0028]ACC脱氨酶可以分解ACC,减少乙烯的合成,从而促进植物的生长发育。本申请的能够产ACC脱氨酶的菌株YC3

1,其能救分解ACC。
[0029]实施例1菌株YC3

1的分离
[0030]产ACC脱氨酶促生菌的分离:
[0031]取健康烟株根系,进行表面消毒(无菌水漂洗2~3次,75%乙醇浸泡5min,1%的NaClO溶液浸泡5min,无菌水冲洗3~4次),研磨后于PAF培养基中28℃,180rpm培养24h,经过两次PAF培养后,取1mL培养液加入以(NH4)2SO4为唯一氮源的DF培养基中继续培养24h,取1mL培养液于以3.0mmol
·
L
‑1ACC为唯一氮源的ADF培养基中继续培养24h,将最终培养物的稀释液接种到固体DF盐基本培养基上,并在30℃下孵育48h,之后从平板上挑取形态各异的单菌落于ADF平板上反复划线纯化,保存于TSA培养基中。
[0032]实施例2促进烟草生长发育
[0033]产ACC脱氨酶本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌,其特征在于,其分类命名为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),菌株号YC3

1,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.27138。2.根据权利要求1所述的产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌在促进烟草生长发育中的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,促进烟草生长发育包括促进烟草种子萌发以及促进烟草植株生长发育,其中:促进烟草种子萌发,具体为:用LB培养基活化菌株,28℃,180rpm培养,将菌液浓度调至OD
600
=1,挑取大小一致、饱满均匀的烟草种子,表面消毒后用菌液浸泡后置于水琼脂中,以无菌水为对照,每个处理3个重复,每个重复30粒种子,于3d后调查种子萌发势,7d后调查萌发率,14d调查植株根长;促进烟草植株生长发育,具体为:用LB培养基活化菌株,28℃,180rpm培养,将菌液用无菌水调至为OD
600
=1的菌悬液,选择健康且长势均匀一致的烟株,以无菌水作为对照,每个处理设置15个重复,每颗烟苗灌入5mL菌悬液,第30天测定其株高、叶片数、根长、最大叶长、最大叶宽、地上部鲜重、地下部鲜重和干重。4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员:王廷晓段卫东尹光庭蒋士君金东峰孟颢光罗瑞锋王磊李文渊李豪吕建国陈少锋
申请(专利权)人:河南中烟工业有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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