本发明专利技术涉及一种日勾维多细菌源菌检验用培养基及其制备方法和应用,所述检验用培养基包括双倍葡萄糖胆盐培养基和卵磷脂吐温80
【技术实现步骤摘要】
一种日勾维多细菌源菌检验用培养基及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于化妆品微生物检验领域,涉及一种日勾维多细菌源菌检验用培养基及其制备方法和应用,特别涉及化妆品中日勾维多细菌源菌检验用培养基及其检验方法。
技术介绍
[0002]日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae)在2013年之前被称为日沟维肠杆菌(Enterobacter gergoviae),是兼性厌氧的革兰氏阴性菌,为肠道正常菌群,属于条件致病菌,在人体免疫力低下时能引起泌尿系统、呼吸系统感染以及菌血症,是常见的院内感染致病菌。日勾维多细菌源菌对多种化妆品防腐剂(如:三氯生、对羟基苯甲酸酯类防腐剂)均具有较强的耐受性,在面膜、面霜以及淋洗类化妆品中较常见,其检出率远高于《化妆品安全技术规范》(2015年版)中的条件致病菌(控制菌):大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。近年来,美国FDA以及欧盟非食品类消费品快速预警系统(EU Rapid alert system)发布了多批化妆品因污染日勾维多细菌源菌被召回的事件,且德国已经明确规定化妆品中不能含有日勾维多细菌源菌。
[0003]目前,日勾维多细菌源菌的研究主要集中在临床研究、防腐剂耐受性及抗生素耐受性等方面,各国化妆品微生物检验方法中均没有针对日勾维多细菌源菌的检验方法,只有澳大利亚的SY
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LAB公司声称开发了针对日勾维多细菌源菌的快速检测试剂盒RiboFlow P/En,但该方法针对的是整个肠杆菌科的细菌,不具有专一性。由于日勾维多细菌源菌潜在的危害性,欧美等多个国家已经禁止化妆品中检出日勾维多细菌源菌,然而目前国内外均未报道化妆品中日勾维多细菌源菌检验方法,因此有必要建立化妆品中日勾维多细菌源菌的检验方法。
技术实现思路
[0004]针对现有技术的不足,本专利技术的目的在于提供一种日勾维多细菌源菌检验用培养基及其制备方法和应用。
[0005]为达到此专利技术目的,本专利技术采用以下技术方案:
[0006]第一方面,本专利技术提供一种日勾维多细菌源菌检验用培养基,所述日勾维多细菌源菌检验用培养基包括双倍葡萄糖胆盐培养基和卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基;
[0007]所述双倍葡萄糖胆盐培养基包括蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、猪胆盐、葡萄糖、磷酸氢二钾、溴甲酚紫、卵磷脂和吐温80;
[0008]所述卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基包括卵磷脂吐温80琼脂培养基、柠檬酸铁和七叶苷。
[0009]本专利技术开发选择性培养日勾维多细菌源菌的培养基和能与日勾维多细菌源菌产生特异性颜色变化的鉴别培养基,建立相应的日勾维多细菌源菌检验方法,可有效的检出化妆品中的日勾维多细菌源菌,操作简便,准确性高。
[0010]优选地,所述双倍葡萄糖胆盐培养基以质量浓度计包括蛋白胨15
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19g/L、大豆木
瓜蛋白酶水解物4
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8g/L、猪胆盐10
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14g/L、葡萄糖18
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22g/L、磷酸氢二钾4
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6g/L、溴甲酚紫0.02
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0.03g/L、卵磷脂2
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3g/L和吐温80 12
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16g/L。
[0011]所述蛋白胨的质量浓度可以选择15g/L、16g/L、17g/L、18g/L、19g/L等,所述大豆木瓜蛋白酶水解物的质量浓度可以选择4g/L、5g/L、6g/L、7g/L、8g/L等,所述猪胆盐的质量浓度可以选择10g/L、11g/L、12g/L、13g/L、14g/L等,所述葡萄糖的质量浓度可以选择18g/L、19g/L、20g/L、21g/L、22g/L等,所述磷酸氢二钾的质量浓度可以选择4g/L、4.5g/L、5g/L、5.5g/L、6g/L等,所述溴甲酚紫的质量浓度可以选择0.02g/L、0.021g/L、0.022g/L、0.023g/L、0.024g/L、0.025g/L、0.026g/L、0.027g/L、0.028g/L、0.029g/L、0.03g/L等,所述卵磷脂的质量浓度可以选择2g/L、2.1g/L、2.2g/L、2.3g/L、2.4g/L、2.5g/L、2.6g/L、2.7g/L、2.8g/L、2.9g/L、3g/L等,所述吐温80的质量浓度可以选择12g/L、12.5g/L、13g/L、13.5g/L、14g/L、14.5g/L、15g/L、15.5g/L、16g/L等,上述数值范围内其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
[0012]优选地,所述卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基以质量浓度计包括七叶苷0.8
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1.2g/L和柠檬酸铁0.4
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0.5g/L。
[0013]所述七叶苷的质量浓度可以选择0.8g/L、0.85g/L、0.9g/L、0.95g/L、1g/L、1.05g/L、1.1g/L、1.15g/L、1.2g/L等,所柠檬酸铁的质量浓度可以选择0.41g/L、0.42g/L、0.43g/L、0.44g/L、0.45g/L、0.46g/L、0.47g/L、0.48g/L、0.49g/L、0.5g/L等,上述数值范围内其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
[0014]第二方面,本专利技术提供一种根据第一方面所述的日勾维多细菌源菌检验用培养基的制备方法,所述双倍葡萄糖胆盐培养基的制备方法包括:将蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、猪胆盐、葡萄糖、磷酸氢二钾、卵磷脂、吐温80、溴甲酚紫与水混合;
[0015]所述卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基的制备方法包括:将七叶苷、柠檬酸铁与卵磷脂吐温80琼脂培养基混合。
[0016]优选地,卵磷脂、吐温80与水混合前,还包括将卵磷脂和吐温80分别加热至溶解。
[0017]优选地,所述双倍葡萄糖胆盐培养基的pH为7.2
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7.6,例如7.2、7.3、7.4、7.5、7.6等,上述数值范围内其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
[0018]第三方面,本专利技术提供一种根据第一方面所述的日勾维多细菌源菌检验用培养基在检验化妆品日勾维多细菌源菌污染中的应用。
[0019]优选地,所述日勾维多细菌源菌检验用培养基的使用方法包括:
[0020](1)将供试液与双倍葡萄糖胆盐培养基混合培养,得到培养液;
[0021](2)若步骤(1)所述培养基未发生颜色变化、未产生气体,则供试液中不含日勾维多细菌源菌,终止实验;
[0022]若步骤(1)所述培养基发生颜色变化且产生气体,取培养液于卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基培养,若培养基上的菌落为灰色至深褐色,菌落周围的培养基为褐色至深褐色,则供试液中存在日勾维多细菌源菌。
[0023]采用上述方法检验日勾维多细菌源菌操作简便,且准确性高。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种日勾维多细菌源菌检验用培养基,其特征在于,所述日勾维多细菌源菌检验用培养基包括双倍葡萄糖胆盐培养基和卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基;所述双倍葡萄糖胆盐培养基包括蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、猪胆盐、葡萄糖、磷酸氢二钾、溴甲酚紫、卵磷脂和吐温80;所述卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基包括卵磷脂吐温80琼脂培养基、柠檬酸铁和七叶苷。2.根据权利要求1所述的日勾维多细菌源菌检验用培养基,其特征在于,所述双倍葡萄糖胆盐培养基以质量浓度计包括蛋白胨15
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19g/L、大豆木瓜蛋白酶水解物4
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8g/L、猪胆盐10
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14g/L、葡萄糖18
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22g/L、磷酸氢二钾4
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6g/L、溴甲酚紫0.02
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0.03g/L、卵磷脂2
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3g/L和吐温80 12
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16g/L。3.根据权利要求1或2所述的日勾维多细菌源菌检验用培养基,其特征在于,所述卵磷脂吐温80
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七叶苷琼脂培养基以质量浓度计包括七叶苷0.8
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1.2g/L和柠檬酸铁0.4
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0.5g/L。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的日勾维多细菌源菌检验用培养基的制备方法,其特征在于,所述双倍葡萄糖胆盐培养基的制备方法包括:将蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、猪胆盐、葡萄糖、磷酸...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘丰,周志,罗俊,王晓冲,王平,王冰,王晓炜,应国红,
申请(专利权)人:深圳市药品检验研究院深圳市医疗器械检测中心,
类型:发明
国别省市:
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