一种标记植物固醇的试剂及其应用和标记植物固醇的方法技术

本发明专利技术提供了一种标记植物固醇的试剂及其应用和标记植物固醇的方法，属于植物固醇检测技术领域，该试剂中的胆固醇炔烃类似物实现了特异性地与植物固醇结合，同时还不影响植物的自然生化反应，所采用的叠氮荧光化物抗激光淬灭能力强，能够在一定程度上减轻光照毒害，实现在活体状态下长时间观察的效果，因此，本发明专利技术的试剂荧光标记活体植物细胞中的固醇快速、高效、稳定、特异性强，从而能够直观的观察固醇在植物中的分布状态。本发明专利技术所述的标记植物固醇的方法，通过生物正交反应标记植物固醇，该方法操作较为简便，可重复性高。可重复性高。可重复性高。

【技术实现步骤摘要】
一种标记植物固醇的试剂及其应用和标记植物固醇的方法


[0001]本专利技术属于植物固醇检测
，尤其涉及一种标记植物固醇的试剂及其应用和标记植物固醇的方法。

技术介绍

[0002]甾醇属于大分子醇类，是自然界中广泛存在的一类甾族化合物。自然界中的甾醇根据其来源分为动物甾醇、菌甾醇和植物甾醇；植物甾醇又称植物固醇，存在于几乎所有植物细胞中，对人体健康具有重要作用，如在抗癌、防治前列腺疾病、消炎、调节代谢、调节体内激素水平等方面。
[0003]研究报道，植物固醇是细胞膜筏的重要组分，与膜的稳定性密切相关，主要通过固醇含量的相对变化来维持膜的稳定性及影响膜筏的生物学功能。目前，对于固醇的研究重点主要集中在固醇的合成通路上，对固醇的标记鲜有报道；其次，由于显微镜分辨率的限制，导致固醇的可视化研究尚存在许多障碍，从而无法实现对植物细胞中固醇的分布及功能机制的探究。迄今为止，缺少一种直接高效且可视化标记植物固醇的方法，尤其缺少一种新的荧光探针或染料来标记固醇的方法，以期达到既不影响“胆固醇的可及性”，又可显示胆固醇在质膜上分布情况的效果。因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种标记植物固醇的试剂，其特征在于，包括胆固醇炔烃类似物、叠氮荧光化物、一价铜；所述胆固醇炔烃类似物包括E
‑
CholesterolAlkyne、AlkyneCholesterol或27
‑
AlkyneCholesterol；所述叠氮荧光化物包括fluoresceinazide,6
‑
isomer、5
‑
TAMRAPicolylAzide或5
‑
azido
‑
fluorescein；所述胆固醇炔烃类似物的浓度为20～50μM；所述叠氮荧光化物的浓度为5～15μM。2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述一价铜通过抗坏血酸还原CuSO4·
5H2O制备得到。3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述抗坏血酸的工作浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔亚宁，徐昌文，林金星，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：