miR-200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了一种miR

【技术实现步骤摘要】
miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，尤其涉及一种miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用。

技术介绍

[0002]鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是发生于鼻咽部的恶性上皮肿瘤，我国南方如广东、香港、广西等地方和东南亚一些国家为其高发地区。放射治疗为鼻咽癌的主要治疗手段，大部分鼻咽癌患者通过放疗可获得良好的疗效，但临床上仍有约10～20％的患者经治疗后出现局部复发和远处转移，放疗抵抗是其主要原因之一。放疗过程中肿瘤细胞乏氧、DNA损伤修复、细胞增殖、细胞凋亡、转录及翻译等改变被认为是鼻咽癌放疗抵抗的影响因素。由于肿瘤放疗抵抗的影响因素众多，机制复杂，至今仍无统一的意见。因此，阐明鼻咽癌放射抗拒的机理，寻找放疗增敏靶向药物，可为鼻咽癌放疗增敏治疗提供新的思路。
[0003]上皮
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间质转化(epithelial
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mesenchymal transition，EMT)是指上皮细胞在特定的生理或病理条件下向间充质细胞分化的现象，表现为上皮细胞丧失原有特性而获得间充质细胞特性。EMT发生的基础事件是E
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钙黏蛋白(E
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cadherin)的丢失，可归为3个步骤：(1)E
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cadherin下调导致上皮细胞失去细胞间相互作用；(2)上皮细胞的CK结果改变，演变为纺锤形纤维细胞态；(3)上皮细胞上调波形蛋白等间质蛋白，获得间充质细胞的特性。通过以上步骤，上皮细胞间的细胞连接、骨架和极性都被改变，它们的变形、迁移、运动和抗凋亡等能力得到增强，从参与到细胞凋亡、细胞浸润和细胞侵袭等多种过程中。EMT在肿瘤侵袭转移过程的重要环节得到广泛认可；同时，研究还表明EMT是肿瘤放射抗拒的重要因素之一。相关的研究表明，EMT可以促进鼻咽癌的放疗、化疗抵抗。
[0004]c
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Jun原癌基因是即刻早期基因Jun家族成员之一，属于碱性亮氨酸拉链家族核内转录因子成员。细胞内c
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jun和Jun家族的其他成员或fos家族成员形成同源或异源二聚体，是AP
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1(activating protein
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1)核转录因子重要组成部分，与多种细胞因子及生长因子的转录调控密切相关，并且在多种恶性肿瘤中呈高表达。c
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Jun作为一个癌基因，在正常生理状态下短暂性激活。当c
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Jun活性异常增高或过表达时，会导致肿瘤细胞的增殖异常和凋亡障碍。c
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Jun作为AP
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1的主要组成部分，其生物学作用与AP
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1相似，对细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及恶性变的调控中发挥着重要作用。Gu et al等研究发现，c
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Jun激活参与维持神经胶质瘤干细胞存活，导致放射抗拒性增加；此外，在前列腺癌细胞中，体外、体内下调c
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Jun表达水平，能增加其对放射的敏感性。表明c
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Jun在肿瘤细胞中的异常升高，与肿瘤放射敏感性有密切联系。AP
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1参与了上皮细胞EMT过程，并促进乳腺癌等肿瘤细胞发生EMT。研究发现，E
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cadherin作为细胞EMT过程重要的标志蛋白分子，其在细胞中的表达可受到c
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Jun相关通路JNK调控。研究发现，c
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Jun在BRAF(V600)突变黑色素瘤细胞系中的高表达，与该细胞上皮间充质转化(EMT)有关，并可能与相关治疗药物的耐药有关；敲除或影响c
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Jun的表达，则可逆转EMT和药物耐药。申请者的研究结果表明，c
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Jun在鼻咽癌中呈高表达，并通过调控E
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cadherin蛋白而影响鼻咽癌细胞EMT水平。
[0005]近些年，MicroRNAs(miRNAs，miRs)受到研究者广泛的关注，使其成为肿瘤临床及基础研究的热点。miRNAs是一类长度在20～24nt的内源性、进化保守的非编码小RNAs，通过结合靶基因mRNA的3
’
UTR从而诱导其翻译或降解来调控靶基因表达以发挥生物学功能。一个miRNA可以调控多个靶基因mRNA，而一个mRNA又可能受多个miRNA调控。miRNAs在肿瘤中作用的研究已取得很大进展，miRNAs肿瘤放射治疗的不同阶段发挥生物学特性。研究发现，肿瘤细胞经电离辐射后其miRs的表达水平会发生显著的变化，miRs表达的变化与肿瘤凋亡、转移、辐射敏感性等方面起到重要调节作用。例如，电离辐射后人类细胞中miR
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200家族miRs的表达水平会显著增加，而miR
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200是P53直接靶点之一，P53蛋白在调控、凋亡等过程中均起到重要作用。FahimGolestaneh等研究发现miR
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29a、miR
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100、miR
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155是放射抗性和肿瘤间质通讯的调节因子。Grosso等发现miR
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210等乏氧诱导的miRs可以通过HIF
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1复合体而增加肺癌细胞的放射抵抗。FangX等研究发现miR
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196a可调节肿瘤放射敏感性。目前，miR
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203、miR
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24、miR
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19b
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3p、miR
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125b、miR
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483
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5p等被认为在鼻咽癌放射敏感性中起到重要调节作用。H
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CChen等研究发现，相比正常组织，鼻咽癌患者组织中miR
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200表达下调。
[0006]miR
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200家族主要包括miR
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200a、miR
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200b、miR
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200c、miR
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429、miR
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141五个成员。根据序列不同，又将该家族分为两个亚家族：miR
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200a/miR
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141亚家族和miR
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200b/miR
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200c/miR
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429亚家族。根据不同的基因组定位，miR
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200家族又分为两个基因簇：miR
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200a
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200b
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429位于1号染色体，miR
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200c
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141基因簇位于12号染色体。目前，miR
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200家族已被发现在大肠癌、卵巢癌、胆管癌、胰腺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤发展中起到重要调节作用；其主要作用机制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用。2.如权利要求1所述miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用，其特征在于，miR
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200靶向c
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Jun/E
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cadherin轴调控EMT影响鼻咽癌放射抵抗性。3.一种miR
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200在制备抑制鼻咽癌放射抵抗性用药物中的应用。4.一种实施如权利要求1～2任意一项所述miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中的应用的鉴定miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中应用的方法，其特征在于，鉴定miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中应用的方法包括：检测鼻咽癌组织、细胞的miR
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200的表达，构建裸鼠放射抗拒移植瘤模型；利用慢病毒介导技术、MTT/CCK8、克隆形成、PCR、Westernblot和双荧光素酶基因报告系统，结合targetscan、starbase和GCBI数据库靶基因预测，明确miR
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200在鼻咽癌临床组织及细胞株中的表达情况，分析miR
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200在对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响，确定miR
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200对鼻咽癌放射敏感性影响的分子机制。5.如权利要求4所述鉴定miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中应用的方法，其特征在于，鉴定miR
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200在制备鼻咽癌放疗增敏靶向药物中应用的方法包括以下步骤：步骤一，检测鼻咽癌病理组织及细胞中miR
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200的表达情况；步骤二，确定miR
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200对鼻咽癌放射敏感性的影响；步骤三，验证鼻咽癌中EMT对放射抗拒的影响；步骤四，明确miR
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200与c
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Jun/E
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cadherin的关系；步骤五，建立数据库并进行统计学分析。6.如权利要求5所述鉴定miR
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200在制备鼻咽...

【专利技术属性】
技术研发人员：林国享，朱小东，赵伟，张维明，农思凯，莫柒艳，黄欢，石丹丽，韩露，韩宇源，
申请(专利权)人：广西医科大学附属武鸣医院，
类型：发明
国别省市：