一种鉴定细胞凋亡和坏死的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种鉴定细胞凋亡和坏死的方法及其应用，涉及生物医药技术领域。通过双光子显微镜，荧光光谱以及荧光寿命成像显微镜，所有凋亡及坏死的细胞在1060nm激发后红荧光强度增加，相较于活细胞，凋亡细胞在溶酶体中表现出更长的脂褐素荧光寿命，然而坏死的细胞中显示出比较短的脂褐素荧光寿命。基于荧光寿命的对比，能够揭示经药物处理后的细胞的状态变化，该技术能够应用于药物的筛选，并且能够对生物医学研究以及运用的各个领域产生影响，例如绘制肿瘤微环境中治疗反应的异质性，在空间转录组学中注记单细胞耐药性，以及捕捉胚胎发育中细胞死亡的体内动态等。胚胎发育中细胞死亡的体内动态等。胚胎发育中细胞死亡的体内动态等。

【技术实现步骤摘要】
一种鉴定细胞凋亡和坏死的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体而言，涉及一种鉴定细胞凋亡和坏死的方法及其应用。

技术介绍

[0002]细胞凋亡是一种程序性的细胞死亡过程，其可以调节胚胎发育、控制病毒感染、消灭癌细胞并且维持组织内稳 态。其形态学特征包括染色质凝聚、DNA断裂、细胞收缩和凋亡小体的形成。细胞凋亡的异常能够导致各种疾病的 生成，譬如癌症、艾滋病、阿兹海默症以及自体免疫性疾病。这种细胞的老化机制被广泛运用于药物的开发、治疗 和评估，以及生物安全测试。
[0003]与细胞凋亡相反，坏死是一种被动的不受调控的细胞死亡模式。多数胞器，包括溶酶体都会完全的遭受破坏并 且释放内含物，导致发炎性的组织损伤。在肿瘤病理学背景下，肿瘤的急速生长通常会诱导细胞坏死以及瘤内缺氧， 细胞坏死产生的压力有很高的几率导致预后较差，像是对化疗产生抗药性。因此，细胞死亡的可视化以及死亡类型 的鉴别能够帮助评估癌症药物的药效学和治疗效果。
[0004]传统情况下，细胞老化是通过检测带有显色底物的β
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，其包括：对待测细胞中脂褐素和/或脂褐素吸附物质的荧光寿命进行实时检测，以荧光寿命的长短鉴定细胞凋亡和/或坏死；所述方法不以疾病的诊断或治疗为直接目的。2.根据权利要求1所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述方法还包括设定荧光寿命的凋亡阈值和/或坏死阈值；若待测细胞的荧光寿命≥凋亡阈值时，则判定待测细胞为凋亡细胞；若待测细胞的荧光寿命≤坏死阈值时，则判定待测细胞为坏死细胞。3.根据权利要求2所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述荧光寿命是指脂褐素透过单光子或双光子激发后荧光放射的衰减时间；优选地，所述荧光寿命是指脂褐素透过双光子激发后荧光放射的衰减时间。4.根据权利要求3所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述脂褐素的荧光寿命的检测条件为：单光子的激发波长为500～560nm，双光子的激发波长为970～1140nm，脂褐素的发射波长为550～800nm。5.根据权利要求3所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫映寒，刘子铭，邓初夏，
申请(专利权)人：澳门大学，
类型：发明
国别省市：