一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法技术

本发明专利技术属于植物培育领域，提供了一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，包括以下步骤：S1、选种：采用大花杓兰未开裂的蒴果；S2、预处理：对蒴果进行灭菌，所得种子备用；S3、原球茎萌发：选择Harvais改良培养基，将无菌种子放入进行接种培养；S4、原球茎生根：选择新的Harvais改良培养基，将萌发的原球茎转移到新的培养基中；S5、生根原球茎移栽：将培养基中分化阶段的原球茎进行移栽成苗；本发明专利技术通过对大花杓兰种子放置在改良后的Harvais培养基中，并在所设定的环境条件下使种子萌发率大于50％，有效提高原球茎分化效率，使不定芽增多，从而使大花杓兰通过种子培育得到快速繁殖。繁殖。繁殖。

【技术实现步骤摘要】
一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法


[0001]本专利技术属于植物培育领域，具体地说是一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法。

技术介绍

[0002]大花杓兰是一种茎直立，高25
‑
50厘米稍被短柔毛或变无毛，基部具数枚鞘，鞘上方具3
‑
4枚叶，叶片椭圆形或椭圆状卵形的植株，花较大，其花色为紫色、红色或粉红色，通常有暗色脉纹，极罕白色，其具有极高的观赏价值和药用价值。
[0003]通过文献(大花杓兰的组织培养与快速繁殖)和(濒危兰科植物大花杓兰种子非共生萌发的研究)可知，现有的大花杓兰种子在繁殖时存在以下问题：大花构兰种子细小,缺乏为其萌发提供营养的器官胚乳，在自然条件下很难萌发，只有在适宜的温度湿度等条件下,遇到特异的真菌并与之建立共生关系才能促进种子萌发，所以自然萌发较困难，分布较少，是国家II级保护植物。
[0004]然而，目前大花杓兰的人工培育研究主要处于原球茎萌发阶段，如何提高该阶段中原球茎的萌发率，原球茎生根研究和生根原球茎移栽育苗的文献较为缺乏，从而缺乏具体可供参考的实验数据；另外，萌发的原球茎如何长期保存也缺乏研究。可见，大花杓兰从种子到苗的人工培育研究还需要全面和深入的研究。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，以解决现有技术中原球茎长期保存、原球茎生根的具体技术参数问题，并完善大花杓兰从种子到苗的完整培育体系。
[0006]一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，包括S1、选种：采用大花杓兰未开裂的蒴果；
[0007]S2、预处理：对蒴果进行灭菌，所得种子备用；
[0008]S3、原球茎萌发：选择Harvais改良培养基，将无菌种子放入进行接种培养；
[0009]S4、原球茎生根：选择新的Harvais改良培养基，将萌发的原球茎转移到新的培养基中；
[0010]S5、生根原球茎移栽：将培养基中分化阶段的原球茎进行移栽成苗。
[0011]优选的，所述S2中灭菌处理操作为先刷洗蒴果外表面，使用自来水冲洗，将75％酒精没过果荚浸泡1min，并使用无菌水冲洗，再使用0.5％次氯酸钠溶液中浸泡15min,用无菌水冲洗,将蒴果置于无菌滤纸上，用滤纸吸干表面水分，无菌条件下用无菌解剖刀切除蒴果两端，纵向切开蒴果。
[0012]优选的，所述原球茎萌发阶段使用的Harvais改良培养基为去除原Harvais培养基中的NH4NO3，添加1mg/L的6
‑
BA，包含2％的土豆和葡萄糖，7g/L的琼脂，以及调整PH为5.8。
[0013]优选的，所述原球茎萌发阶段培养条件在(25
±
1)℃温度，暗培养下。
[0014]优选的，所述原球茎生根阶段使用的Harvais改良培养基为去除原Harvais培养基中的NH4NO3，添加0.5mg/L的6
‑
BA，包含2％的土豆和葡萄糖，7.5g/L的琼脂，以及调整PH为5.8。
[0015]优选的，所述原球茎生根阶段培养条件在(25
±
1)℃温度，暗培养下。
[0016]优选的，所述PH值的调整通过NaOH(1mol/L)和HCl(1mol/L)来调节，Harvais培养基含量为100ml。
[0017]优选的，所述S5中的移栽过程包括以下步骤：步骤一、将原球茎根达到4
‑
5厘米，有绿色出芽的生根原球茎取出进行移栽；步骤二、移栽至珍珠岩、蛭石、松针土、草炭土混合比例为1:1:1:1的移栽基质中；步骤三、每天进行喷水1次，光照12h，每周喷花宝一号营养液1次,3周后其成活率可达70％以上。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0019]本专利技术通过对大花杓兰种子放置在改良后的Harvais培养基中，并在所设定的环境条件下使种子萌发率大于50％，有效提高原球茎分化效率，使不定芽增多，从而使大花杓兰通过种子培育得到快速繁殖，还可以将萌发阶段的原球茎在正常状态下较长时间保存，同时对培养基中生根的原球茎可当做种子进行后续室外移栽等培育，经本实验培育的萌发阶段和分化阶段后的原球茎可以实现成苗。
附图说明
[0020]图1为本专利技术的大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法流程框图；
[0021]图2为本专利技术的原球茎萌发阶段实验对照数据表；
[0022]图3为本专利技术的原球茎生根阶段实验对照数据表；
[0023]图4为本专利技术的原球茎萌发阶段不同条件下存活率实验对照数据表。
具体实施方式
[0024]下面结合附图和实施例对本专利技术的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不能用来限制本专利技术的范围。
[0025]如附图1至附图4所示：
[0026]实施例一：本专利技术提供一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，包括，S1、选种：采用大花杓兰未开裂的蒴果；
[0027]S2、预处理：对蒴果进行灭菌，所得种子备用；
[0028]S3、原球茎萌发：选择Harvais改良培养基，将无菌种子放入进行接种培养；
[0029]S4、原球茎生根：选择新的Harvais改良培养基，将萌发的原球茎转移到新的培养基中；
[0030]S5、生根原球茎移栽：将培养基中分化阶段的原球茎进行移栽成苗。
[0031]具体的，所述S2中灭菌处理操作为先刷洗蒴果外表面，使用自来水冲洗，将75％酒精没过果荚浸泡1min，并使用无菌水冲洗，再使用0.5％次氯酸钠溶液中浸泡15min,用无菌水冲洗,将蒴果置于无菌滤纸上，用滤纸吸干表面水分，无菌条件下用无菌解剖刀切除蒴果两端，纵向切开蒴果。
[0032]具体的，所述原球茎萌发阶段使用的Harvais改良培养基为去除原Harvais培养基
中的NH4NO3，添加1mg/L的6
‑
BA，包含2％的土豆和葡萄糖，7.5g/L的琼脂，以及调整PH为5.8。
[0033]具体的，所述原球茎萌发阶段培养条件在(25
±
1)℃温度，暗培养下。
[0034]具体的，所述原球茎生根阶段使用的Harvais改良培养基为去除原Harvais培养基中的NH4NO3，添加0.5mg/L的6
‑
BA，包含2％的土豆和葡萄糖，7.5g/L的琼脂，以及调整PH为5.8。
[0035]具体的，所述原球茎生根阶段培养条件在(25
±
1)℃温度，暗培养下。
[0036]具体的，所述PH值的调整通过NaOH(1mol/L)和HCl(1mol/L)来调节，Harvais培养基含量为100ml。
[0037]由上可知，通过对大花杓兰种子放置在改良后的Harvais培养基中，并在所设定的环境条件下使种子萌发率大于50％，有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、选种：采用大花杓兰未开裂的蒴果；S2、预处理：对蒴果进行灭菌，所得种子备用；S3、原球茎萌发：选择Harvais改良培养基，将无菌种子放入进行接种培养；S4、原球茎生根：选择新的Harvais改良培养基，将萌发的原球茎转移到新的培养基中；S5、生根原球茎移栽：将培养基中分化阶段的原球茎进行移栽成苗。2.如权利要求1所述一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，其特征在于：所述S2中灭菌处理操作为先刷洗蒴果外表面，使用自来水冲洗，将75％酒精没过果荚浸泡1min，并使用无菌水冲洗，再使用0.5％次氯酸钠溶液中浸泡15min,用无菌水冲洗,将蒴果置于无菌滤纸上，用滤纸吸干表面水分，无菌条件下用无菌解剖刀切除蒴果两端，纵向切开蒴果。3.如权利要求1所述一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，其特征在于：所述原球茎萌发阶段使用的Harvais改良培养基为去除原Harvais培养基中的NH4NO3，添加1mg/L的6
‑
BA，包含2％的土豆和葡萄糖，7.5g/L的琼脂，以及调整PH为5.8。4.如权利要求3所述一种大花杓兰种子的非共生萌发、原球茎生根和成苗方法，其特征在于：所述原球茎萌发阶段培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊杰，郭鹏媛，李冲冲，秦楠，王颖莉，
申请(专利权)人：山西中医药大学，
类型：发明
国别省市：