一种鼠疫耶尔森菌的LAMP扩增检测方法技术

本发明专利技术属于生物学，涉及一种鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)的核酸检测，公开了一种等温扩增技术(LAMP)高效检测鼠疫耶尔森菌的检测方法。本发明专利技术包括LAMP引物设计、LAMP引物。所述所有引物如表1所示。本发明专利技术提出基于LAMP的鼠疫耶尔森菌检测方法，该方法具有灵敏度高、且特异性强和高效等优点；本方法可为常规核酸检测提供技术方法支持，具有广泛的实际现场应用前景。用前景。用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种鼠疫耶尔森菌的LAMP扩增检测方法


[0001]本专利技术属于分子生物学领域，涉及鼠疫耶尔森氏杆菌检测领域，具体涉及一种环介导等温扩增检测方法。

技术介绍

[0002]鼠疫是一种人畜共患的自然疫源性传染病，因具有病程短、传染性强、传播速度快、致死率高的流行病学特点，在我国被列为甲类传染病
[1]。鼠疫通常通过跳蚤叮咬传播给人类，另外可以通过受感染的动物导致的污染性食物或气溶胶进行传播
[2]。根据鼠疫的接触途径和临床表现，主要分为腺鼠疫、肺鼠疫和败血症鼠疫三种类型。全球目前曾爆发过3次鼠疫大流行，据统计鼠疫共导致了2亿人死亡
[3]。
[0003]鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis，简称“鼠疫杆菌”)引起的，这是一种革兰氏阴性球菌。鼠疫杆菌的致病性是由pFra/pMT1、pYV/pCD1、pPla/pPCP1三个毒力质粒和染色体编码的毒力因子组成，其中pMT1质粒编码鼠毒素和F1荚膜抗原这两个毒力因子
[3]。F1荚膜抗原是一种高度免疫原性蛋白质，通常被认为是鼠疫杆菌完全毒力所必需的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鼠疫耶尔森菌caf1基因的LAMP检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a)设计合成引物；所述引物由上游内部引物FIP、下游内部引物BIP、上游外部引物F3和下游外部引物B3，上游环引物LF和下游环引物LB组成，所述引物的碱基序列如SEQ ID No：1～5；b)配制LAMP反应体系并设定反应条件；c)进行LAMP方法反应效率检测；d)进行LAMP方法特异性检测；e)进行LAMP方法灵敏度检测；f)进行LAMP方法可视化检测。2.根据权利要求1所述的鼠疫耶尔森菌的LAMP检测方法，其特征在于，步骤c)中，所述LAMP反应体系的配置方法为：将1μL的DNA(10ng/μL)稀释液加入到23μL反应体系中；所述23μL的反应体系包括以下体积含量的各组分：LAMP反应条件为：65℃扩增反应60min。3.根据权利要求1所述的鼠疫耶尔森菌的LAMP扩增特异性检测方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张大兵，杨立桃，
申请(专利权)人：浙江予智生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：