一种猪氟烷基因快速分型试剂盒及其检测方法技术

技术编号:38487030 阅读:29 留言:0更新日期:2023-08-15 17:02
本发明专利技术公开了一种猪氟烷基因快速分型试剂盒及其检测方法,涉及生物技术领域。本发明专利技术试剂包括引物预混液、探针法荧光定量PCR预混液和ddH2O。本发明专利技术方法通量大,一次可以同时对96个或者384个样本进行基因分型检测,适用于猪氟烷基因的大规模筛查,特别适用于大中型商业猪场。业猪场。业猪场。

【技术实现步骤摘要】
一种猪氟烷基因快速分型试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及生物
,更具体的说是涉及猪氟烷基因快速分型试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]氟烷基因(HaΙ)又称骨骼肌钙离子释放通道基因或兰尼定受体基因(RYR1),由一对等位基因HaΙN和HaΙn组成,并构成HaΙNN(野生型)、HaΙNn(杂合型)和HaΙnn(突变型)3种基因型,是导致猪应激综合征(Porcine stress syndrome,PSS)的主效基因。该基因定位在猪染色体6p11

q21上,它是由RYR1中C1843突变为T1843,使受体蛋白第615位精氨酸变成了半胱氨酸,引起结构与功能的改变。当应激因子作用时,Ca2+大量非正常释放,引起肌肉持续收缩,从而产生PSS,其表现为呼吸急促、心跳加快、肌肉僵直、后肢呈现痉挛性收缩,甚至死亡,屠宰后产生PSE(Pale,soft,exudative)肉或DFD(Dark,firm,dry)肉,给养殖业造成巨大经济损失。据研究,氟烷基因阳性纯合子猪(nn),即使采用最优处理条件,其产生PSE肉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪氟烷基因快速分型试剂盒,其特征在于,反应预混液包括引物预混液、探针法荧光定量PCR预混液和ddH2O;其中引物预混液:混合液中四条引物浓度均为10μM,引物序列如下:上游引物:5
’‑
TTCCCTGTGTGTGTGCAATG
‑3’
,如SEQ ID No.1所示;下游引物:5
’‑
ATGAGGTTTGTCTGCAGCAG
‑3’
如SEQ ID No.2所示;探针引物1:FAM
‑5’‑
CTTGGTTGGAGCACAC
‑3’‑
mgb如SEQ ID No.3所示;探针引物2:VIC
‑5’‑
CTTGGTTGGAGCGCAC
‑3’‑
mgb如SEQ ID No.4所示。2.根据权利要求1所述的一种猪氟烷基因快速分型试剂盒,其特征在于,反应总体系为反应预混液+模板DNA;反应总体系以体积分数计为20份,具体为:探针法荧光定量PCR预混液10份、引物预混液2份、模板DNA2

4份,其余为ddH2O;反应总体系的模板DNA终浓度为10

100ngDNA/反应总体系体积。3.根据权利要求1所述的一种猪氟烷基...

【专利技术属性】
技术研发人员:田明何鑫淼刘娣
申请(专利权)人:黑龙江省农业科学院畜牧研究所
类型:发明
国别省市:

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