一种多核苷酸的测序方法技术

本发明专利技术公开一种多核苷酸的测序方法。在多碱基底物进行测序的时候，特别是每次进入可检测标记的两种不同的核苷酸单体的时候，在部分的测序反应中，将其中的一种核苷酸单体去除，从而达到降低失相造成的信号偏差的目的。相比于现有技术，在长读长的条件下，依然可以得到较高的主相位比例，即较低的失相程度，具有较高的信噪比，更有利于信号的复原。更有利于信号的复原。更有利于信号的复原。

【技术实现步骤摘要】
一种多核苷酸的测序方法


[0001]本专利技术涉及一种多核苷酸的测序方法，属于基因测序领域。

技术介绍

[0002]在第二代基因测序技术中，目前通常采用的方案的都是边合成边测序(SBS)的方法，需要借助化学反应过程，不同的碱基反应释放出不同的信号，通过检测这些信号来判断所测到的碱基序列是什么。
[0003]在测序过程中，需要大量相同的DNA分子同时反应来放大信号。但是由于化学反应存在反应不完全的情况，会造成少量DNA分子比其他分子落后，即滞后(或称lag)；由于底物的中的杂质，也会造成少量DNA分子比其他分子反应超前(或称lead)。由于超前和滞后反应的存在，同一克隆的分子之间的测序反应逐渐丧失同步性，即失相，失相会随着测序反应的进行而积累，最终将对碱基识别(base calling)造成严重干扰，缩短了测序读长。
[0004]Ion torrent的专利(CN201610091056.1)试图通过改变4种核苷酸的进样顺序来缓解失相所造成的信号偏差。例如的，使用改进的12轮循环进样流程：AGA
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多核苷酸的测序方法，其特征在于，包括：提供多条固定的多核苷酸模板链；提供测序试剂，按照预先测序反应顺序进行反应；在所述预先测序反应顺序中，主要包括两种不同的测序试剂：第一测序试剂和第二测序试剂；在测序反应循环中，两种测序试剂交替循环加入；其中所述第一测序试剂包含具有可检测标记的两种不同的核苷酸单体；所述第二测序试剂包含具有可检测标记的两种不同的核苷酸单体，且所述两种不同的核苷酸单体均不同于所述第一测序试剂中存在的所述核苷酸单体，并且其中所述第二测序试剂是在提供了所述第一测序试剂随后提供的，将所述核苷酸单体掺入所述多核苷酸之后检测所述可检测标记生成的信号；在预先选定的部分测序反应循环中，通入的测序试剂仅包含按照所述预先测序反应顺序应加入的测序试剂中的两种核苷酸单体中的一种；所述测序反应指的是3
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端不封闭的测序反应。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,C，第二测序试剂包含G,T；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该测序试剂可以只包含A或者只包含C；当预先选定的测序反应循环原本应加入第二测序试剂时，该测序试剂可以只包含G或者只包含T。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,G，第二测序试剂包含C,T；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该测序试剂可以只包含A或者只包含G；当预先选定的测序反应循环原本应加入第二测序试剂时，该测序试剂可以只包含C或者只包含T。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,T，第二测序试剂包含C,G；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该...

【专利技术属性】
技术研发人员：李昂，周文雄，
申请(专利权)人：赛纳生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：