一种包括外泌体在内的细胞外囊泡连续浓缩纯化提取系统及方法技术方案

本发明专利技术涉及一种包括外泌体在内的细胞外囊泡连续浓缩纯化提取系统及方法，属于生物技术领域。该系统包括原液罐、初级过滤装置、中间产物容器、浓缩纯化装置、第一电控三通阀、第二电控三通阀、控制器、第一恒流泵、第二恒流泵、第三恒流泵、缓冲液容器、过滤除菌装置和终产物容器，所述中间产物容器、第二恒流泵、浓缩纯化装置、第一电控三通阀和第二电控三通阀连接成循环浓缩纯化回路。本发明专利技术利用该系统对含有细胞外囊泡的液体进行过滤后，将滤出液循环浓缩，向循环浓缩纯化回路中泵入缓冲液，以对浓缩后的液体进行连续清洗纯化，加快纯化速度；通过优化工艺参数，使杂质和细胞外囊泡分离，降低细胞外囊泡损失，提高细胞外囊泡提取液的纯度。纯度。纯度。

【技术实现步骤摘要】
一种包括外泌体在内的细胞外囊泡连续浓缩纯化提取系统及方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种包括外泌体在内的细胞外囊泡连续浓缩纯化提取系统及方法。

技术介绍

[0002]细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体，其内包含了许多不同种类的生物活性分子，如蛋白质、DNA、RNA、脂质、代谢物等。细胞外囊泡常根据其大小和释放途径分为：外泌体(exosomes)，直径约为30
‑
150nm，起源于内吞途径；微囊泡(microvesicles)，质膜出芽释放，直径约100
‑
1000nm；和凋亡小体(apoptotic body)，直径约1
‑
5μm，由凋亡细胞产生。国际细胞外囊泡学会发表指南性文件将提取的<200nm的细胞外囊泡称为小细胞外囊泡(small extracellular vesicles,sEVs)。几乎所有细胞都可以产生细胞外囊泡，也可由培养的细胞如间充质干/基质细胞(m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包括外泌体在内的细胞外囊泡连续浓缩纯化提取系统，其特征在于，包括原液罐、初级过滤装置、中间产物容器、浓缩纯化装置、第一电控三通阀、第二电控三通阀、控制器、第一恒流泵、第二恒流泵、第三恒流泵、缓冲液容器、过滤除菌装置和终产物容器，其中，所述原液罐、第一恒流泵及初级过滤装置通过管道依次连接，所述初级过滤装置的滤出口通过管道与所述中间产物容器的入口连接，所述中间产物容器、第二恒流泵、浓缩纯化装置、第一电控三通阀和第二电控三通阀依次连接成循环浓缩纯化回路，所述中间产物容器的空气入口通过管道依次连接有电控阀和空气过滤器，所述中间产物容器的出口通过管道和第二恒流泵与所述浓缩纯化装置的入口连接，所述浓缩纯化装置的滤出口通过管道连接有废液容器，所述缓冲液容器、第三恒流泵及第一电控三通阀通过管道依次连接，所述第二电控三通阀、过滤除菌装置和终产物容器通过管道依次连接，所述第一恒流泵、第二恒流泵、第三恒流泵、第一电控三通阀、第二电控三通阀及电控阀分别与所述控制器电性连接。2.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述初级过滤装置包括至少一个囊式死端过滤器，所述囊式死端过滤器具有单层滤膜或双层滤膜，所述滤膜的孔径为0.15～1.0μm。3.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述初级过滤装置包括至少一个切向流过滤器，所述切向流过滤器具有孔径为0.2～0.22μm的滤膜。4.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述浓缩纯化装置为平板滤膜或中空纤维柱；所述浓缩纯化装置的截留分子量为50～750KD。5.如权利要求1所述的系统，其特征在于，包括以下(Ⅰ)～(Ⅳ)中的至少一种：(Ⅰ)所述第一电控三通阀与第二电控三通阀之间的管道上设置有蛋白浓度检测器，所述蛋白浓度检测器与所述控制器电性连接；(Ⅱ)所述第一恒流泵与初级过滤装置入口之间的管道上设置有第一压力计，所述第二恒流泵与浓缩纯化装置之间的管道上设置有第二压力计，所述第一压力计和第二压力计分别与所述控制器电性连接；(Ⅲ)所述初级过滤装置与所述中间产物容器之间的管道上...

【专利技术属性】
技术研发人员：付清玲，吴子聪，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：