一种驼皮胶原蛋白肽提取方法技术

本发明专利技术公开了一种驼皮胶原蛋白肽的提取方法，包括如下步骤：S1.驼皮处理；S2.匀浆液制备；S3.胶原蛋白提取；S4.双酶水解胶原蛋白活性肽的提取。本发明专利技术通过特定组合的工艺步骤及参数条件进行驼皮处理、匀浆液的制备、超声辅助酶法提取骆驼皮胶原蛋白，得到胶原蛋白，再通过双酶水解胶原蛋白获得生物活性肽。采用超声辅助提取骆驼皮胶原蛋白方法蛋白提取率高，且不会破坏蛋白结构。在此基础上，通过双酶法水解骆驼皮胶原蛋白，获得的胶原蛋白多肽数量多且具有良好抗氧化能力。该方法制得的骆驼皮胶原蛋白肽可制成各种护肤品，应用于缓解皮肤老化。该制备方法简单可行、成本低、得率高。得率高。得率高。

【技术实现步骤摘要】
一种驼皮胶原蛋白肽提取方法

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[0001]本专利技术涉及胶原蛋白肽的提取方法，尤其涉及一种驼皮胶原蛋白肽提取方法。

技术介绍
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[0002]骆驼体格大，役力强，乘、挽、驮均可，它既是荒漠草原人民同大自然斗争的交通工具和劳作伙伴，也为牧民提供了基本的生活资料和经济收益。骆驼全身都是宝，可以为社会提供毛(绒)、肉、乳、皮、骨等畜产品和供使用等多种用途；虽然随着经济发展，骆驼多作为旅游参观动物被饲养，但骆驼因耐粗饲、耐饥饿、耐干渴、耐寒冷、耐风沙等特性，目前在我国西北沙漠地区仍有大量喂养。
[0003]骆驼皮益气血，壮筋骨，润肌肤，主治恶疮，具有一定的药用价值，但是，目前对骆驼皮的深加工研究较少，往往采用骆驼屠杀后剥下的鲜皮(保留毛)经过鞣制、整理、晾晒制成生皮(又叫板皮)，然后利用生皮制作生活日用品，如手工艺品、皮包和皮鞋等。随着时代的发展与科技的进步，涌入了大量现代材料所制成的日常用品，许多传统的皮质生活器具越来越少见。且在牧区交通不便且条件有限，牧民宰杀骆驼后，只注重食肉价值，许多骆驼皮被弃置，未能充分发挥它的价值。骆驼皮具有张幅大、产量多且价格较低的特点，是物美价廉的优质原料皮。通常，将富含胶原纤维的皮肤或肌腱等组织通过中性盐、酸、碱和蛋白酶处理来提取胶原蛋白，相比之下，在0.5mol/L的乙酸中使用胃蛋白酶提取胶原蛋白可以获得更高的提产量，尽管在酶的作用下胶原蛋白的端肽会被水解切割，但其三螺旋结构可基本保持完整。然而这些常规的提取方法效率不高，且在提取过程中会造成大量的胶原组织残留物。目前，低强度的超声波作为一种非破坏性、安全高效的辅助提取方式已被广泛应用在食品加工、蛋白质等物质的提取及改性中。

技术实现思路
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[0004]为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种驼皮胶原蛋白肽提取方法。
[0005]本专利技术由如下技术方案实施：一种驼皮胶原蛋白肽提取方法，包括如下步骤：S1.驼皮处理；S2.匀浆液制备；S3.胶原蛋白提取；S4.单酶水解胶原蛋白活性肽的制备；
[0006]其中，所述S2.匀浆液制备：将S1处理后的骆驼皮加水，捣碎，控制物料温度不超过25℃，捣碎后离心去除多余水分；将捣碎后样品加入到0.3
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0.8mol/L的乙酸介质中，料液质量体积比为1:8
‑
15，继续捣碎混匀，制得匀浆液；
[0007]所述S3.胶原蛋白提取：将S2制备得到的匀浆液制备得到的匀浆液浸泡于0.5mol/L的乙酸溶液中，料液比1：10
‑
30(g/mL)，分别加入样品质量4
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8％的胃蛋白酶，以200W的功率超声15
‑
30min(工作时间5s，停歇时间5s，采用冰浴的方式进行超声)，低温条件下搅拌提取40
‑
55h；
[0008]在提取液中加NaCl至浓度0.9mol/L盐析20
‑
30h，离心分离后，沉淀物中加入0.3
‑
0.8mol/L乙酸溶液，搅拌充分溶解后用0.1mol/L乙酸透析24h，再用水透析24h，经冷冻干燥得到驼皮胶原蛋白；
[0009]所述S4.双酶水解胶原蛋白活性肽的制备：利用中性蛋白酶+碱性蛋白酶(1:1)对所述S3.胶原蛋白提取得到的驼皮胶原蛋白进行振荡酶解，在pH8
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10、加酶量5000
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7000U/g、温度40
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60℃下酶解和时间4h条件下，酶解后水解胶原蛋白经超滤离心，获得＜3KDa的胶原蛋白肽溶液，并经浓缩后冷冻干燥成粉末，得到驼皮胶原蛋白肽。
[0010]优选的，所述S1.驼皮处理包括：
[0011]S1.1挑拣：对骆驼皮毛长的部位进行修剪，去除多余的附肉、脂肪杂质；
[0012]S1.2浸泡：骆驼皮用蒸馏水冲洗干净，将骆驼皮切分为大块状，加入质量分数0.5％ Na2CO3浸泡后，洗净备用；
[0013]S1.3去毛：浸泡后的原料皮中加入0.5
‑
1％中性蛋白酶，温度控制在5
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8℃，保温去毛；
[0014]S1.4脱脂：将脱毛后的骆驼皮切分为小块状，加入5％ Na2CO3浸泡搅拌脱脂后，洗净备用；
[0015]S1.5去除盐溶性非胶原成分：脱脂后的原料加入10
‑
15％ NaCl浸泡搅拌，洗净备用。
[0016]本专利技术的优点：
[0017]本专利技术通过特定组合的工艺步骤及参数条件进行驼皮处理、匀浆液的制备、超声辅助酶法骆驼皮胶原蛋白提取，双酶水解胶原蛋白活性肽的制备，得到胶原蛋白肽，该驼皮胶原蛋白肽具有良好的抗氧化性；此外，驼皮胶原蛋白肽来源于脊椎动物的胶原，其分子量和结构与人体的相似，与人肌体、皮肤具有良好的同源性和相容性。基于以上特性，本方法中制备的驼皮胶原蛋白制品外用可涂于皮肤表面并快速溶入表皮，内服可保持自身活性功效，于体内快速吸收。
附图说明：
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1是实施例1和实施例2的SDS
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PAGE图谱
[0020]图中：1是分子质量标样，PSC表示实施例1中常规酶法提取胶原蛋白SDS
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PAGE电泳图；UPSC表示表示实施例2中采用超声辅助酶法提取胶原蛋白SDS
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PAGE电泳图；
[0021]图2是实施例1和实施例2的紫外吸收光谱(A)和傅立叶变换红外光谱(B)
[0022]图中：PSC表示采用实施例1中常规酶法提取胶原蛋白的结构图；UPSC表示采用实施例2中超声辅助酶法提取胶原蛋白提取胶原蛋白的结构图。
具体实施方式：
[0023]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]实施例1：
[0025]1.原料预处理
[0026]挑拣：对骆驼皮毛长的部位进行修剪，去除多余的附肉、脂肪等杂质；浸泡：冷冻的骆驼皮在4℃解冻后，用蒸馏水冲洗干净。将骆驼皮切分为5cm
×
5cm的块状，盆中加入0.5％Na2CO3浸泡数小时后，蒸馏水洗净备用；
[0027]去毛：浸泡后的原料皮中加入0.6％的1398中性蛋白酶，温度控制在25℃，保温去毛4h；
[0028]脱脂：将脱毛后的骆驼皮切分为0.5cm
×
0.5cm小块，称取适量样品加入5％Na2CO3，料液比为1:10本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种驼皮胶原蛋白肽提取方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1.驼皮处理；S2.匀浆液制备；S3.胶原蛋白提取；S4.双酶水解胶原蛋白活性肽的制备；其中，所述S2.匀浆液制备：将S1处理后的骆驼皮加水，捣碎，控制物料温度不超过25℃，捣碎后离心去除多余水分；将捣碎后样品加入到0.3
‑
0.8mol/L的乙酸介质中，料液质量体积比为1:8
‑
15，继续捣碎混匀，制得匀浆液；所述S3.胶原蛋白提取：将S2制备得到的匀浆液浸泡于0.5mol/L的乙酸溶液中，料液比1：10
‑
30g/mL，分别加入样品质量4
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8％的胃蛋白酶，采用冰浴的方式超声15
‑
30min，超声时工作5s，停歇5s，低温条件下搅拌提取40
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55h；在提取液中加NaCl至浓度0.9mol/L盐析20
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24h，离心分离后，沉淀物中加入0.3
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0.8mol/L乙酸溶液，搅拌充分溶解后用0.1mol/L乙酸透析24h，再用水透析24h，经冷冻干燥得到驼皮胶原蛋白；所述S4.双酶水解胶原蛋白活性肽的制备：...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉日木图，何静，明亮，伊丽，斯仁达来，
申请(专利权)人：内蒙古中哈骆驼研究院，
类型：发明
国别省市：