一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法，包括1）毛竹未成熟种子消毒后取出种胚，将其接种于愈伤组织诱导培养基中诱导愈伤组织；2）将诱导获得的毛竹愈伤组织进行增殖培养，将步骤1）的愈伤组织挑选淡黄色松散型愈伤组织建立毛竹愈伤组织悬浮体系。本发明专利技术方法可有效提高毛竹愈伤组织增殖率，且状态相对一致，建立稳定高效的悬浮体系，可为毛竹的再生体系、瞬时转化体系及农杆菌介导的稳定遗传转化体系的建立奠定基础，还可为毛竹等散生竹种的遗传改良提供帮助。的遗传改良提供帮助。的遗传改良提供帮助。

【技术实现步骤摘要】
一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法


[0001]本专利技术属于植物快繁
，具体涉及一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法。

技术介绍

[0002]毛竹（Phyllostachys edulis），禾本科（Poaceae）竹亚科（Bambusoideae）刚竹属（Phyllostachys）多年生草本植物，单轴散生，集食用、材用、观赏等多种用途于一体，具有极高的经济价值和生态效益。而当前毛竹愈伤组织分化率低、周期长，再生体系不稳定等问题，为散生竹的转基因工作带来了巨大困难。
[0003]而大量稳定增殖的愈伤组织是毛竹再生体系及遗传转化体系建立的基础。植物细胞悬浮培养技术是植物组织培养中的一种重要方法，即将植物细胞置于液体培养基中震荡培养。利用植物细胞悬浮培养体系可在较短时间内获得大量且状态均一的植物细胞，因此，细胞悬浮培养体系被广泛应用于体细胞杂交、基因工程以及次生代谢物培养等方面。因此，借助悬浮培养技术可获得大量的、状态相对一致的毛竹愈伤组织，可为毛竹再生体系奠定一定基础，为解决遗传转化体系建立提供一定保障。本申请从摇床转速、初始接种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法，其特征在于，该建立方法包括以下步骤：1）毛竹未成熟种子消毒后取出种胚，将其接种于愈伤组织诱导培养基中培养，获得毛竹愈伤组织；2）将诱导获得的毛竹愈伤组织进行增殖培养，选取淡黄色松散型愈伤组织转移到相应的液体培养基中于恒温摇床中黑暗培养，稳定继代培养后建立毛竹愈伤组织悬浮体系。2.如权利要求1所述的一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法，其特征在于步骤1）中的毛竹种子的处理过程为：将未成熟毛竹种子剥去外壳
→
流水冲洗2
‑
4h
→
75%酒精消毒1min
→
1.5%次氯酸钠溶液真空抽滤消毒18min
→
无菌水冲洗4
‑
5次，在体视显微镜下剥离毛竹未成熟种胚将其接种于毛竹愈伤组织诱导培养基中黑暗培养。3. 如权利要求1所述的一种毛竹愈伤组织悬浮体系的建立方法，其特征在于步骤1）中诱导培养基选用WPM基础培养基，pH为5.8，该培养基中添加了0.1 mg/L TDZ、4.0mg/L2，4
‑
D、0.5mg/LBA、15g/L蔗糖、5g/L麦芽糖及占培养基总量0.36%的gelrite。4. 如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：林新春，孔思梦，杨心怡，王凯婷，周小红，侯丹，李翔宇，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：