改造的大肠杆菌及其在发酵生产L-缬氨酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了改造的大肠杆菌及其在发酵生产L

【技术实现步骤摘要】
改造的大肠杆菌及其在发酵生产L
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缬氨酸中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及改造的大肠杆菌及其在发酵生产L
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缬氨酸中的应用。

技术介绍

[0002]L
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缬氨酸在食品、医药、保健品﹑饲料等领域均有着重要的应用。目前，国内已有多家企业通过发酵法进行L
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缬氨酸的生产，很多实验室也在开展关于L
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缬氨酸发酵工艺研究的课题。研究人员发现，胞内L
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缬氨酸透过细胞膜分泌到胞外的过程需要特定转运蛋白的参与，但在该过程中，特定转运蛋白活性不能满足及时将胞内缬氨酸透过细胞膜分泌到胞外，导致胞内L
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缬氨酸积累；同时，在菌体细胞内含有乙酰羟酸合酶，乙酰羟酸合酶对L
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缬氨酸的生物合成有催化作用，可以促进产酸，但是当菌体细胞内合成的L
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缬氨酸不能及时外排产生积累时，乙酰羟酸合酶受到L
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缬氨酸的强烈抑制，其催化作用下降，不能进一步催化合成L
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种工程菌，为体内抑制或下调丙酮酸甲酸裂解酶的表达量和/或活性的大肠杆菌；所述大肠杆菌可以生产缬氨酸；所述丙酮酸甲酸裂解酶的氨基酸序列如SEQ ID No：13所示。2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的体内还抑制或下调乙醇脱氢酶的表达量和/或活性；所述乙醇脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID No：14所示。3.根据权利要求2所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的体内还抑制或下调大肠杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的表达量和/或活性且含有或表达枯草芽孢杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶；所述大肠杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：15所示；所述枯草芽孢杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：16所示。4.根据权利要求3所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的体内还抑制或下调硫胺磷酸合酶的表达量和/或活性；所述硫胺磷酸合酶的氨基酸序列如SEQ ID No：17所示。5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的体内还抑制或下调苹果酸脱氢酶的表达量和/或活性；所述苹果酸脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID No：18所示。6.制备生产缬氨酸的工程菌的方法，包括步骤（a1）：降低大肠杆菌中丙酮酸甲酸裂解酶的表达量和/或活性；所述大肠杆菌可以生产缬氨酸；所述丙酮酸甲酸裂解酶的氨基酸序列如SEQ ID No：13所示。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述制备方法还包括步骤（a2）：完成步骤（a1）后，降低大肠杆菌中乙醇脱氢酶的表达量和/或活性；所述乙醇脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID No：14所示。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述制备方法还包括步骤（a3）：完成步骤（a2）后，降低所述大肠杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的表达量和/或活性且在所述大肠杆菌中表达枯草芽孢杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶；所述大肠杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：15所示；所述枯草芽孢杆菌来源的分支链氨基酸转氨酶的氨基酸序列如SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟刚，赵春光，魏爱英，苏厚波，张英，张晓琴，毕国东，王攀，
申请(专利权)人：北京中科伊品生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：