一种用于提高PCR反应特异性的捕获探针及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于提高PCR反应特异性的捕获探针，所述捕获探针为在捕获序列的5

【技术实现步骤摘要】
一种用于提高PCR反应特异性的捕获探针及其应用


[0001]本专利技术涉及基因检测
，具体地，涉及一种用于PCR反应特异性的捕获探针及其应用。

技术介绍

[0002]分子检测是一种灵敏度非常高的方法，分子检测方法主要可以分为PCR检测和测序两大类。其中PCR技术包括一代常规PCR技术、二代荧光PCR技术以及目前处于高速发展期的三代数字PCR技术。随着技术的发展与成熟，PCR技术已经被广泛应用于血筛、传染病、性病、遗传性疾病、肿瘤伴随诊断等检测场景。
[0003]PCR技术因其简单、快速、高效和成本低等优势，已经成为当下分子检测不可或缺的一种检测方法，但同时PCR检测的缺点也非常明显，即在灵敏度非常高的情况下，检测结果容易出现“假阳性”，尤其是在染料法定性的PCR扩增中更加严重，究其原因具体为：探针灵敏度高，与目标区域结合的能力非常强，同时探针与目标区域序列相似的非目标区域的结合能力也会假期，如果人工探针与非目的靶标片段发生结合并发数扩增，在足够多的扩增循环数里，错误的产物也会进行指数级别增长，最终造成错误的“阳性”判断。值得一提的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于提高PCR反应特异性的捕获探针，其特征在于，所述捕获探针为在捕获序列的5
’
端设置有固相颗粒；所述固相颗粒通过化学基团与捕获序列连接；所述固相颗粒表面带有修饰基团，所述修饰基团与捕获序列形成稳定化学基团。2.根据权利要求1所述的捕获探针，其特征在于，所述固相颗粒为磁性微球。3.一种提高PCR特异性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将权利要求1所述捕获探针和待检测样本的核酸按照0.05～0.5μM：1～500ng混合进行退火延伸，得到退火延伸反应液；S2.对步骤S1得到的退火延伸反应液进行沉淀，固液分离后收集沉淀；S3.用Tris
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HCl缓冲液对步骤S2得到的沉淀进行洗涤，得到洗涤后沉淀；S4.去除洗涤后沉淀中的液体后与无核酸酶水混合，充分混匀后得到产物溶液，以产物溶液作为模板进行PCR扩增；其中，步骤S1得到的退火延伸反应液、步骤S3的Tris
‑
HCl缓冲液和步骤S4的无核酸酶水之间的体积比为5：10～...

【专利技术属性】
技术研发人员：许明炎，张晓妮，周书雄，
申请(专利权)人：深圳海普洛斯医学检验实验室，
类型：发明
国别省市：